O^6-烷基鸟嘌呤-DNA烷基转移酶基因多态性与肿瘤易感性的关系

【目的】通过比较表达在中国仓鼠卵巢(CHO)细胞中野生型和突变型O6-烷基鸟嘌呤-DNA烷基转移酶(AGT)对二氯乙基亚硝脲(BCNU)细胞毒性作用的反应差异,探测AGT错译突变体的功能意义。【方法】将野生型及不同突变型AGTcDNA分别转染CHO细胞,选择稳定表达AGT的细胞株,用BCNU作用细胞,以存活细胞簇的数量作为判断细胞毒性标准。【结果】表达AGTLeu84Phe和Leu84Phe/Ile143Val/Lys178Arg突变体的细胞对BCNU的毒性作用抵抗力显著减弱,与此不同的是,其余突变体Ile143Val、Lys178Arg、Ser184Asn以及Ile143Val/Lys178Arg对BCNU毒性作用的抵抗性较野生型AGT无明显差异。【结论】AGTLeu84Phe突变体在修复BCNU造成的DNA损伤过程中酶活性降低。提示AGT基因多态性可能与肿瘤易感性有关。

O^6-甲基鸟嘌呤-DNA-甲基转移酶在结直肠癌中的研究进展

结直肠癌(colorectal cancer,CRC)位居恶性肿瘤的第4位,严重威胁着人类的健康.随着人们生活方式及饮食结构的改变,CRC的发生率呈逐年上升的趋势.CRC的发生机制包括:抑癌基因的失活、癌基因的激活及DNA修复机制的异常过度表达.O6-甲基鸟嘌呤-DNA-甲基转移酶(O6-methylguanine-DNA methyltransferase,MGMT)是一种DNA修复酶,他能通过去除鸟嘌呤O6位烷基基团来防止细胞DNA发生突变,并可以修复损伤的DNA.研究发现,该基因的甲基化与CRC的发生密切相关,近年来已成为研究的新热点.

O^6-甲基鸟嘌呤-DNA-甲基转移酶在子宫颈癌中的表达及临床意义

目的探讨O6-甲基鸟嘌呤-DNA-甲基转移酶(MGMT)在子宫颈癌组织中表达情况及其临床意义。方法采用免疫组织化学染色方法检测子宫颈癌组织中MGMT的表达。结果 60例子宫颈癌组织中MGMT的阳性表达率为93.33%,显著高于14例对照正常宫颈组织中阳性率42.8%,(P<0.05);子宫颈癌患者中,Ⅰ期与Ⅱ期的MGMT阳性率分别为100%、95.83%,显著高于Ⅲ-Ⅳ期的阳性率62.5%(P<0.01)。结论 MGMT的表达水平与宫颈组织癌变发展的进程相关,其在宫颈癌组织的高表达可为宫颈癌的诊断提供重要依据。

