非小细胞肺癌患者组织MutS同种组织蛋白2、O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶表达分析

目的探讨非小细胞肺癌(NSCLC)患者癌组织MutS同种组织蛋白2(MSH2)、O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶(MGMT)表达情况及与临床病理参数、预后的关系。方法2021年7月至2022年7月我院收治的96例NSCLC患者,取其手术切除的NSCLC组织标本(NSCLC组)及距癌边缘3 cm处的癌旁正常组织(对照组)。检测两组MSH2和MGMT的表达水平,分析MSH2和MGMT表达水平与患者临床病理参数及预后的关系。结果与对照组比较,NSCLC组MSH2和MGMT阳性率更低(P<0.05);MSH2阳性与患者分化程度有关(P<0.05);MGMT阳性与患者吸烟史和分化程度有关(P<0.05);与MSH2和MGMT阴性患者比较,阳性患者1年生存率均更高(P<0.05)。结论MSH2和MGMT均在NSCLC组织中存在较低表达,其表达水平与临床病理参数、预后密切相关。

喉癌组织中DNA修复基因O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶启动子区过甲基化研究

目的 O6 甲基鸟嘌呤 DNA甲基转移酶 (O6 methylguanineDNAmethyltransferase ,MGMT)在烷化剂所致DNA损伤的修复中起重要作用 ,启动子区过甲基化而导致MGMT基因的转录失活。本文探索了喉癌中MGMT基因启动子区过甲基化状态及其mRNA表达情况。方法 采用甲基化特异性聚合酶链反应及半定量逆转录聚合酶链反应 (reversetranscriptionpolymerasechainreaction ,RT PCR)法分析喉癌、癌旁和正常喉部组织中MGMT基因启动子区过甲基化状态及其mRNA表达情况。结果 4 6例喉癌组织中有 16例 (34 8% )MGMT基因启动子过甲基化 ,相应的癌旁及正常组织中均无甲基化。MGMT基因甲基化在不同的病理分级 (χ2 =3 130 ,P =0 0 77)和临床TNM分期 (χ2 =3 95 7,P =0 138)中差异无显著性。所有甲基化的癌组织中均无MGMTmRNA表达 ,而所有非甲基化的癌组织、相应癌旁组织和 5例正常组织中均有MGMTmRNA表达。且非甲基化的癌组织中MGMTmRNA表达较癌旁组织 (t=30 5 4 0 ,P <0 0 1)和正常组织 (t=31 882 ,P <0 0 1)强 ,而癌旁和正常组织之间差异无显著性(t=0 4 19,P =0 6 77)。

顺铂联合替莫唑胺治疗O^6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶启动子甲基化胶质瘤的近期疗效观察

目的采用顺铂联合替莫唑胺方案与单用替莫唑胺方案对O^6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶(MGMT)启动子甲基化胶质瘤术后辅助化疗,比较两种化疗方案的近期疗效及不良反应的差异。方法选择2016年6月至2016年12月在安徽医科大学第一附属医院神经外科就诊,术后组织病理证实为胶质瘤(WHOⅡⅣ级)且分子病理示MGMT启动子甲基化阳性的患者18例为处理组;选择同期手术且符合纳入标准的患者16例为对照组,所有处理组和对照组患者都采取同步放化疗加6个周期序贯化疗。结果处理组与对照组患者的客观应答率分别为66.66%和31.25%,差异有统计学意义(P=0.042);癫痫发生率分别为22.22%和12.50%,差异无统计学意义(P=0.660);且未发生严重不良反应。结论 MGMT启动子甲基化胶质瘤术后采用同步放化疗+顺铂联合替莫唑胺化疗疗效优于同步放化疗+替莫唑胺单药化疗,两组患者癫痫发生率差异无统计学意义,且未发生严重不良反应。

RNA甲基化识别蛋白YTH N6-甲基腺苷RNA结合蛋白2预测O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶甲基化的脑胶质瘤的化学治疗敏感性

