3株O3血清型鳗弧菌灭活疫苗的免疫原性和免疫保护效果

鳗弧菌(Vibrio anguillarum)O3血清型菌株是感染鱼类的重要病原菌,本文研究了3株O3血清型鳗弧菌(SMP1、SMP3和SMP4)灭活疫苗的免疫原性和免疫保护。首先在牙鲆(Paralichthys olivaceus)体内对3株鳗弧菌进行复壮;检测复壮后的菌株毒力,检测的3株鳗弧菌对蓝蔓龙(Trichogaser trichopterus)的半数致死量(LD50)分别为105.1 CFU/ml(SMP1)、104.7 CFU/ml(SMP3)和105.4 CFU/ml(SMP4);制备了3株菌的甲醛灭活疫苗,注射免疫牙鲆,免疫后第7天可检测到牙鲆的血清特异性抗体产生,免疫后第28天的血清特异性抗体效价为1︰1280(SMP1)、1︰640(SMP3)和1︰905(SMP4),提供的免疫保护率(Relative percent survival rate,RPS)为94.4%(SMP1)、100%(SMP3)和73.7%(SMP4)。研究表明,3株致病性O3血清型鳗弧菌菌株具有良好的免疫原性,其中SMP3为最适疫苗候选株。本研究为鳗弧菌O3血清型疫苗的开发应用奠定了基础。

O3∶K6血清型副溶血性弧菌三重PCR检测方法的建立

目的建立副溶血性弧菌O3∶K6血清型三重PCR检测方法。方法基于副溶血性弧菌种特异性基因toxR,O3血清群特异性基因vp0209,K6血清型特异性基因vp0230,建立O3∶K6血清型副溶血性弧菌三重PCR检测方法。对该方法的检测特异性和灵敏度进行分析。结果与结论该方法对O3∶K6血清型副溶血性弧菌具有很好的检测特异性,灵敏度可以达到102 CFU/PCR反应体系。

240株O3血清型副溶血性弧菌tdh和trh毒力基因研究

目的掌握不同来源O3血清型副溶血性弧菌毒力基因携带状况,分析毒力基因与传统神奈川现象的相关性,为深入研究副溶血性弧菌致病性提供基础数据。方法用多重聚合酶链式反应(PCR)方法扩增tdh、trh毒力基因。按GB 4789.7—2013《食品安全国家标准食品微生物学检验副溶血性弧菌检验》方法进行神奈川试验。用χ~2检验方法确定tdh、trh基因与神奈川现象的相关性。结果 183株O3∶K6血清型的副溶血性弧菌中,有182株检出tdh基因,1株检出trh基因,检出率分别为99.45%(182/183)和0.55%(1/183),神奈川试验阳性率为100.00%(183/183)。57株O3非K6群血清型副溶血性弧菌tdh基因检出率为3.51%(2/57),未检出trh基因。神奈川试验结果阳性率为10.53%(6/57)。经χ~2检验tdh基因与神奈川现象有相关性(χ~2=1.78,P>0.05),trh基因与神奈川现象无相关性(χ~2=186.01,P<0.05)。结论 O3∶K6血清型的副溶血性弧菌tdh基因携带率极高,且与神奈川现象相关性有统计学意义。神奈川现象可作为副溶血性弧菌tdh基因和致病性的指标。

内蒙古敖汉旗首次发现O∶3血清型小肠结肠炎耶尔森菌

目的了解敖汉旗境内鼠类,家畜家禽携带小肠结肠炎耶尔森菌（以下简称为小肠结肠炎菌）情况,为疾病防治工作提供科学依据。方法在敖汉旗长胜乡随机采集鼠类、家畜家禽粪便等样品,对小肠结肠炎菌进行分离、培养、鉴定并分型,用PCR方法进行毒力因子测定。结果 2011~2012年共检验各类样品381份,检出小肠结肠炎菌7株,2011年检出的7株为生物1A和3型,生物3型的2株菌均为O∶3血清型,均携带ail,ystA,yadA,virF,rfbc毒力基因。结论猪是致病性小肠结肠炎菌重要的携带者,敖汉旗境内的猪体内具有携带O∶3血清型小肠结肠炎菌。