O6-甲基鸟嘌呤-DNA-甲基转移酶、细胞周期相关蛋白1、F框/WD-40域蛋白7在脑胶质瘤组织中的表达情况及临床意义

目的探讨O6-甲基鸟嘌呤-DNA-甲基转移酶(MGMT)、细胞周期相关蛋白1(CAPRIN1)、F框/WD-40域蛋白7(FBXW7)在脑胶质瘤组织中的表达情况及临床意义。方法选择78例脑胶质瘤患者和20例因外伤或脑出血行颅内减压治疗的患者,分别作为观察组和对照组,分别收集两组患者的脑胶质瘤组织和正常脑组织。采用免疫组织化学染色法检测两组患者中MGMT、CAPRIN1、FBXW7蛋白的表达情况,比较不同临床特征脑胶质瘤患者脑胶质瘤组织中MGMT、CAPRIN1、FBXW7蛋白的表达情况。结果观察组患者的MGMT和CAPRIN1蛋白阳性表达率分别为52.56%和74.36%,分别明显高于对照组的5.00%和30.00%,差异均有统计学意义(P﹤0.01);观察组患者的FBXW7蛋白阳性表达率为28.21%,明显低于对照组的85.00%,差异有统计学意义(P﹤0.01)。死亡脑胶质瘤患者脑胶质瘤组织中MGMT蛋白的阳性表达率为86.67%,明显高于生存患者的44.44%,差异有统计学意义(P﹤0.01)。病理分级为Ⅲ~Ⅳ级脑胶质瘤患者脑胶质瘤组织中CAPRIN1蛋白的阳性表达率为89.19%,明显高于病理分级为Ⅰ~Ⅱ级患者的60.98%,差异有统计学意义(P﹤0.01)。病理分级为Ⅲ~Ⅳ级脑胶质瘤患者脑胶质瘤组织中FBXW7蛋白的阳性表达率为10.81%,明显低于病理分级为Ⅰ~Ⅱ级患者的43.90%,差异有统计学意义(P﹤0.01)。结论脑胶质瘤组织中MGMT和CAPRIN1蛋白表达上调,而FBXW7蛋白表达下调,其中MGMT蛋白可能与患者预后有关,而CAPRIN1和FBXW7蛋白与病理分级有关。

DNA-烷基转移酶(AGT)抑制剂及其在抗肿瘤耐药作用方面的研究进展

烷化剂类抗癌药物可攻击细胞DNA分子众多部位,产生一系列DNA加合物,影响DNA复制和转录等过程,从而诱导细胞变异或凋亡。O6-烷基鸟嘌呤-DNA烷基转移酶（O6-alkylguanine-DNA alkyltransferase,AGT）是哺乳动物体内普遍存在的一种DNA修复蛋白酶,可使受损DNA得以修复,导致肿瘤细胞对化疗药物产生耐药性,降低肿瘤化疗的效果。就近年来有关DNA烷化损伤、AGT介导的肿瘤细胞的耐药性以及AGT抑制剂的应用研究进展进行综述。

O^(6)-苄基鸟嘌呤增强1,3-二(2-氯乙基)-亚硝基脲对人肝癌细胞及其移植瘤的抗肿瘤作用(英文)

应用噻唑蓝 (MTT)法检测 O6-苄基鸟嘌呤(O6- BG)与 1 ,3-二 (2 -氯乙基 ) -亚硝基脲 (BCNU)合用的细胞毒作用及透射电镜检测凋亡细胞的方法研究了 O6- BG对 O6-烷基鸟嘌呤 - DNA烷基转移酶(O6- AGT )阳性的人肝癌细胞 SMMC- 772 1对BCNU细胞毒作用敏感性的影响及其与 BCNU合用治疗移植瘤的协同效果 .结果显示 :1 .5- 6.0 mg· L-1的 O6- BG预先作用 2 h后 ,SMMC- 772 1细胞对 BCNU的敏感性明显增加 ;0 .75- 6.0 mg· L-1的 O6- BG可完全快速地抑制肿瘤细胞的 AGT活性并持续 1 2 h;ip 90 mg· kg-1的 O6- BG预处理 2 h后给予 2 5mg·kg-1的 BCNU治疗 ,可使动物 sc接种的人肝癌移植瘤生长延迟 38.6d,诱导肿瘤细胞凋亡 ,并且可明显抑制肿瘤组织的转移酶活性 .说明 O6- BG与 BCNU合用于

非小细胞肺癌患者血清O6-甲基鸟嘌呤-DNA-甲基转移酶基因异常甲基化检测及其临床意义

目的探讨非小细胞肺癌（non—small cell lung cancer，NSCLC）患者血清中 O6-甲基鸟嘌呤-DNA-甲基转移酶（ O6-methylguanine-DNA—methyltransferase，MGMT）基因启动子区域甲基化的改变状况及其临床意义。方法基因测序法检测62例NSCLC患者、30例肺部良性疾病患者和16例健康体检者血清中MGMT基因启动子区域甲基化状况，并分析其与临床特征的关系。结果NSCLC患者血清MGMT基因甲基化检出率为27．42％（17／62），而肺部良性疾病患者和健康体检者血清未检出MGMT基因甲基化（Fisher精确概率法，P〈0．01）。MGMT基因甲基化检出率与NSCLC患者年龄、性别、病理类型、分化程度无明显相关，但在晚期患者中检出率较高（P〈0．05）。MGMT基因甲基化患者吸烟指数（年·支）明显高于非甲基化患者（P〈0．01）。结论MGMT基因异常甲基化可能在NSCLC发生、发展中起重要作用，有望成为NSCLC辅助诊断的分子标记。

