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应用免疫磁珠分离法及荧光定量PCR技术快速检测肠出血性大肠埃希菌O157:H7 被引量:6
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作者 王涛 刘凯 +3 位作者 王艳 綦廷娜 叶长芸 熊衍文 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期291-293,315,共4页
目的建立免疫磁珠分离法(immunomagnetic separation,IMS)联合荧光定量PCR(real-time PCR)技术快速检测肠出血性大肠埃希菌O157∶H7的方法。方法根据肠出血性大肠埃希菌O157∶H7抗原特异性基因rfbEO157设计引物和荧光探针,建立real-time... 目的建立免疫磁珠分离法(immunomagnetic separation,IMS)联合荧光定量PCR(real-time PCR)技术快速检测肠出血性大肠埃希菌O157∶H7的方法。方法根据肠出血性大肠埃希菌O157∶H7抗原特异性基因rfbEO157设计引物和荧光探针,建立real-time PCR检测体系,并检测其特异性及敏感性;用O157免疫磁珠特异性捕获标本菌液中的O157∶H7大肠埃希菌,结合real-time PCR对磁珠捕获菌细胞的DNA进行检测分析。结果 Real-time PCR检测结果显示,O157∶H7大肠埃希菌可产生荧光信号,而其他常见致病菌均未见明显荧光信号;采用IMS-real-time PCR方法检测标本,菌液含菌量为3.3×102CFU/mL时即可被检出,检测全过程需时约4h。结论 IMS-real-time PCR检测方法具有特异性强、敏感度高、快速易操作等特点,该检测方法能提高O157∶H7大肠埃希菌的检出率和准确性,可用于标本的快速诊断、疾病监测和暴发疫情的病原学调查。 展开更多
关键词 免疫磁珠分离法 荧光定量PCR 大肠埃希菌o157∶H7
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应用免疫磁珠法分离大肠杆菌O_(157)H_7 被引量:16
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作者 赵文彬 周克捷 +2 位作者 李家富 李莉 林红玉 《现代预防医学》 CAS 2000年第3期331-332,共2页
目的 :进一步探讨免疫磁珠法 (IMS)分离大肠杆菌 O1 5 7H7(E.O1 5 7H7)的敏感性。方法 :应用 IMS检测该菌的主要贮存宿主动物 (家禽、家畜 ) E.O1 5 7H7感染情况 ,同时用传统分离法作对照。结果 :家禽 (畜 )粪便中 E.O1 5 7H7分离率分... 目的 :进一步探讨免疫磁珠法 (IMS)分离大肠杆菌 O1 5 7H7(E.O1 5 7H7)的敏感性。方法 :应用 IMS检测该菌的主要贮存宿主动物 (家禽、家畜 ) E.O1 5 7H7感染情况 ,同时用传统分离法作对照。结果 :家禽 (畜 )粪便中 E.O1 5 7H7分离率分别为鸡 2 .38% (2 / 84)、牛 9.5 2 % (4 / 42 )、猪 2 .41% (2 / 83) ,鸭、鹅、狗、驴和羊的粪便中未分离到 E.O1 5 7H7;传统法均未从上述家禽 (畜 )粪便中分离到 E.O1 5 7H7。结论 :据本次检测结果 ,表明 IMS分离 O1 5 7能提高检测的灵敏度 (检测水平为 2 cfu/ g,传统法为 2 0 0 cfu/ g) ,并缩短检测时间 1天 ,是开展 E.O1 5 7H7病原学分离 (包括人间和宿主动物的流行病学监测 ) 展开更多
关键词 免疫磁珠 大肠杆菌o157H7 分离
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免疫磁珠富集法对牛源大肠杆菌O157∶H7分离鉴定的影响 被引量:8
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作者 丁浩 苏战强 +6 位作者 夏利宁 王雨朦 王栋 张瑾瑜 张桃 况玲 姚刚 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2017年第4期1189-1194,共6页