我国东南沿海地区副溶血弧菌O3：K6血清型耐药分析

目的对分离自我国东南沿海地区的77株O3∶K6血清型副溶血弧菌携带毒力基因情况及其耐药状况进行分析。方法对2002-2016年分离自上海市、深圳市、江苏省、浙江省的77株O3∶K6型副溶血弧菌tdh和trh基因进行PCR扩增检测,并用K-B纸片法检测菌株对15种抗生素的药敏情况。结果 77株O3∶K6型副溶血弧菌tdh和trh基因的携带率分别为94.81%和1.30%。受试菌株对氨苄西林、链霉素、卡那霉素、磺胺异恶唑、环丙沙星的敏感率较低,分别为7.79%、18.18%、31.17%、49.35%、54.55%,其中对氨苄西林、磺胺异恶唑和链霉素的耐药率最高,分别为84.42%、36.36%、32.47%;对头孢曲松、头孢西丁、头孢吡肟、庆大霉素、阿奇霉素的敏感率较高,分别为96.10%、87.01%、81.82%、97.40%、93.51%;所有菌株对亚胺培南、复方新诺明、萘啶酸、多西环素、氯霉素均敏感。本研究中共分离到11株多药耐药菌株,全部为致病株,多药耐药率高达14.29%。结论我国东南沿海地区分离的77株O3∶K6型副溶血弧菌tdh携带率较高,trh携带率较低;对氨苄西林、磺胺异恶唑、氨基糖苷类、环丙沙星的敏感性较差,对其他临床常用抗生素比较敏感,同时存在多药耐药现象。

副溶血性弧菌引起食物中毒的同源性研究

目的:探讨深圳市龙岗区由副溶血性弧菌O3:K6型引起食物中毒的分子流行病学研究和同源性分析。方法:收集不同地区、不同时期食物中毒事件的副溶血性弧菌菌株,并从7宗相同血清型O3:K6的溶血性弧菌菌株中,每宗取1株副溶血性弧菌进行生化鉴定、血清学分型、脉冲场凝胶电泳(PFGE)分析。结果:7株副溶血性弧菌,它们的血清型均为O3:K6,脉冲场凝胶电泳(PFGE)分析结果显示,有2株副溶血性弧菌图谱一致,具有高度的同源性;5株副溶血性弧菌为紧密相关。结论:通过PFGE分子分型的方法了解到该血清型O3:K6的副溶血性弧菌菌株之间具有紧密相关和高度的同源性,表明副溶血性弧菌血清型O3:K6是该地区引起腹泻的主要菌型。

上海市某区副溶血性弧菌的实验室预警分析

[目的]对本市某区副溶血性弧菌菌株特征进行实验室预警分析。[方法]收集该区一定时期内,不同监测哨点,不同腹泻事件的副溶血性弧菌的菌株,对所收集的6株菌株进行生化鉴定、血清学分型;对相同的血清型,进行rRNA分析和tdh基因检测。[结果]来源不同的6株副溶血性弧菌,它们的血清型均为O3∶K6;rRNA分析结果显示5株同血清型的副溶血性弧菌具有高度的同源性;所检菌株都能检出tdh基因。[结论]该地区存在副溶血性弧菌血清型O3∶K6的污染源,该血清型是该地区引起腹泻的主要菌型之一。建议对上述3起事件进行深入的流行病学调查,追踪可疑的污染源。

小肠结肠炎耶尔森菌不同pH值下生长模型的研究

目的:了解pH对小肠结肠炎耶尔森菌生长繁殖的影响,推导出该菌在某一温度下关于pH的生长预测模型。方法:用液体稀释法计细菌总量,再按对数法作出同一温度不同pH值下的生长曲线,将得到的不同pH值下的生长速率结合微生物预测模型理论建立生长速率与pH的关系模型。结果:在3个pH值下该菌延滞期的长短依次为:pH 5.5>pH 8.5>pH 7.0;生长速率为:pH 8.5>pH 7.0>pH 5.5;20℃时本菌(O:3血清型)的生长速率关于pH的生长预测模型符合Arrhenn ius关系式,为lnR=-0.076pH2+1.2005pH-5.3306。结论:实验表明该菌最适于微碱条件下生长,对酸性条件的非常敏感度;20℃时本菌(O:3血清型)的最适pH为7.898。

小肠结肠炎耶尔森氏菌不同温度下生长预测模型的初步研究

目的研究小肠结肠炎耶尔森氏菌（以下简称耶氏菌）O：3和O：9血清型在增菌液MTSB中关于温度的生长模型。方法用液体稀释法计细菌总量，并应用此模型来预测耶氏菌O：3和O：9血清型在有效的生长温度下的生长速率，世代时间，迟缓期及不同时间的生长菌数．并比较相同条件下耶氏菌O：3与O：9血清型之间生长速率的差异。结果耶氏菌O：3血清型的最低生长温度为-17．8℃，耶氏菌O：9血清型的最低生长温度为-10．3℃，在增菌液MTSB中的生长模型：耶氏菌O：3血清型为√M=0．0134（T-255．1866），耶氏菌O：9血清型为√M：0．0173（T-262．7457）。结论在4～30℃的温度范围内，它们的生长速率都随着温度的升高而增加，而在4℃到15．7℃之间时，耶氏菌O：3血清型的生长速率大于耶氏菌O：9血清型，在15．7～30℃之间时，则耶氏菌O：9血清型的生长速率大于耶氏菌O：3血清型。