人脑胶质瘤组织中耐药相关基因蛋白MGMT、Topo-Ⅱ、GST-π、P-gp的表达变化及意义

目的观察人脑胶质瘤组织中耐药相关基因蛋白O6-甲基鸟嘌呤-DNA-甲基转移酶(MGMT)、拓扑异构酶(Topo-Ⅱ)、谷胱甘肽转移酶(GST-π)、P-糖蛋白(P-gp)的表达变化,并探讨其临床意义。方法采用免疫组化法检测330例人脑胶质瘤组织及20例正常脑组织中的MGMT、Topo-Ⅱ、GST-π、P-gp蛋白。结果正常脑组织中MGMT、Topo-Ⅱ、GST-π、P-gp均无表达,人脑胶质瘤组织中MGMT、Topo-Ⅱ、GST-π、P-gp的阳性表达率分别为43.9%、24.3%、49.8%、48.2%;MGMT的表达与胶质瘤病理分级无关(P>0.05),Topo-Ⅱ、GST-π、P-gp的表达与胶质瘤病理分级有关(P均<0.05)。结论人脑胶质瘤组织中不同程度地表达耐药相关基因蛋白MGMT、Topo-Ⅱ、GST-π、P-gp,可据此制订个体化的胶质瘤化疗方案。

脑胶质瘤MGMT和Topo-Ⅱα的表达与肿瘤体外药敏相关性研究

目的探讨人脑胶质瘤中DNA修复酶O6-甲基鸟嘌呤-DNA-甲基转移酶(MGMT)和DAN拓扑异构酶Ⅱα(Topo-Ⅱα)的表达强度以及与三种常用化疗药物体外药物敏感性之间的相关性,为临床实施合理而有效的个体化治疗提供帮助。方法胶质瘤患者55例,术中取新鲜肿瘤标本作病理诊断、免疫组化检测MGMT及Topo-Ⅱα因子表达情况,MTT法检测胶质瘤细胞对尼莫司汀(ACNU)、替尼泊苷(VM-26)、替莫唑胺(TMZ)等常用化疗药物的敏感度,用SPSS17.0统计学软件分析两因子的表达强度和药物敏感性之间的相关性。结果 ACNU、TMZ对细胞的抑制率与MGMT的表达强度呈负相关(r s分别为-0.781、-0.761,P<0.05),而VM-26与MGMT表达强度之间无明显相关(r s=0.048,P>0.05)。VM-26对细胞的抑制率与Topo-Ⅱα的表达强度之间呈现正相关(r s=0.825,P<0.05),而ACNU、TMZ对细胞的抑制率与Topo-Ⅱα的表达强度无明显相关(r s=-0.116,0.015,P>0.05)。结论胶质瘤组织中MGMT和Topo-Ⅱα的表达与体外药物敏感试验可以为临床个体化化疗提供重要参考,避免重复或者无效的用药,提高胶质瘤远期治疗效果。

O6-MG-DNA-甲基转移酶基因表达调控及其与肿瘤耐药性的研究进展

DNA损伤修复在基因突变、肿瘤发生及细胞死亡等过程中起重要作用，烷化类损伤主要由O6-甲基鸟嘌呤-DNA-甲基转移酶（O6-methylguanine-DNA methyltransferase，MGMT）修复。细胞内MGMT活性高低是肿瘤对替莫唑胺（temozolomide，TMZ）等烷化剂类化疗药产生耐药性的原因之一，其启动子甲基化与肿瘤患病风险及预后相关。研究MGMT基因表达调控对DNA损伤修复理论研究及克服肿瘤耐药均有重要意义。MGMT的表达调控机制主要包括启动子甲基化及组蛋白乙酰化、转录水平调控、转录后水平调控。