目的研究RNA N6-腺苷酸甲基化(N6-methyladenosine,m6A)识别蛋白YTH N6-甲基腺苷RNA结合蛋白2(YTHDF2)与O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶(MGMT)甲基化胶质瘤化学治疗(简称化疗)抵抗的关联,并探索其潜在机制。方法共纳入中国脑胶质瘤基因图谱计划(CGGA)数据库中的325例胶质瘤患者,收集其一般及临床信息(包括患者的组织学病理和分子病理信息、总生存期、术后辅助性治疗信息和包含YTHDF2在内的基因表达谱信息)。利用Kaplan-Meier生存曲线和Logrank检验评价YTHDF2表达水平与替莫唑胺(TMZ)治疗敏感性及生存预后的关系。通过慢病毒感染体外构建YTHDF2稳定敲低的胶质瘤细胞模型,利用细胞活性检测试剂盒8(CCK-8试剂盒)检测不同YTHDF2表达水平细胞在TMZ处理后的存活率。通过基因集合富集分析(GSEA)和基因本体(GO)功能注释,分析YTHDF2表达升高参与TMZ治疗抵抗的潜在机制。结果临床数据库队列分析发现,m6A识别蛋白YTHDF2表达水平高的胶质母细胞瘤化疗治疗后总生存期显著短于YTHDF2表达水平低者(P<0.01)。经800、1500、2000μmol/L的TMZ处理48 h后,与对照shRNA比较,YTHDF2 shRNA1(800μmol/L的TMZ除外)和YTHDF2 shRNA2的细胞相对存活比例均明显降低,差异均具有统计学意义(均P<0.01)。生存分析结果表明,在MGMT甲基化组中,YTHDF2低表达水平患者的总体生存率明显高于YTHDF2高表达水平患者(P<0.05);在MGMT非甲基化组中,YTHDF2低高表达水平患者的总体生存率差异无统计学意义(P>0.05)。京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路注释结果显示,表达升高的基因主要富集在与细胞因子介导的细胞间相互作用、细胞周期以及Janus激酶-信号转导和转录激活因子信号通路,而表达降低的基因主要富集在正常神经活动相关的信号通路。GSEA分析结果显示,YTHDF2高表达的胶质母细胞瘤基因富集与上皮间质转化、细胞分裂活动和核因子κB介导的肿瘤坏死因子α等特征密切相关。GO功能注释结果显示,在YTHDF2高表达组中,高表达的基因功能主要聚集在细胞周期和细胞因子相关的生物学过程中。结论RNA甲基化识别蛋白YTHDF2表达可用作预测和评估MGMT甲基化的胶质瘤化疗敏感性的分子指标。

膀胱癌O^6-甲基鸟嘌呤-DNA转移酶基因启动子甲基化及其临床意义

目的研究膀胱癌O^6-甲基鸟嘌呤-DNA转移酶(MGMT)基因启动子甲基化情况,探讨其与临床病理特征间的关系及临床意义。方法选取2010年1月～2012年1月于河北工程大学附属医院就诊并行手术切除治疗的膀胱癌患者93例,选取同期就诊且经膀胱镜检查证实无膀胱肿瘤的47例患者作为对照。应用甲基化特异聚合酶链式反应(PCR)检测膀胱癌组织和正常膀胱黏膜组织中MGMT基因甲基化状况。统计分析MGMT甲基化与临床病理特点关系,Kaplan-Meier分析MGMT甲基化与患者预后间的关系。结果膀胱癌组织中MGMT相对甲基化程度明显高于正常膀胱组织,差异有统计学意义(P <0.01)。MGMT甲基化与分期、分级相关(均P <0.01),与年龄、性别、肿瘤大小、数目、形态及复发频率无关(均P> 0.05)。Kaplan-Meier生存分析发现甲基化组患者5年总体生存率明显低于非甲基化组(均P> 0.05)。结论膀胱癌组织中MGMT基因甲基化水平明显增高,MGMT甲基化与肿瘤分期、分级及不良预后有关,可作为判断膀胱癌病情判断及预后的分子生物学标志,值得临床关注。

O^6-甲基鸟嘌呤-DNA-甲基转移酶与肿瘤预见性化疗新策略

克服肿瘤细胞的耐药性是化疗需要解决的重大课题.本项目通过分析20株中国人肿瘤细胞中O6-甲基鸟嘌呤-DNA-甲基转移酶(简写MGMT)的活性与对烷化剂亚硝脲耐药性的关系的实验;通过使用亚硝脲药物治疗移植高和低MGMT肿瘤细胞的荷瘤裸鼠实验;通过向对烷化剂亚硝脲敏感、耐药的细胞分别转导MGMT cDNA以及MGMT反义RNA的实验;证明肿瘤细胞中的MGMT水平决定了细胞对烷化剂、亚硝脲类药物的耐药性,MGMT高的肿瘤细胞耐药,MGMT低的细胞敏感.通过细胞和裸鼠实验证明链脲菌素(Streptozotocin,简写STZ)或O6-苄基鸟嘌呤(简写O6-BG)可以降低细胞内的MGMT活性,克服细胞对烷化剂亚硝脲的耐药性.在研究工作的基础上,我们提出了肿瘤预见性个体化化疗的新策略,即对MGMT低的肿瘤直接使用烷化剂亚硝脲化疗,对MGMT高的肿瘤首先使用链脲菌素降低MGMT酶活性,然后使用烷化剂亚硝脲化疗.

