肝硬化患者非O1非O139型霍乱弧菌败血症

目的分析非O1非O139型霍乱弧菌感染的肝硬化败血症患者的临床和实验室特点。方法回顾调查病人的临床基本情况、原发病、实验室结果、治疗和预后;BacT/Alert全自动血培养微生物检测仪培养病人全血标本,用VITEK仪器鉴定细菌。药敏试验根据CLSI(2005)规定,K-B药敏纸片测定法进行。结果3例患者均为肝硬化病人;感染发生在夏季;经左氧氟沙星、加替沙星或联用头孢曲松治疗后痊愈。结论非O1非O139型霍乱弧菌败血症推荐使用头孢三代或氟喹诺酮类抗生素治疗。

非O1、非O139型霍乱弧菌中首次发现PER-1超广谱β内酰胺酶

目的明确非O1、非O139型霍乱弧菌中ESBL的基因型及其遗传背景,以探讨该耐药基因传播的机制。方法通过表型确证试验确定细菌是否产生ESBL,通过接合试验了解ESBL是否由质粒介导,通过PCR扩增和序列分析确定ESBL的基因型,通过反向PCR和序列分析了解ESBL基因两侧的结构。结果 ESBL表型确证试验确认菌株RJ354为产ESBL菌株,接合试验证实ESBL基因位于可接合质粒上,PCR、反向PCR扩增和序列分析确定其基因型为blaPER-1,该基因上游序列为ORF513,下游为gst-like基因。结论本研究国际上首次在从非O1、非O139型霍乱弧菌中检出了PER-1型ESBL,而且首次发现该酶基因与一种新的基因元件ISCR1相连,后者可能介导前者的水平转移。

从腹泻患者的呕吐物中检出O139型霍乱弧菌株的报道

目的通过对医院报告的腹泻患者金标法霍乱弧菌阳性患者及周围环境进行检测及研究,为制定临床治疗措施提供依据。方法采集患者呕吐物、肛拭及周围水样进行霍乱弧菌分离培养,按1999年《霍乱防治手册》第五版及相关资料进行检测。结果从呕吐物、肛拭、井水、化粪池水中检出O139型霍乱弧菌。结论我市存在O139型霍乱弧菌引起的腹泻病例,须加强疫情监测。

O139型霍乱弧菌微生物学特征的实验

对一株O139型霍乱弧菌的微生物学特性及其对抗菌药物的敏感性作了初步研究,发现此菌在会3％氯化钠的肉汤琼脂与TCBS培养基上易变异成粗糙型;药敏试验证明它对氟哌酸、氧氟沙星、卡那霉素、痢特灵、氨苄青霉素、强力霉素敏感,对氯霉素、四环素、丁胺卡那霉素中度敏感,对黄连素、复方新诺明、灭满灵耐药;并发现食醋、大蒜、茶叶有杀菌或抑菌作用,经常食用,有一定的预防作用。

非O1群霍乱弧菌O139型荚膜多糖的制备及生物学特性

目的 提取Ｏ１３９型霍乱弧菌荚膜多糖，并检测其理化特性及免疫原性。方法 采用Ｃａｔａｖｌｏｎ、冷 酚、不同浓度乙醇沉淀、离心等步骤精制Ｏ１３９霍乱弧菌荚膜多糖，用生物学、免疫学等方法分析检定。结果 提取 的霍乱Ｏ１３９型荚膜多糖具有良好的多糖特性、结构特征和免疫原性。结论 为组分疫苗的研制打下基础。

无锡市锡山区首次检出1株非O1和非O139型霍乱弧菌的报告

目的对无锡市锡山区河水中检出的1株可疑霍乱弧菌进行种属鉴定。方法采集外环境标本进行霍乱弧菌分离培养,参照1999年《霍乱防治手册》第5版、2008年《霍乱诊断标准》及相关资料进行检测。结果实验中使用3家单位的血清进行血清凝集反应,结果截然相反。2家国产血清结果为阳性,泰国产血清结果为阴性。经荧光定量PCR基因核酸检测表明该菌株为非O1、非O139型霍乱弧菌。结论提示在今后工作中,对于可疑的霍乱弧菌,不能单纯靠传统的血清学诊断和生化鉴定,需要分子诊断方法,这样可以从分子水平为弧菌科细菌的种属鉴定提供更为直接的证据。