为证明免疫磁珠吸附技术对牛源大肠杆菌O157∶H7分离效率的影响,从新疆五家渠市、伊宁县、昌吉市3个牛场的采集18份粪样、162份肛拭子、10份饲料样、17份水样和36份胴体表面棉拭子样本,经EC肉汤增菌后,分别采用免疫磁珠富集后和直接进行... 为证明免疫磁珠吸附技术对牛源大肠杆菌O157∶H7分离效率的影响,从新疆五家渠市、伊宁县、昌吉市3个牛场的采集18份粪样、162份肛拭子、10份饲料样、17份水样和36份胴体表面棉拭子样本,经EC肉汤增菌后,分别采用免疫磁珠富集后和直接进行SMAC和MUG试验进行选择性培养,然后对菌体rfbE基因和鞭毛fliC基因进行PCR检测,最后对疑似大肠杆菌O157∶H7菌用生化试验进行符合性检测。结果2种方法分别从243份样品中分离到8株和4株大肠杆菌O157∶H7,统计学分析该差异不显著。本试验结果表明,在实践中免疫磁珠吸附技术和普通方法相比虽然在统计学上差异不显著,但确实能够增加大肠杆菌O157∶H7的分离数量,这与以前的相关研究结果基本一致。 展开更多
关键词 免疫磁珠 大肠杆菌o157∶H7 分离 鉴定
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免疫磁珠法分离大肠杆菌O_(157):H_7及毒力基因的PCR检测 被引量:6
4
作者 赵璐 苏战强 +6 位作者 周银萍 买占海 张彩云 卢亚宾 周伟健 姚刚 况玲 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2015年第5期77-79,82,I0006,共5页
为了了解新疆不同牛场中大肠杆菌O157:H7的流行情况,对新疆乌鲁木齐、伊犁地区、塔城地区多个牛场采集的粪样及水样样本的检测,样品经EC肉汤增菌、免疫磁珠富集后,用SMAC平板和MUG培养基进行初步筛选,再用rfb E和fli C基因对筛选后的疑... 为了了解新疆不同牛场中大肠杆菌O157:H7的流行情况,对新疆乌鲁木齐、伊犁地区、塔城地区多个牛场采集的粪样及水样样本的检测,样品经EC肉汤增菌、免疫磁珠富集后,用SMAC平板和MUG培养基进行初步筛选,再用rfb E和fli C基因对筛选后的疑似大肠杆菌O157:H7菌株做PCR检测,同时结合生化试验的方法进行符合性检验。结果从新疆3个地区不同牛场的208份样品分离得到5株肠出血性大肠杆菌O157:H7,检出率为2.4%。其中粪样检出5株,检出率为2.4%;水样未检出。生化试验结果表明,5株分离出的大肠杆菌O157:H7菌株与国标规定的O157:H7特性相同。表明,部分被检牛场存在大肠杆菌O157:H7威胁,应该引起重视。 展开更多
关键词 大肠杆菌o157:H7 免疫磁珠 PCR 检出率
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间接酶联免疫吸附技术检测活的非可培养状态的大肠杆菌O157:H7 被引量:17
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作者 姚斐 沙莎 +2 位作者 陈刚 纪伟尚 徐怀恕 《青岛海洋大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2001年第2期211-214,共4页
大肠杆菌 O157:H7在低温贫营养的条件下可进入活的非可培养状态 (Viable butnonculturable state,VBNC) ,用常规的培养法无法将其检出。作者利用间接酶联免疫吸附技术(Indirect Enzyme- L inked Immunosorbent Assay,EL ISA)检测 VBNC... 大肠杆菌 O157:H7在低温贫营养的条件下可进入活的非可培养状态 (Viable butnonculturable state,VBNC) ,用常规的培养法无法将其检出。作者利用间接酶联免疫吸附技术(Indirect Enzyme- L inked Immunosorbent Assay,EL ISA)检测 VBNC的大肠杆菌 O157:H7,发现此方法可以快速有效地将其检出 ,最小检测浓度为 10 5个 / m L。 展开更多
关键词 大肠杆菌o157:H7 活的非可培养状态 间接酶联免疫吸附技术
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免疫PCR技术检测大肠埃希菌O157:H7的实验研究 被引量:1