尼莫司汀和卡莫司汀导致细胞中DNA股间交联的高效液相色谱-电喷雾质谱联用研究

氯乙基亚硝基脲（CENUs）是临床常用的烷化剂类抗癌药物,主要通过导致DNA股间横向交联（dG-dC交联）发挥其抗癌作用。为建立高灵敏度的细胞中交联物的检测方法,评价不同种类CENUs的抗癌活性及耐药性,本研究使用尼莫司汀（ACNU）和卡莫司汀（BCNU）对具有不同O6-烷基鸟嘌呤-DNA-烷基转移酶（AGT）活性的NIH/3T3和L1210两种细胞进行药物处理,利用高效液相色谱-电喷雾串联质谱（HPLC-ESI-MS/MS）联用技术对经不同浓度药物处理后细胞中的dG-dC交联进行定量分析。该方法的检测限（S/N=5）和定量限（S/N=17）分别达到2fmol和8fmol,回收率为92.5%~107.4%,灵敏度和准确性均满足定量分析的要求。结果表明：ACNU导致的dG-dC交联率高于BCNU;经相同浓度的同种药物作用后,L1210细胞中交联率显著高于NIH/3T3细胞。这可为新型CENU类烷化剂的抗癌活性评价提供可靠的实验方法。

脑胶质瘤SHG-44细胞MGMT基因甲基化状态及其与细胞对烷化剂药物耐药性关系的研究

目的探讨人脑胶质瘤SHG-44细胞O(6)-甲基鸟嘌呤DNA甲基转移酶(MGMT)基因启动子甲基化状态与其蛋白表达以及细胞对烷化剂药物耐药性的相关性。方法取处于对数生长期的人脑胶质瘤SHG-44和U251细胞,分别加入5-氮-2’脱氧胞苷(5-Aza-CdR)培养6d后收集细胞,同时以未加5-Aza-CdR的正常培养细胞作为对照。提取细胞基因组DNA,采用甲基化特异性PCR(MSP)检测MGMT基因的甲基化状态,并利用蛋白质印迹方法检测MGMT蛋白的表达。将收集的细胞分为3组,分别加入浓度为125、100、75、50、25、15、10μg/ml的尼莫司汀(ACNU)和50、25、15、10、5、2.5、1μg/ml的替莫唑胺(TMZ)以及等量的完全培养液(阴性对照),采用噻唑蓝(MTT)法分别检测细胞对烷化剂药物的敏感性,以细胞存活50%时所对应的药物浓度(IC50值)作为衡量细胞对药物敏感性的指标,实验重复3次。结果正常培养的SHG-44细胞MGMT基因启动子呈甲基化状态,MGMT蛋白表达缺失,对ACNU和TMZ的IC50值分别为30、11μg/ml,表现为对烷化剂药物敏感;用5-Aza-CdR处理后,SHG-44细胞MGMT基因启动子成功脱甲基化,MGMT蛋白恢复表达,其对ACNU和TMZ的IC50值分别升高了2.5和3.1倍(均P<0.05),对烷化剂药物的敏感性发生逆转。而正常培养和5-Aza-CdR处理的U251细胞MGMT基因启动子均呈未甲基化状态,都能表达MGMT蛋白,并且均表现为对ACNU和TMZ烷化剂药物耐药。结论MGMT基因甲基化状态能稳定地反映细胞诱导MGMT蛋白表达的能力,并有可能成为预测肿瘤组织对烷化剂化疗药物敏感性的分子标记。

河南食管癌高发区AGT Exon3与食管癌高易感性关系分析

目的探讨AGTExon3与食管癌高易感性之间的关系。方法聚合酶链反应(PCR)法,PCR基础上的限制性片段多态(PCR-RFLP)检测法及单链构象多态性分析(PCR-SSCP)检测法检测275例食管癌患者血标本抽提DNA,以正常血标本抽提DNA315例为对照。结果AGT第三外显子(AGTExon3)突变型携带者患ESCC的危险度比野生型携带者升高4.876倍(95%CI,3.248￣7.319)。将AGTExon3各基因型组合考查河南安阳地区人群患ESCC的结合危险度。在ESCC组,AGTExon30R值为0.1166,性别OR值为93.558,年龄为1.0703,具有统计学显著性意义。结论AGTExon3突变型基因型显著增加河南安阳地区人群ESCC的易感性,而DNA损伤修复酶基因缺陷可能是导致食管癌变的重要途径。