产毒型O139群霍乱弧菌实时荧光双重TaqMan聚合酶链反应检测体系的临床应用前研究

目的：探讨产毒型O139群霍乱弧菌实时荧光双重TaqMan聚合酶链式反应检测体系对临床模拟标本检测的意义,为该检测体系的临床应用提供可靠的技术依据。方法：将O139群霍乱弧菌灭活菌株悬液[1.0×10^10cfu（菌落形成单位）/ml]连续10倍稀释后与健康成人新鲜粪便混匀,制备成5.0×10^1 - 5.0×10^8cfu/g梯度浓度的模拟带菌者粪便标本并提取DNA,用以评价我们自行建立的产毒型O139群霍乱弧菌实时荧光双重TaqMan聚合酶链式反应检测体系对临床模拟标本检测的敏感度、特异性和稳定性。结果：实时荧光双重TaqMan聚合酶链式反应快速检测体系对O139群霍乱弧菌的模拟带菌者粪便标本的检测敏感度为1.0×10^3cfu每反应体系（5.0×10^4cfu/g）,其线性检测范围是1.0×10^3-1.0×10^7cfu每反应体系;在稳定性评价中,对1.0×10^3-1.0×10^7cfu模拟带菌者粪便标本DNA进行3次重复检测的结果显示,ctxA基因扩增反应Ct值的变异系数为1.40%-4.10%,rfb-O139基因扩增反应Ct值的变异系数为0.04%-2.08%;在特异性评价中,3名健康成人新鲜粪便标本的阴性对照均未见特异性扩增曲线。结论：我们建立的产毒型O139群霍乱弧菌实时荧光双重TaqMan聚合酶链式反应检测体系可用于O139群霍乱弧菌临床粪便标本的检测。

产毒型O139群霍乱弧菌特异性基因序列实时荧光双重TaqMan聚合酶链反应快速检测体系的建立

目的:建立针对O139群霍乱弧菌的高敏感、高特异的实时荧光双重TaqMan聚合酶链反应快速检测体系。方法:根据O139群霍乱弧菌主基因组O抗原编码基因rfb-0139和霍乱弧菌肠毒素A亚基的编码基因ctxA的特异性序列设计引物及探针,利用TaqMan标记探针和便携式Smartcycler II荧光实时PCR检测平台探讨该检测体系的检测敏感性,用19种其他肠道致病菌或院内感染中的常见致病菌评价该检测体系的特异性。结果:实时荧光双重TaqMan聚合酶链反应快速检测体系对O139群霍乱弧菌的检测敏感度为1.0×102拷贝每反应体系;对O139群霍乱弧菌基因组DNA的检测敏感度为1.0×100pg每反应体系;该检测体系在检测19种其他肠道致病菌或院内感染中的常见致病菌时均不存在非特异性扩增;整个反应在2 h内完成。结论:本研究建立的实时荧光双重TaqMan聚合酶链反应检测体系可作为O139群霍乱弧菌特异、敏感、快速的检测手段,并可同时检测O139群霍乱弧菌产生霍乱肠毒素的能力。

在中巴边境首次发现○139型霍乱弧菌带菌者的报告

本文报道了1994年6月在新疆红其拉甫口岸从朝圣人员中检出2例新型霍乱O139霍乱弧菌带菌者,对被检菌株进行了培养、鉴定。本次卫检机关在口岸成功进行霍乱的监测,并发现新型霍乱O139带菌者,有效地防止了新型O139霍乱弧菌传入我国。

湘华鲮一种急性细菌性肠炎的病原分离及组织病理研究

为鉴定人工养殖的湘华鲮出现大量由急性肠炎引起死亡的病原,本研究取病鱼腹水和肠道粘液进行病原菌分离纯化,获得菌株XHL-03。经人工感染试验验证,人工感染的湘华鲮出现与自然发病相同的症状,初步确定其为该病致病菌株。经细菌形态学、生理生化特征、16S r DNA序列分析及系统发育树聚类和血清凝集试验检测,结果显示致病菌株XHL-03为非O1/非O139型霍乱弧菌,其对诺氟沙星、头孢曲松、新霉素等10种药物高度敏感。病理切片显示,感染病原的湘华鲮肝胰脏细胞出现坏死,有急性胰腺炎和肠炎综合症状。本研究为湘华鲮霍乱弧菌引起的急性肠炎的临床诊断和防控提供参考依据。