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作者 王宏志 葛存兴 +3 位作者 赵晶 余敏红 荣静娟 王海河 《齐齐哈尔医学院学报》 2014年第3期327-327,共1页
目的通过对大肠埃希菌O157:H7阳性菌液和对照菌检测,评估免疫PCR技术的灵敏度和特异性。方法将大肠埃希菌O157:H7阳性菌液倍比稀释得到108~101CFU/ml菌悬液,用免疫PCR技术和ELISA进行检测并观察灵敏度。同时检测对照菌液观察免疫PCR... 目的通过对大肠埃希菌O157:H7阳性菌液和对照菌检测,评估免疫PCR技术的灵敏度和特异性。方法将大肠埃希菌O157:H7阳性菌液倍比稀释得到108~101CFU/ml菌悬液,用免疫PCR技术和ELISA进行检测并观察灵敏度。同时检测对照菌液观察免疫PCR技术特异性。结果免疫PCR检测O157:H7菌液最低浓度为10 CFU/ml时,检测灵敏度与ELISA相比较提高了1000倍,对照菌检测均为阴性。结论免疫PCR技术检测具有较高的灵敏度和特异性,可以有效提高大肠埃希菌O157:H7的确诊率,降低漏诊率。 展开更多
关键词 免疫PCR技术 大肠埃希菌 o157 H7
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用于分离大肠杆菌O157∶H7的免疫磁珠的制备与表征 被引量:4
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作者 李梦 韩国成 刘又年 《应用化工》 CAS CSCD 2012年第6期1044-1047,共4页
以Fe2+、Fe3+、羧基化葡聚糖(CMD)为原料,采用共沉淀法,一步合成了CMD-Fe3O4磁性纳米粒子,并对其进行表征。用EDC和NHS将纳米粒子表面的羧基活化,再进一步与标记有荧光基团的anti-E.coli结合,合成了表面结有大肠杆菌O157∶H7抗体的新型... 以Fe2+、Fe3+、羧基化葡聚糖(CMD)为原料,采用共沉淀法,一步合成了CMD-Fe3O4磁性纳米粒子,并对其进行表征。用EDC和NHS将纳米粒子表面的羧基活化,再进一步与标记有荧光基团的anti-E.coli结合,合成了表面结有大肠杆菌O157∶H7抗体的新型免疫磁珠anti-E.coli-CMD-Fe3O4,可以用于分离大肠杆菌O157∶H7。 展开更多
关键词 羧基化葡聚糖 共沉淀法 CMD-Fe3o4磁性纳米粒子 大肠杆菌o157∶H7 免疫磁珠
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一种新型检测大肠杆菌O157∶H7的免疫磁珠-量子点纳米颗粒的制备和应用 被引量:3
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作者 文湘郡 滕鑫 +3 位作者 丁星宇 佘竹欣 李壹 熊晓辉 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2022年第13期48-54,共7页
研究建立了免疫磁珠和荧光量子点标记的抗体检测大肠杆菌O157∶H7的方法。采用溶剂热法制备了Fe_( 3)O_( 4)纳米颗粒,并用SiO_(2)、羧基和大肠杆菌O157∶H7抗体依次包覆制得免疫磁珠。游离的大肠杆菌O157∶H7首先与免疫磁珠结合,然后由... 研究建立了免疫磁珠和荧光量子点标记的抗体检测大肠杆菌O157∶H7的方法。采用溶剂热法制备了Fe_( 3)O_( 4)纳米颗粒,并用SiO_(2)、羧基和大肠杆菌O157∶H7抗体依次包覆制得免疫磁珠。游离的大肠杆菌O157∶H7首先与免疫磁珠结合,然后由量子点标记的抗体与大肠杆菌结合,形成一个三明治结构;随后分析磁分离采集的磁珠的荧光强度(激发/发射波长为370 nm/472 nm)。SiO_(2)壳结构的引入,减少了传统免疫磁珠的非特异性吸附,提高了对目标菌的选择性,同时有效的阻止了三明治结构中量子点因电子转移至Fe_(3)O_(4)而引起的荧光猝灭,保证了分析方法的可行性。动态范围为10~10^(8) CFU/mL,检出限为10 CFU/mL。牛肉、牛奶和蜂蜜样品中大肠杆菌O157∶H7的平均加样回收率分别为95%~104%、90%~94%和90%~110%;相对标准偏差分别为2.1%~3.8%、3.2%~7.8%和5.8%~6.3%。 展开更多
关键词 大肠杆菌o157∶H7 免疫磁珠 量子点 Sio_(2)