SPR生化分析仪对6-氧甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶的检测

6-氧甲基鸟嘌吟-DNA甲基转移酶(简称MGMT)是一种重要的DNA损伤修复酶,组织中MGMT活性水平的检测可以为肿瘤的早期预防和治疗中化疗方案的确定提供依据。我们利用基于表面等离子体谐振(SPR)生物传感器原理研制成的SPR-2000型生化分析仪对MGMT的基因片段进行了检测,然后采用配套的软件系统对实验数据进行处理,获得检测曲线;再对检测曲线进行温度补偿修正后便获得了杂交反应曲线,SPP-2000型生化分析仪可以检测1.18×10^(-10)mol/L浓度的MGMT核酸样品,为进一步进行临床检测的研究奠定了基础。

潮汕地区食管癌患者O^6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶基因多态性的分析

背景与目的初步研究中国食管癌高发区之一潮汕地区食管癌患者和正常人群O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶(MGMT)基因编码84、143及160位密码子的单核苷酸多态性(Single nucleotide polymorphism,SNP)。材料与方法应用双色荧光杂交微阵列技术分别检测潮汕地区100例食管鳞状细胞癌患者及65例健康对照外周血MGMT基因84位密码子(C2740214T)单核苷酸多态性;用同样的方法检测76例食管鳞状细胞癌患者和50例健康对照MGMT基因143位密码子(A2798995G)、160位密码子(G2799046A)单核苷酸多态性。结果基因型分布符合Hardy-Weinberg定律。统计分析显示食管鳞状细胞癌组与对照组84位密码子2740214C和2740214T等位基因频率差异无统计学意义(P=0.402),2740214CT基因型在病例组和对照组中所占的比例分别为16%和12.3%,2740214TT基因型在病例组中所占的比例是2%。食管鳞状细胞癌组变异基因型拥有者(CT+TT)高于对照组,但差异无统计学意义(P=0.327),2740214TT基因型仅见于个别肿瘤患者,而在正常对照中未发现。143位密码子A2798995G位点仅在对照组中发现一例杂合子,其余均为野生型纯合子,病例组与对照组基因型和等位基因频率差异均无统计学意义。160位密码子G2799046A位点检测在所有的病人和对照中均为野生型纯合子。结论潮汕地区食管鳞状细胞癌患者和正常人群中存在MGMT基因多态性,84位密码子C2740214T位点的突变型纯合子仅见于肿瘤患者,可能与食管鳞状细胞癌有关。

死亡相关蛋白激酶1、KLF4、6-氧-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶甲基化状态检测及与宫颈癌人乳头瘤病毒16感染的关系

目的检测宫颈癌组织死亡相关蛋白激酶1(DAPK1)、KLF4、6-氧-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶(MGMT)启动子区域甲基化状态,初步探讨其甲基化状态与宫颈癌人乳头瘤病毒16(HPV16)感染的关系。方法选取宫颈癌患者103例为宫颈癌组,另选取同期年龄相匹配的慢性子宫颈炎患者110例为对照组。检测2组宫颈脱落组织DAPK1、KLF4、MGMT基因甲基化状态。通过人乳头瘤病毒检测HPV16感染情况,分析宫颈癌组织DAPK1、KLF4、MGMT基因甲基化与HPV16感染相关性。结果与对照组相比,宫颈癌组患者HPV16感染阳性率升高,差异有统计学意义(P<0.05);与对照组相比,宫颈癌组DAPK1、KLF4、MGMT基因异常甲基化率升高,差异有统计学意义(P<0.05)。分化程度低、TNM分期Ⅲ~Ⅳ期、有淋巴结转移及有远处转移患者宫颈癌组织DAPK1、KLF4、MGMT甲基化率高于分化程度高、中及TNM分期Ⅰ~Ⅱ、无淋巴结转移、无远处转移患者,差异有统计学意义(P<0.05)。与HPV16感染阴性相比,HPV16感染阳性患者中APK1、KLF4、MGMT甲基化比例升高,差异有统计学意义(P<0.05)。HPV16感染情况与APK1、KLF4、MGMT甲基化相关(r=0.454,0.497,0.307,P<0.05)。结论HPV16感染可能与APK1、KLF4、MGMT甲基化有关,HPV16感染可能通过影响APK1、RAR-β、MGMT基因甲基化促进宫颈癌的发展。