食管癌高发区AGT Exon5与食管癌高易感性关系分析

目的 探讨AGT Exon5与食管癌高易感性之间的关系.方法 PCR、PCR-RFLP及PCR-SSCP检测法.结果 AGT Exon5突变型携带者患ESCC的危险度比野生型携带者升高3.289倍(95%CI,0.208～0.444).在ESCC组,AGT Exon5、性别、年龄OR值分别为0.031 0、93.558、1.070 3,差异具有统计学意义.结论 AGT Exon5突变型基因型显著增加河南安阳地区人群ESCC的易感性,而DNA损伤修复酶基因缺陷可能是导致食管癌变的重要途径.

人脑胶质瘤组织中耐药相关基因MGMT、TopoⅡ的表达分析

目的 探究人脑胶质瘤组织中耐药相关基因O^6-甲基鸟嘌呤-DNA-甲基转移酶(MGMT)、DNA拓扑异构酶Ⅱ(TopoⅡ)的表达及意义。方法 采用免疫组化方法检测96例脑胶质瘤组织及30例正常脑组织MGMT及TopoⅡ的表达,比较不同组织基因表达差异,分析脑胶质瘤组织基因表达与临床资料及预后的关系。结果 脑胶质瘤组织中,MGMT及TopoⅡ表达阳性率分别为57.29%及36.45%;正常脑组织MGMT及TopoⅡ基因表达阳性率分别为6.33%及3.33%;差异有统计学意义(P<0.05);TopoⅡ表达阳性率随肿瘤恶性程度增加而增加(P<0.05);入组脑胶质瘤病例中79人获得随访,随访时间为3~32个月,MGMT及TopoⅡ表达阴性患者生存时间均长于表达阳性患者,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 人脑胶质瘤组织中MGMT及TopoⅡ有较高的阳性表达率,其中TopoⅡ表达与脑胶质瘤恶性程度相关,两者表达情况均与患者预后相关。

胃癌MGMT基因表达的临床病理意义

目的检测胃癌组织O6-甲基鸟嘌呤-DNA-甲基转移酶(MGMT)基因的表达,探讨MGMT基因表达与胃癌组织学类型、疗效、预后、骨髓抑制的关系。方法应用加强型原位杂交三相寡核苷酸探针高效标记技术检测76例胃癌组织MGMT的表达,同时应用自动图像分析系统进行定量分析。结果76例胃癌MGMT基因阳性表达率为40.8%(31/76)。治疗后生存5年以上者胃癌组织MGMT阳性表达率为35.3%(4/17),明显低于生存5年以下组,后者MGMT阳性表达率为65.9%(22/41)(P<0.05)。白细胞计数≥3×109/L组MGMT阳性率为54.8%(23/42),明显高于白细胞计数<3×109/L组[23.5%(8/34)](P<0.01)。早期胃癌与进展期胃癌间MGMT表达差异无显著性意义(P>0.05)。不同组织学类型及淋巴结转移状况组间MGMT基因表达差异无显著性意义(P>0.05)。结论胃癌MGMT基因阳性表达水平与患者生存时间、骨髓抑制有关,提示检测胃癌组织MGMT基因表达水平对抗癌治疗、提高骨髓耐受性和预测预后有重要意义。