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应用斑点免疫层析、免疫磁珠法快速分离大肠杆菌O_(157)∶H_7 被引量:8
9
作者 庞惠勇 张玉玲 +2 位作者 田锦萍 晏梅 张慧 《现代预防医学》 CAS 2002年第3期347-349,共3页
目的 :探讨斑点免疫层析法 (DICA)和免疫磁珠法 (IMS)在分离大肠杆菌 O1 57∶ H7(E.Coli O1 57∶ H7)上的快速性和敏感性。方法 :先用 DICA法对腹泻病人、家禽 (畜 )粪便增菌液进行快速筛检 ,再用 IMS法对所有标本做进一步检测 ,并和直... 目的 :探讨斑点免疫层析法 (DICA)和免疫磁珠法 (IMS)在分离大肠杆菌 O1 57∶ H7(E.Coli O1 57∶ H7)上的快速性和敏感性。方法 :先用 DICA法对腹泻病人、家禽 (畜 )粪便增菌液进行快速筛检 ,再用 IMS法对所有标本做进一步检测 ,并和直接分离法作对照。结果 :DICA法阳性率为 10 .34% (43/ 4 16 ) ,IMS法检出率 1.92 % (8/ 4 16 ) ,DICA法假阳性率为 8.4 1% (35 / 4 16 ) ,无一例 DICA法假阴性 ,而直接法检出率为 0 .2 4 % (1/ 4 16 ) ,IMS法比直接法检出率有显著性提高 (P<0 .0 5 )。结论 :两法结合应用于检测 E.Coli O1 57∶ H7具有快速、省时、灵敏度高等特点 ,是开展 E.Coli O1 57∶ H7病原学检索值得推广应用的方法。 展开更多
关键词 斑点免疫层析法 免疫磁珠 快速分离 大肠杆菌o157:H7
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应用免疫磁珠富集法河北省首次从食品中检出O157∶H7大肠杆菌 被引量:4
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作者 刘波 贾红 +10 位作者 李晓华 罗永松 张德云 史明坤 叶青 王玉 王志刚 徐朝阳 姜潮 曲玉环 王术艺 《疾病监测》 CAS 2001年第6期228-230,共3页
继我市用常规法在牛粪及腹泻病人粪便中检出O15 7∶H7出血性大肠杆菌后 ,今年我们又应用免疫磁珠富集技术 ,在河北省首次从食品中检出肠出血性大肠杆菌O15 7∶H7。从 35 3份样品中分离出 2株O15 7∶H7大肠杆菌 ,检出率为 0 5 7% ,提示... 继我市用常规法在牛粪及腹泻病人粪便中检出O15 7∶H7出血性大肠杆菌后 ,今年我们又应用免疫磁珠富集技术 ,在河北省首次从食品中检出肠出血性大肠杆菌O15 7∶H7。从 35 3份样品中分离出 2株O15 7∶H7大肠杆菌 ,检出率为 0 5 7% ,提示我市甚至我省存在着O15 展开更多
关键词 食品 o157:H7 免疫磁珠
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应用免疫磁珠集菌法首次从漯河市动物粪便中检出O157∶H7大肠杆菌 被引量:5
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作者 刘爱芬 张雪琴 +3 位作者 刘杰伟 刘蕾 王耀勃 赵桂让 《疾病监测》 CAS 2002年第1期15-16,共2页
关键词 o157:H7大肠杆菌 免疫磁珠集菌法 EHEC感染 大肠杆菌 微生物
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免疫磁分离法高效富集牛奶中大肠杆菌O157:H7 被引量:6
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作者 黄震 罗梅霞 +5 位作者 汪泽祥 王素花 刘劲涛 袁美芳 黎丹红 赖卫华 《食品安全质量检测学报》 CAS 2019年第14期4492-4497,共6页
