鸭出血性大肠杆菌O46分离株实验病理模型的建立

【目的】为了建立鸭源出血性大肠杆菌(Enterohaemorrhagic E.coli,EHEC)O46分离株的实验病理模型并观察其在雏鸭体内的动态分布及组织病理学和超微病理学变化。【方法】本研究以O46分离株通过口服、肌肉和皮下注射3种途径感染10日龄健康雏鸭,感染剂量均为0.5 mL/只(2×108CFU·mL-1),感染后2、4、6、12、24h剖杀、取样,以后每隔12h剖杀、取样并对剖解变化进行详细观察,在每个安排的时间点平行采集2只雏鸭的心、肝、脾、肺、肾、脑、食道、胸腺、十二指肠、空肠、盲肠、直肠、法氏囊、胰腺和气管等组织制备组织切片和超薄切片,通过H.E染色、醋酸铀、柠檬酸铅染色和免疫组化染色,对感染雏鸭的组织病理学变化及超微病理变化、细菌抗原定位进行观察。【结果】实验病理模型能复制出与自然感染相同的病例,除气管未检测到细菌抗原外,其余的组织均检测到细菌抗原,心、肺、脾、肾和肠道是感染的主要靶器官,抗原主要存在其感染细胞的细胞质中,阳性信号最早出现于心脏。尸体剖解、组织病理学及超微病理学观察表明,雏鸭人工感染鸭源EHEC O46分离株后主要病理学损害为浆膜广泛性纤维素性炎症,心、肝、脾、肺、肾、法氏囊、小肠、胰腺、脑等器官充血、出血、炎性细胞浸润,肾小管上皮细胞、肝细胞、心肌细胞、肠上皮细胞等实质细胞变性、坏死或凋亡,法氏囊淋巴细胞减少。超薄切片电镜观察可在心、肺、脾、肝和小肠中观察到大肠杆菌,其侵害的主要靶细胞包括淋巴细胞、巨噬细胞、肠道上皮细胞、心肌纤维细胞。【结论】鸭源EHEC O46分离株能使雏鸭发病和死亡,实验病理模型能复制出EHEC引起的出血性肠炎和溶血性尿毒症等病理变化,该分离株能在鸭体内进行大面积的侵嗜,心脏、肺脏、脾脏、肾脏和肠道是O46分离株感染的主要靶器官。

免疫组化法检测鸭源大肠杆菌O_(46)分离株在人工感染鸭体内的动态分布

为研究鸭源致病性大肠杆菌(E.coli)O46分离株感染雏鸭后在其体内组织器官中的动态分布,本实验将E.coli O46分离株经口服、肌注和皮下注射3种途经感染雏鸭,于感染后不同时间点采集雏鸭15个不同的组织器官制备组织切片,采用免疫组化染色方法,利用E.coli O46定型血清对样品中细菌抗原进行定位跟踪检测。结果显示:口服、肌注和皮下注射3种途经接种E.coli O46分离株后,15个不同的组织器官中除气管未检测到细菌抗原外,其余的组织器官均检测到细菌抗原。心脏、肺脏、脾脏、肾脏和肠道是感染的主要靶器官,并且抗原主要存在于其感染细胞的细胞质中,阳性信号最早出现于心脏。本研究表明鸭源E.coli O46分离株能够在鸭体内广泛的侵嗜增殖并造成鸭急性发病和死亡。