非小细胞肺癌血清MGMT、RASSF2、RUNX3及RASSF1A基因启动子CpG岛甲基化的联合检测及意义

目的探讨非小细胞肺癌患者血清中人类O6-甲基鸟嘌呤-DNA-甲基转移酶(MGMT)、RASSF2、人类Runt相关转录因子3、RAS相关区域家族1A基因启动子区域甲基化状况及其临床意义。方法基因测序法检测62例NSCLC患者(肺癌组)和30例肺部良性疾病患者和16例健康体检者(对照组)血清中MGMT、RASSF2、RUNX3、RASSF1A基因启动子区域甲基化状况,并分析目标基因启动子区域甲基化状况与临床特征的关系。结果肺癌组MGMT基因甲基化频率为27.42%(17/62),而对照组为0(0/46)(x2=14.97,P<0.01);MGMT基因甲基化状态与年龄、性别、病理类型和分化状况无明显相关(P>0.05)。甲基化组吸烟指数(620.78±135.34)高于非甲基化组(498.96±150.87)(t=2.91,P<0.05)。MGMT基因甲基化多见于晚期患者,Ⅰ～Ⅱ期甲基化率为0(0/11)而Ⅲ～Ⅳ期为33.33%(17/51)(Fisher精确概率法,P<0.05)。肺癌组RASSF2基因甲基化频率为38.71%(24/62),而对照组为0(0/46)(x2=22.89,P<0.01);NSCLC患者血清RASSF2基因甲基化检出率与年龄、性别、病理类型、临床分期、分化程度无明显相关(P>0.05),不吸烟者RASSF2甲基化率高于吸烟者(61.90%vs26.83%,x2=7.20,P<0.05)。结论 MGMT、RASSF2、RUNX3、RASSF1A等基因异常甲基化在NSCLC患者外周血中有较高的发生率。MGMT、RASSF2、RUNX3、RASSF1A等基因异常甲基化状态可能和患者临床资料有一定关系。MGMT、RASSF2、RUNX3、RASSF1A等基因异常甲基化可能在NSCLC发生、发展中起重要作用。MGMT、RASSF2、RUNX3、RASSF1A等基因异常甲基化状态有望成为NSCLC辅助诊断和预后判断的分子标记。

沙棘多糖对脑胶质瘤大鼠的抑瘤作用及对HMGB1、MGMT及TLR4表达的影响

目的:探讨沙棘多糖(HRP)对脑胶质瘤大鼠的抑瘤作用及对高迁移率族蛋白1(HMGB1)、O6-甲基鸟嘌呤-DNA-甲基转移酶(MGMT)和Toll样受体4(TLR4)表达的影响。方法:选取60只SD大鼠,脑部接种C6脑胶质瘤细胞,建立脑胶质瘤模型。造模成功后随机分为模型组(15只)、HRP低剂量组(14只)、HRP高剂量组(14只)、替莫唑胺组(14只)。接种5 d后,HRP低剂量组、HRP高剂量组分别灌胃沙棘多糖100 mg/kg、200 mg/kg,替莫唑胺组灌胃替莫唑胺20 mg/kg,模型组灌胃等量生理盐水,每日1次,连续10 d。磁共振成像(MRI)检查并记录肿瘤大小,测量肿瘤体积,计算抑瘤率;苏木精-伊红(HE)染色观察脑胶质瘤形态学变化情况;流式细胞仪检测肿瘤组织细胞凋亡和细胞周期;实时定量聚合酶链式反应(PCR)检测肿瘤组织中HMGB1、MGMT和TLR4 mRNA水平;蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测肿瘤组织HMGB1、MGMT和TLR4蛋白表达。结果:与模型组比较,HRP低剂量组、HRP高剂量组、替莫唑胺组肿瘤体积减小,Sub-G1期、G0/G1期细胞增加,S期、G2/M期细胞减少,凋亡率升高,HMGB1、MGMT和TLR4 mRNA及蛋白相对表达量降低,差异均有统计学意义(P<0.05);与HRP低剂量组比较,HRP高剂量组、替莫唑胺组肿瘤体积减小,抑瘤率升高,Sub-G1期、G0/G1期细胞增加,S期、G2/M期细胞减少,凋亡率升高,HMGB1、MGMT和TLR4 mRNA及蛋白相对表达量降低,差异均有统计学意义(P<0.05);与HRP高剂量组比较,替莫唑胺组抑瘤率降低,Sub-G1期、G0/G1期细胞减少,S期、G2/M期细胞增加,凋亡率降低,HMGB1、MGMT和TLR4 mRNA及蛋白相对表达量升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。HE染色显示,模型组脑胶质瘤内肿瘤细胞生长活跃,数量丰富,排列密集,核大深染,肿瘤细胞异型性明显,核浆比例高,核分裂现象多见,呈浸润性生长,无明显细胞萎缩坏死现象;HRP低剂量组、HRP高剂量组和替莫唑胺组细胞数量较模型组减少,细胞生长密度降低,细胞体积减小,出现部分坏死。结论:HRP对脑胶质瘤大鼠具有抑瘤作用,可能与抑制HMGB1、MGMT及TLR4的mRNA转录与蛋白表达有关。