目的建立一种免疫磁分离(immunomagnetic separation,IMS)方法高效富集大肠杆菌O157:H7。方法合成一种核壳型的纳米磁珠(magnetic nanobeads, MNBs),并基于制备的MNBs构建了IMS。通过优化制备免疫MNBs时抗体浓度, IMS过程免疫MNBs的用... 目的建立一种免疫磁分离(immunomagnetic separation,IMS)方法高效富集大肠杆菌O157:H7。方法合成一种核壳型的纳米磁珠(magnetic nanobeads, MNBs),并基于制备的MNBs构建了IMS。通过优化制备免疫MNBs时抗体浓度, IMS过程免疫MNBs的用量和孵育时间,构建了高效的IMS方法。结果构建的IMS方法能够在35 min内完成牛奶中大肠杆菌O157:H7的高效富集,当大肠杆菌O157:H7浓度低于10~5 CFU/m L时,捕获效率高于93.4%,当菌浓度达到10~7CFU/mL,捕获效率仍大于50%。结论该方法简单高效,可被广泛应用于其他食源性致病菌检测的样品前处理。 展开更多
关键词 大肠杆菌o157:H7 纳米磁珠 免疫磁分离 牛奶
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基于抗体-适配体夹心生物传感器检测大肠杆菌O157:H7 被引量:2
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作者 侯炜辰 叶柯 +4 位作者 李洁 张洋子 许文涛 朱龙佼 李相阳 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第12期81-89,共9页
大肠杆菌O157:H7(Escherichia coli O157:H7)是一种重要的与公共卫生相关的食源性病原体。抗体分子是体液免疫应答中最重要的效应分子,具有多种生物学活性,最主要的生物学功能是与相应抗原特异性结合。适配体是体外合成的较短DNA序列,... 大肠杆菌O157:H7(Escherichia coli O157:H7)是一种重要的与公共卫生相关的食源性病原体。抗体分子是体液免疫应答中最重要的效应分子,具有多种生物学活性,最主要的生物学功能是与相应抗原特异性结合。适配体是体外合成的较短DNA序列,可通过识别特定区域和靶标特异性结合。利用抗体和适配体的特异性识别功能及免疫磁珠的捕获作用和磁分离,并通过多克隆抗体和裁剪得到的适配体搭建生物传感器,使用实时荧光定量聚合酶链式反应(real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction,qPCR)可以实现对靶标在(8×10^(3))-(8×10^(6))CFU/mL范围内的定量检测,检测限为800 CFU/mL。 展开更多
关键词 多克隆抗体 适配体 裁剪 免疫磁珠 大肠杆菌o157:H7
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用免疫胶体金快速诊断卡初筛粪便中的O157∶H7大肠杆菌 被引量:13
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作者 杨晋川 景怀琦 +5 位作者 李洪卫 逄波 赵广法 权太淑 范天锐 徐建国 《疾病监测》 CAS 2001年第9期327-329,共3页
我们用O15 7∶H7大肠杆菌免疫胶体金快速诊断卡 ,对腹泻患者粪便标本中的E .coliO15 7∶H7进行初筛 ,然后再用免疫磁珠捕获集菌及病原菌的分离和鉴定。结果发现 ,该诊断卡可检测到每卡 70个菌细胞。诊断卡强阳性的粪便标本 ,91 18%可以... 我们用O15 7∶H7大肠杆菌免疫胶体金快速诊断卡 ,对腹泻患者粪便标本中的E .coliO15 7∶H7进行初筛 ,然后再用免疫磁珠捕获集菌及病原菌的分离和鉴定。结果发现 ,该诊断卡可检测到每卡 70个菌细胞。诊断卡强阳性的粪便标本 ,91 18%可以分离到O15 7∶H7大肠杆菌 (31/34 ) ;诊断卡弱阳性的粪便标本 ,5 47% (7/12 8)可以分离到O15 7∶H7大肠杆菌 ;诊断卡阴性的粪便标本 ,没有分离到病原菌。O15 7∶H7大肠杆菌免疫胶体金快速诊断卡是一种快速、灵敏、简便的技术 ,可用于对疑似病例的早期诊断和对粪便标本进行初筛 ,减少了工作量 ,值得推广。 展开更多
关键词 o157:H7大肠杆菌 免疫胶体金快速诊断卡 免疫磁珠捕获法
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级联信号转导系统结合免疫层析法检测大肠埃希氏菌O157:H7 被引量:4
15
作者 山珊 黄艳梅 +4 位作者 赵雪龙 陈文瑶 刘成伟 龙中儿 刘道峰 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2021年第18期314-320,共7页