O^6-甲基鸟嘌呤-DNA-甲基转移酶基因表达与胃癌发生的关系

目的研究人胃癌组织O6-甲基鸟嘌呤-DNA-甲基转移酶(MGMT)基因的表达特点及其与胃癌发生的关系。方法应用加强型原位杂交方法及寡核苷酸探针高效标记技术对76例胃癌组织、73例癌旁组织、20例正常胃组织进行MGMT基因标记检测,同时应用自动图像分析系统进行定量分析。结果胃癌组织MGMT基因阳性表达率为40.8%(31/76),低于正常胃组织的60.0%(12/20),MGMT表达强阳性率为32.3%(10/31),也明显低于正常组织的83.3%(10/12),差异均有显著性意义(P<0.01或P<0.05);癌旁组织MGMT基因阳性表达率为46.6%(34/73),MG-MT表达强阳性率为41.1%(14/34),与胃癌组织差异无显著性意义。定量分析示,胃癌组织MGMT阳性表达的积分吸光度、阳性单位值明显低于正常组织(P<0.05)。胃癌组织与癌旁组织、早期胃癌与进展期胃癌组织、癌旁不同程度不典型增生之间MGMT表达无明显差异。结论人体胃组织存在高度表达的MGMT基因,胃癌发生与MGMT基因表达水平降低有关,MGMT基因异常表达是胃癌形态学改变出现之前的早期行为。

O^6-甲基鸟嘌呤-DNA-甲基转移酶在结直肠癌中的研究进展

结直肠癌(colorectal cancer,CRC)位居恶性肿瘤的第4位,严重威胁着人类的健康.随着人们生活方式及饮食结构的改变,CRC的发生率呈逐年上升的趋势.CRC的发生机制包括:抑癌基因的失活、癌基因的激活及DNA修复机制的异常过度表达.O6-甲基鸟嘌呤-DNA-甲基转移酶(O6-methylguanine-DNA methyltransferase,MGMT)是一种DNA修复酶,他能通过去除鸟嘌呤O6位烷基基团来防止细胞DNA发生突变,并可以修复损伤的DNA.研究发现,该基因的甲基化与CRC的发生密切相关,近年来已成为研究的新热点.

O^6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶在大肠癌中的表达及意义

目的:检测大肠癌组织中O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶(MGMT)的表达情况及其在肿瘤发生发展中的作用和临床意义。方法:采用SABC免疫组化法检测79例大肠癌标本中MGMT的表达情况。结果:大肠癌中MGMT阳性率为53.16%(42/79),其阳性表达与性别、癌细胞浸润深度无关(P>0.05),与患者年龄、淋巴结转移情况有关(P<0.05)。结论:检测MGMT的表达情况对于大肠癌恶性程度的判断及临床化疗方案的制定具有指导作用。

O^6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶在脑胶质瘤的表达及其临床意义

目的探讨O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶(MGMT)在脑胶质瘤细胞中的表达及其与患者生存时间的关系,以判断患者的预后,并指导胶质瘤术后化学治疗药物的合理选择。方法选取手术切除的59例脑胶质瘤标本,经10%甲醛固定,常规脱水,石蜡包埋;每例标本以5μm厚度连续切片,作HE染色确定病理组织类型;对患者的生存期进行调查;用免疫组化EnVision法检测脑胶质瘤细胞中MGMT的表达情况;免疫反应染色结果按照Krajewska法进行半定量分析;所有统计分析用SPSS17.0统计软件进行,采用卡方检验以及将MGMT表达与患者生存期绘制成Kaplan-Meier生存曲线,并进行log-rank检验和分析。结果 MGMT在脑胶质瘤的表达存在异质性;MGMT在不同病理级别的脑胶质瘤细胞中表达阳性率不同,差异无统计学意义(P>0.05);MGMT表达阳性患者生存时间低于表达阴性患者,差异有统计学意义(P<0.05)。结论MGMT在脑胶质瘤的表达与肿瘤病理级别无关,MGMT的表达可作为判断预后的指标。

