大肠杆菌O157的致病性:1例大肠杆菌O157∶NM和副溶血性弧菌的重叠感染

目的 探讨从杭州一急性腹泻患者粪便中分离的大肠杆菌 Ｏ１５７∶ Ｎ Ｍ 的致病性。方法对一重叠感染大肠杆菌 Ｏ１５７∶ Ｎ Ｍ 和副溶血性弧菌的急性腹泻患者，调查其临床表现及相关流行病学资料， 同时对分离菌株进行生化特性分析、血清学鉴定、毒力试验等， 并采集发病后第４ 、１８ 天血清与分离菌株试管定量凝集试验， 检测其特异性抗菌抗体。结果 菌株２６ － １ 为大肠杆菌 Ｏ１５７∶ Ｎ Ｍ， Ｖｅｒｏ 毒素阴性， 未携６０ Ｍ Ｄａ 质粒， Ｅ Ｈ Ｅ Ｃ 溶血素基因阴性： 菌株２６ － ２ 为副溶血性弧菌， 为强毒株。患者第４ 、１８ 天血清与分离菌株未见凝集阳性反应。结合临床表现和流行病学资料， 考虑诊断该病例为急性副溶血性弧菌肠炎。结论 我国人群和家畜肠道中可能存在一类致病性不明或非致病性的大肠杆菌 Ｏ１５７ 菌株； Ｅ Ｈ Ｅ Ｃ 的鉴定应重视毒力因子的检测， 同时亦不能忽视患者是否有其它肠道病原体的重叠感染。

大肠埃希氏菌O157∶H7/NM标准物质制备

本文用冷冻干燥法制备含鸡肉基质的大肠埃希氏菌O157∶H7/NM标准物质,以细菌存活率为指标,选择存活率最高的保护剂配方。以经钴-60辐照灭菌的鸡肉粉(无抗生素)作为基质,按适当的比例与保护剂配方液混合,添加菌液,于-70℃速冻20 h后冷冻干燥,对样品进行均匀性检测、稳定性追踪以及建立不确定度评估。结果显示,保护剂最优配方为10%海藻糖+25%脱脂牛奶+4%聚乙烯吡咯烷酮+0.8%甘氨酸;基质液比例为基质∶水=1∶7。按基质液:保护剂配方液=1∶3制备样品,均匀性试验:F统计量=1.197<2.201,均匀性良好。当测量检验结果用2次测量值平均值表示结果时,其值分布区间为±80 CFU/mL,且在-20℃的温度下保存18个月未观测到不稳定性。

食品中大肠埃希氏菌O157:H7/NM能力验证结果分析与讨论

为了提升实验室食品中大肠埃希氏菌O157:H7/NM检测能力,本实验室参加了大连中食国实检测技术有限公司组织的大肠埃希氏菌O157:H7/NM检测能力验证活动。根据《食品安全国家标准食品微生物学检验大肠埃希氏菌O157:H7/NM检验》(GB 4789.36—2016),对疑似菌进行鉴定。结果显示,编号143样品中检出大肠埃希氏菌O157:H7/NM,编号349、142样品中均未检出大肠埃希氏菌O157:H7/NM。本实验室顺利完成能力验证,结果为满意。

等温多自配引发扩增技术快速检测学校餐饮中三种食源性致病菌

目的:本文研究了一种适合学校餐饮中快速鉴别三种食源性致病菌的检测方法。方法:基于等温多自配引发扩增技术(isothermal multiple self-matching-initiated amplification,IMSA),选择沙门氏菌的invA基因、大肠埃希氏菌O157:H7/NM的rfbE基因和单核细胞增生李斯特氏菌的prfA基因设计特异性引物,检测菌液灵敏度、特异性、最短增菌时间、最低含菌量检出限等指标;以食品安全国家标准食品微生物学检验(GB/T 4789.4-2016、GB/T 4789.30-2016、GB/T 4789.36-2016)为参考方法,比较两种方法的一致性。结果:该方法对沙门氏菌、大肠埃希氏菌O157:H7/NM和单核细胞增生李斯特氏菌的菌液灵敏度分别为2.14×10^(3)、2.79×10^(3)和3.62×10^(3)CFU/mL;特异性高达100%;人工污染最短的增菌时间分别为6、8和8 h;最低含菌量检出限分别为2.14、2.79和3.62 CFU/25 g;74例食品样本的IMSA法结果与国标法一致性达100%。结论:IMSA技术检测食源性致病菌的灵敏度高、特异性强、结果准确,可在短时间内完成食品中三种致病菌的检测,适合于学校餐饮中致病菌的快速鉴别。