首先通过免疫磁技术实现目标菌的有效富集,然后经同时标记了大量抗体与β-内酰胺酶的胶体金纳米探针介导,利用β-内酰胺酶高效水解青霉素实现检测信号转导及放大,再通过免疫层析法对青霉素含量变化的灵敏甄别,最终实现大肠埃希氏菌O157... 首先通过免疫磁技术实现目标菌的有效富集,然后经同时标记了大量抗体与β-内酰胺酶的胶体金纳米探针介导,利用β-内酰胺酶高效水解青霉素实现检测信号转导及放大,再通过免疫层析法对青霉素含量变化的灵敏甄别,最终实现大肠埃希氏菌O157:H7的超灵敏检测。建立的检测方法对大肠埃希氏菌O157:H7的检测灵敏度为2×10^(2) CFU/mL,相比传统的免疫层析法检测灵敏度提高了570倍。实现超灵敏检测食源性致病菌的同时规避了双抗夹心免疫层析法中Hook效应的影响,为免疫层析高灵敏准确检测大分子目标物提供了新的思路。 展开更多
关键词 信号转导 免疫层析技术 超灵敏检测 大肠埃希氏菌o157:H7
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致病性大肠杆菌的流行及免疫磁珠分离技术的应用 被引量:5
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作者 李志培 苗丽 《中国食品工业》 2004年第12期58-59,共2页
致病性大肠杆菌特别是O157:H7已成为世界性的传染病病原,是食品安全和公共卫生的重要监测对象之一。免疫磁珠分离技术是一项新的技术,可以特异性地、有效地分离出相应的O157和其它微生物及生物活性组分,提高检测的准确性和工作效率。
关键词 免疫磁珠分离技术 流行 致病性大肠杆菌 o157:H7 公共卫生 传染病 特异 监测对象 病原 应用
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上海地区家畜、家禽及肉制品大肠杆菌O157∶H7监测 被引量:24
17
作者 顾宝柯 许学斌 +2 位作者 金汇明 胡培玉 席曼芳 《疾病监测》 CAS 2003年第1期5-7,共3页
目的 了解掌握本市家禽、家畜及肉制品大肠杆菌O15 7∶H7污染状况。方法  2 0 0 0年、2 0 0 1年分别在流行季节在设置的监测点与超市采集家禽、家畜粪便、肉类制品 ,应用常规培养法与免疫磁珠法进行监测。结果 两年间本市家禽、家畜... 目的 了解掌握本市家禽、家畜及肉制品大肠杆菌O15 7∶H7污染状况。方法  2 0 0 0年、2 0 0 1年分别在流行季节在设置的监测点与超市采集家禽、家畜粪便、肉类制品 ,应用常规培养法与免疫磁珠法进行监测。结果 两年间本市家禽、家畜及肉类制品O15 7∶H7阳性检出率 3 90 % ,阳性率最高为肉类制品 4 87% ,2 0 0 1年阳性率较 2 0 0 0年明显提高 (P <0 0 1) ,16种抗生素耐药性监测 ,不同来源菌株对 13种抗生素存在不同耐药率。结论 本市家禽、家畜及肉制品存在大肠杆菌O15 7∶H7污染状况 ,其中肉类制品高于家禽、家畜 ;免疫磁珠法阳性检出率高于常规培养法。 展开更多
关键词 上海地区 家畜 家禽 肉制品 大肠杆菌o157:H7 监测 免疫磁珠
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郑州市肠出血性大肠杆菌O157:H7感染监测 被引量:12
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作者 殷毅峥 程春荣 +4 位作者 杨建国 安戈 武恩平 段晶晶 水艳 《现代预防医学》 CAS 北大核心 2007年第21期4175-4177,共3页
[目的]2005年监测郑州市肠出血性大肠杆菌O157:H7感染状况及病原分布特点,为各级卫生行政部门制订新发传染病防治措施,提供基础疫情资料。[方法]监测标本用免疫磁珠集菌方法(IMS)做病原学分离培养、毒力基因检测用多重PCR方法、药敏试验... [目的]2005年监测郑州市肠出血性大肠杆菌O157:H7感染状况及病原分布特点,为各级卫生行政部门制订新发传染病防治措施,提供基础疫情资料。[方法]监测标本用免疫磁珠集菌方法(IMS)做病原学分离培养、毒力基因检测用多重PCR方法、药敏试验用(K-B)常规方法。[结果]腹泻病人标本185份,大肠杆菌O157:H7检出阳性4份。外环境标本588份,检出大肠杆菌O157:H7阳性20份。用多重PCR方法做毒力基因检测,有6份家畜家禽阳性标本中检出O157:H7毒力基因(Stx2、eaeA、HIyA)为阳性。药敏试验24株肠出血性大肠杆菌O157:H7对8种抗菌药物敏感率为95%以上,对新生霉素100%耐药,其余7种对抗菌药物敏感程度各有差异。[结论]郑州市有散在的大肠杆菌O157:H7感染的病人及动物疫点。奶牛和波尔山羊是大肠杆菌O157:H7动物宿主。 展开更多
