肠致病性大肠杆菌O45ERIC/ler基因的克隆与序列分析

目的 测定肠致病性大肠杆菌O4 5株的ler基因及其上游ERIC序列 ,了解该菌株与其它种类的AEEC的ler基因及其上游ERIC序列有何差异 ,分析其亲缘关系 ,为研制AEEC的疫苗奠定基础。方法 用PCR方法扩增了PEPECO4 5的ler基因及其上游ERIC序列进行了测序 ,将其序列与另外四种AEEC的ler基因及上游序列进行序列分析比较 ,结果与结论 PEPECO4 5的ler基因及其上游序列与兔致病性大肠杆菌RDEC - 1和REPECO10 3的同源性最高 ,达到 97 9% ,而与EPECE2 348/ 6 9和EHECO15 7∶H7EDL933的同源性只有 78 9%。

肠致病性大肠杆菌O45基因缺失疫苗菌株的构建及其免疫原性分析

为得到肠致病性大肠杆菌O45弱毒疫苗候选菌株,以肠致病性大肠杆菌O45为出发菌株,利用自杀性载体pCVD442和同源重组的原理构建了O45的ler基因缺失突变菌株PEPEC O45(△ler),并对该菌株的Vero细胞毒性、小鼠模型的安全性以及乳鼠和乳猪的被动免疫保护作用进行了研究。结果表明,O45(△ler)基因缺失突变菌株丧失了对Vero细胞的毒性作用,并丧失了对实验小鼠的致病性,具有良好的安全性。乳鼠和乳猪被动免疫保护性实验表明,用该菌株分别免疫母鼠和母猪后,乳鼠和乳猪均可通过吸吮母乳可以获得良好的被动免疫保护作用。因此本研究所构建的O45(△ler)基因缺失突变弱毒菌株可作为预防PEPEC O45感染的疫苗候选株,为最终研制出O45的基因工程菌苗奠定基础。

一起大肠埃希菌O45:H2引起食源性疾病的爆发

2001年4月18日玉溪市某幼儿园7名职工中共有5例出现腹泻等症状,根据现场流行病学和卫生学调查以及实验室检验结果确定病因是食用被肠出血性大肠埃希菌O45∶H2污染的鹅肉.

大肠杆菌O26、O45、O121血清型多重PCR检测方法的建立及应用

大肠杆菌O26、O45、O121血清群是STEC中的常见血清群,传统的大肠杆菌血清学检测存在费时、费力而且不同血清型之间经常出现免疫交叉反应,这给大肠杆菌血清学鉴定带来了极大的困扰。本研究根据大肠杆菌O抗原决定簇相关基因之间的差异设计合成了3对引物,能够快速而准确的鉴定这3种血清群,建立的方法具有较高的特异性、灵敏性,其最低检测灵敏度可达到10pg细菌基因组DNA。

一起肠产毒性大肠杆菌O128:H45引起的院内新生儿腹泻暴发

目的探讨一起院内新生儿腹泻暴发的病原及其特征。方法常规方法对可疑腹泻暴发住院新生儿患者粪便、医护人员肛拭子、婴儿奶粉和医院环境标本进行病原分离和鉴定,将分离到的病原菌进行毒力基因检测、药敏试验及PFGE和MLST分子分型分析。结果从12名住院新生儿腹泻患者黄色水样便和1份新生儿ICU病房配奶间的环境标本中分离出13株大肠杆菌O128∶H45和1株大肠杆菌O55,13株大肠杆菌O128∶H45耐热肠毒素基因st均为阳性、具有高度相似性的PFGE带型、MLST的型别均为ST2332型且具有相似的耐药谱。结论首次报道了由肠产毒性大肠杆菌O128∶H45引起的一起院内新生儿腹泻暴发。

河北省首次分离到大肠杆菌0157:H45血清型

2000年6月8日,河北省首次发生由肠出血性大肠杆菌O157:H7导致死亡的病例.为了解其感染来源及病例分布情况,对某县疫区的饮水、市售食品、动物、死者密切接触者及疫村腹泻病人展开了全面的流行病学调查.