O^6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶在食管癌患者的表达及临床意义

目的探讨DNA修复蛋白O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶(MGMT)在老年食管癌患者的表达及临床意义。方法采用免疫组织化学方法检测57例食管癌标本和20例正常食管组织中MGMT的表达,并分析其与临床病理特征之间的关系。结果MGMT在食管癌表达的阳性率(49.1%)明显低于正常组织(85.0%,P<0.01)。侵及外膜层、有淋巴结转移、Ⅲ+Ⅳ期的食管癌患者MGMT阳性率明显低于未侵及外膜层、无淋巴结转移、Ⅰ+Ⅱ期患者(P<0.05)。MGMT在食管癌表达的阳性率在年龄、性别、分化程度、肿瘤部位组间无明显差异(P>0.05)。结论MGMT在食管癌的表达与浸润深度、淋巴结转移和临床分期有关,可作为判断食管癌预后的指标。

O^6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶与肿瘤

DNA修复酶O6 -甲基鸟嘌呤 -DNA甲基转移酶 (MGMT)是机体修复烷基加合物的关键酶。该酶结构与功能异常与肿瘤发生、发现、有效治疗及肿瘤耐药性等方面都有着密切的联系 ,本文综述了近年来的研究进展。

不同级别胶质瘤中P53蛋白与O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶表达的区别与联系

目的探讨不同级别胶质瘤中P53蛋白与O6.甲基鸟嘌呤.DNA甲基转移酶(MGMT)表达的关系。方法2013年1月至2013年12月在我院进行神经外科手术切除的98例脑胶质瘤组织作为研究对象,采用免疫组织化学的方法分析不同级别胶质瘤组织中P53蛋白与MGMT表达的关系。结果在不同级别胶质瘤组织间,MGMT阳性表达无统计学差异(P=0.462),但表达强度差异明显(P=0.019)。MGMT表达强度与肿瘤分级呈负相关(r=-0.629,P<0.05)。MGMT与P53在阳性表达强度上呈负相关(r=-0.750,P<0.05)。结论P53蛋白与MGMT在不同级别的胶质瘤中的表达有一定的关系,而且P53表达增强和MGMT表达减弱均会对胶质瘤的发生及其恶性程度产生影响。

O^6-甲基鸟嘌呤-DNA-甲基转移酶(MGMT)在乳腺癌中的表达及其临床意义

目的:研究DNA修复酶(O-methylguanine-DNA methyltransferase,MGMT)在乳腺癌中的表达及其临床意义。方法:乳腺癌和腺瘤标本共计143例,10%福尔马林固定,石蜡包埋,采用SABC免疫组织化学方法检测MGMT表达。结果:MGMT在乳腺癌和乳腺腺瘤中的阳性率分别为57.85%和13.64%,组间比较具有显著性差异。MGMT在乳腺癌中的表达与患者的年龄、淋巴结转移有关。结论:MGMT的异常表达与乳腺癌的淋巴结转移有关;MGMT可以作为判断乳癌发生和预后的重要指标;检测其表达可以指导临床上化疗方案的制定。

乳腺癌组织中O^6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶的表达

采用原位杂交方法检测30例乳腺癌组织O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶(MGMT)表达水平。结果显示,MGMT阳性率为93.4%(28/30),其中高表达28.6%(8/28),中、低表达71.4%(20/28)。乳腺癌组织MGMT的表达与临床分期无关。

非小细胞肺癌患者O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶的表达及意义

目的:探讨非小细胞肺癌MGMT表达的临床病理意义。方法:应用免疫组化方法检测90例非小细胞肺癌癌组织中MGMT的表达,并以60例肺癌周围正常组织作为对照。结果:在90例非小细胞肺癌患者肿瘤组织中MGMT的表达率为53.33%(48/90),明显低于肺癌周围正常组织的76.67%(46/60)(P=0.0065);非小细胞肺癌患者肿瘤组织中,MGMT的阳性表达率在吸烟组为72.73%(40/55),明显高于不吸烟组的22.86%(8/35)(P=0.0000);在低分化组为35.0%(14/40),明显低于高、中分化组的68.0%(34/50)(P=0.0037);但与患者性别、年龄、肿瘤大小、病理类型、淋巴结转移及TNM分期均无明显相关性(P>0.05)。结论:非小细胞肺癌中,MGMT的阳性表达与肺癌的发生、发展相关,其监控有助于肺癌的预防及早期诊断。