关键词 肠出血性大肠杆菌o157:H7 监测 免疫磁珠集菌法(IMS) 多重PCR法 药敏试验
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东台市肠出血性大肠埃希菌O157感染监测 被引量:5
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作者 吴银华 阮凌霆 +5 位作者 蒋力 季月 王迎庆 万亚军 吉根娣 开学俊 《中国预防医学杂志》 CAS 2005年第1期30-32,共3页
目的 为掌握肠出血性大肠埃希菌O15 7在东台市家禽、家畜中的带菌,腹泻病人中的感染和自来水厂水源水中的污染情况。方法 2 0 0 0 -2 0 0 2年,分别在流行季节采集家禽、家畜和腹泻病人粪便及自来水厂水源水,应用免疫磁珠浓集、山梨醇... 目的 为掌握肠出血性大肠埃希菌O15 7在东台市家禽、家畜中的带菌,腹泻病人中的感染和自来水厂水源水中的污染情况。方法 2 0 0 0 -2 0 0 2年,分别在流行季节采集家禽、家畜和腹泻病人粪便及自来水厂水源水,应用免疫磁珠浓集、山梨醇麦康凯平板分离、生化和血清学反应进行鉴定。结果 3年间东台市采集的6种动物粪便有4种中检出肠出血性大肠埃希菌O15 7,其阳性率牛为11 .3 2 %、羊为10 . 5 8%、猪为9. 3 5 %、鸡为7 .73 %。腹泻病人的阳性率为1 .5 7%。采集的178份自来水厂水源水、60只苍蝇标本中均未分离出肠出血性大肠埃希菌O15 7。3株自动物粪便分离株具有至少2种混合型毒力基因。75株肠出血性大肠埃希菌O15 7菌株对15种抗生素存在不同的耐药率。结论 东台市家禽、家畜和腹泻病人中存在肠出血性大肠埃希菌O15 7感染,且存在流行的潜在危险。 展开更多
关键词 大肠埃希菌o157 东台市 感染监测 肠出血性大肠埃希菌 自来水厂 o157菌株 o157感染 动物粪便 2002年 血清学反应 水源水 污染情况 流行季节 免疫磁珠 腹泻病人 毒力基因 潜在危险 阳性率 家禽 家畜 采集 人粪便 山梨醇 混合型 分离株 耐药率 抗生素 人中
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广东省食品中O157:H7大肠杆菌分离株的生化特征、毒力因子与耐药性的探讨 被引量:9
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作者 杨冰 王建 +9 位作者 王洪敏 柯碧霞 严纪文 宋曼丹 马聪 朱海明 赖蔚苳 何冬梅 王海燕 邓峰 《中国卫生检验杂志》 CAS 2006年第8期971-972,1002,共3页
目的:了解广东省食品中O157:H7大肠杆菌分离株中生化特征、毒力因子的携带与耐药情况。方法:采用免疫磁珠富集法进行O157:H7大肠杆菌分离,对O157:H7大肠杆菌分离株进行生化、噬菌体、血清学鉴定后,应用PCR技术检测其毒力因子,应用纸片法... 目的:了解广东省食品中O157:H7大肠杆菌分离株中生化特征、毒力因子的携带与耐药情况。方法:采用免疫磁珠富集法进行O157:H7大肠杆菌分离,对O157:H7大肠杆菌分离株进行生化、噬菌体、血清学鉴定后,应用PCR技术检测其毒力因子,应用纸片法(K-B法)进行药敏试验。结果:从277份样品中分离出2株O157:H7大肠杆菌,总检出率为0.72%;对这2株O157:H7大肠杆菌分离株进行PCR毒力因子的测定,其中1株为携带eaeA、H ly和SLT2毒力因子的强毒株,而另1株分离株未检出毒力因子。药敏试验结果显示,这两个O157:H7大肠杆菌分离株对青霉素类、四环素类、磺胺类、喹诺酮类、大环内酯类5大类的部分抗生素有多重耐药性。结论:广东省食品中存在O157:H7大肠杆菌强毒株的污染。O157:H7大肠杆菌多重耐药株的出现,提示应关注我国畜牧养殖业抗生素的使用情况。 展开更多
关键词 免疫磁珠富集法(IMS法) PCR法 o157:H7大肠杆菌 食品
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