(K_(0.45)Na_(0.55))_(0.98)Li_(0.02)Nb_(0.77)Ta_(0.18)Sb_(0.05)O_3-Co_(0.85)Cu_(0.15)Fe_2O_4复合陶瓷的磁电性能研究

以压电体(K0.45Na0.55)0.98Li0.02Nb0.77Ta0.18Sb0.05O3和压磁体Co0.85Cu0.15Fe2O4为原料,通过传统的固相反应法制备了(1-x)[(K0.45Na0.55)0.98Li0.02Nb0.77Ta0.18Sb0.05O3]-xCo0.85Cu0.15Fe2O4多铁性复合陶瓷,并使用X射线衍射仪、扫描电子显微镜、压电测试仪、铁电测试仪和磁电耦合测试仪对物相、显微结构、压电、铁电、磁电耦合性能进行了分析。结果表明,复合陶瓷的相结构保持为(K0.45Na0.55)0.98Li0.02Nb0.77Ta0.18Sb0.05O3和Co0.85Cu0.15Fe2O4两种物相,但两者之间发生了轻微的化学反应。随着Co0.85Cu0.15Fe2O4压磁相含量的增加,复合陶瓷的压电系数从56pC/N减小到21pC/N,剩余极化强度略有降低。在压磁相含量为0.2时可获得4.3mV·cm-1·Oe-1的最佳磁电耦合系数。

BBS掺杂的Ca_(0.3)(Li_(1/2)Sm_(1/2))_(0.7)TiO_3微波介质陶瓷的中温烧结研究

采用传统电子陶瓷制备工艺,以42BaO-45B2O3-13SiO(2BBS)玻璃为烧结助剂,制备了可以中温烧结的Ca0.3(Li1/2Sm1/2)0.7TiO3微波介质陶瓷,对陶瓷的晶相组成、烧结性能及微波介电性能进行了系统研究。结果表明:通过液相烧结,BBS玻璃能有效降低Ca0.3(Li1/2Sm1/2)0.7TiO3陶瓷的烧结温度,由1300℃降低至1000℃。XRD结果显示陶瓷主晶相为斜方钙钛矿,没有发现杂相。随着BBS添加量的增大,陶瓷的介电常数,品质因素以及频率温度系数均呈下降趋势,当BBS的添加量为10wt%时,1000℃下保温5h烧结的陶瓷的致密度、体积密度以及介电常数达到最大值,并具有良好的微波介电性能:εr=62.5,Qf=1019GHz,τf=21.6ppm/℃。

腹泻仔猪大肠埃希菌分离株ST4214的全基因组测序分析

目的 分析腹泻仔猪大肠埃希菌(E.coli)分离株血清型、毒力因子及耐药基因。方法 本课题组前期研究从腹泻仔猪粪便样本中分离到64株E.coli,本研究取其中含有毒力因子最多的1株进行全基因组测序分析。结果 E.coli分离株基因组序列为5.5 Mb,预测蛋白质编码序列数为5 743,与已知致病菌E.coli O145的基因重合率较低,为64.53%。经多位点序列分型分析,确定分离株为E.coli ST4214,血清型为O3∶H45。与病原菌O157∶H7、O145∶H28和O104∶H4的毒力基因比较表明:4株菌共同含有的毒力基因为354个,E.coli ST4214含有64种独特的毒力基因、编码鞭毛蛋白、Ⅳ型分泌蛋白、Ⅱ型分泌蛋白、溶血素、菌毛、肠毒素、荚膜多糖相关蛋白质。耐药基因E.coli分离株含有氨基香豆素抗性基因、磺胺类耐药基因、β-内酰胺抗性基因、多粘菌素耐药基因、肽抗生素抗性基因和抗生素耐药基因外排泵等多重耐药基因。结论 腹泻仔猪E.coli ST4214分离株是一株新菌株,具有较多毒力因子及耐药基因,可能与仔猪腹泻发病相关。