胶质瘤患者外周血 DNA 修复基因甲基化与蛋白表达的相关性

目的：探讨胶质瘤患者O6-甲基鸟嘌呤-DNA-甲基转移酶（ O6-Methylguanine -DNA methyltransferase，MGMT）及人类错配修复基因 MSH2（Human mutS homolog2，hMSH2）蛋白表达与外周血相应基因启动子甲基化的相关性。方法分别采用免疫组化法及甲基化特异性PCR （ MSP ）检测275例胶质瘤患者肿瘤组织MGMT、hMSH2蛋白的表达及外周血中这两个基因启动子甲基化情况。结果脑胶质瘤患者肿瘤组织MGMT和hMSH2蛋白阴性表达率分别为47．2％和62．5％；基因启动子区甲基化阳性率分别为41．8％和22．4％。统计学分析显示外周血MGMT基因启动子甲基化与肿瘤组织蛋白阴性表达相关（P＜0．05）。 hMSH2基因启动子甲基化与肿瘤组织hMSH2蛋白表达不具有相关性（P＞0．05）。结论 MGMT基因甲基化是脑胶质瘤发生过程中常见的分子事件，可能与胶质瘤的发生有关；而hMSH2基因启动子甲基化可能并不是胶质瘤hMSH2蛋白失活的主要原因，可能存在其他重要因素影响其表达。

低氧激活偶氮苯类AGT抑制剂的合成及还原性研究

O^6-烷基鸟嘌呤-DNA烷基转移酶(AGT)是一种重要的DNA修复酶,AGT在保护正常细胞DNA不受烷化剂损伤的同时,也能够修复抗癌烷化剂对肿瘤细胞DNA的损伤,进而导致抗肿瘤药物的耐药性。设计合成了一类具有肿瘤低氧靶向性的AGT抑制剂,合成化合物能够特异性地在肿瘤低氧环境中被还原,释放AGT抑制剂——O^6-3-氨基苄基鸟嘌呤(ABG);而在常氧条件下不能被激活,不能发挥AGT抑制作用。因此,合成化合物可与氯乙基亚硝基脲等烷化剂联合用药,通过靶向性地抑制肿瘤低氧区域中AGT的活性,提高肿瘤细胞对抗癌烷化剂的敏感性。设计合成了4种以偶氮甲苯衍生物为低氧激活基团的O^6-烷基鸟嘌呤衍生物。经过体外实验模拟实体瘤中的低氧环境,确证了4种化合物均能够选择性地在低氧条件下被还原为AGT抑制剂——ABG;4种目标化合物的还原活性为:(E)-6-((3-((4-(二丙基氨基)苯基)二氮烯基)苄基)氧基)-9H-嘌呤-2-胺>(E)-6-((3-((4-(乙基氨基)苯基)二氮烯基)苄基)氧基)-9H-嘌呤-2-胺>(E)-6-((3-((4-(二乙基氨基)苯基)二氮烯基)苄基)氧基)-9H-嘌呤-2-胺>(E)-6-((3-((4-(甲基氨基)苯基)二氮烯基)苄基)氧基)-9H-嘌呤-2-胺,为开发新型靶向性抗肿瘤药物以及设计高效低毒的联合用药策略提供了新的思路。