卵巢浆液性肿瘤中OCT4蛋白的表达及与化疗耐药的关系研究

目的:探讨OCT4蛋白在卵巢浆液性肿瘤组织中的表达与卵巢肿瘤发生发展及与化疗耐药的关系。方法:采用免疫组织化学链霉素抗生物素蛋白-过氧化酶连接法(SP法)检测OCT4蛋白在10例正常卵巢组织、10例卵巢良性浆液性囊腺瘤、10例卵巢交界性浆液性囊腺瘤和67例卵巢浆液性腺癌(其中化疗耐药30例,化疗敏感37例)的石蜡病理切片中的表达情况。结果:OCT4蛋白的阳性表达率在正常卵巢组织、卵巢良性浆液性囊腺瘤、卵巢交界性浆液性囊腺瘤和卵巢浆液性腺癌组织中分别为0、40.00%、50.00%和62.69%,差异有显著统计学意义(P=0.002)。在卵巢浆液性腺癌化疗耐药和化疗敏感组织中分别为83.33%和45.95%,差异有显著统计学意义(P=0.002)。OCT4蛋白的阳性表达率与卵巢浆液性腺癌的临床病理特征无明显相关性(P>0.05)。结论:OCT4蛋白可能在卵巢浆液性肿瘤发生发展和卵巢癌化疗耐药中发挥重要作用,可能作为卵巢癌化疗耐药预测的一个重要参考指标。

肝癌中Oct4蛋白的表达及与临床病理因素的关系

目的检测八聚体结合转录因子4(Oct4)蛋白在肝细胞癌组织中的表达,并探讨其与临床病理因素的相关性。方法收集60例肝癌患者手术切除的肝细胞癌组织及对应的癌旁组织标本,应用免疫组织化学方法检测Oct4蛋白的表达,观察Oct4蛋白表达与临床病理因素的关系。结果肝细胞癌组织Oct4蛋白阳性表达率显著高于癌旁组织(81.67%vs.15.0%)(P<0.05);肝细胞癌组织中Oct4蛋白的表达与肿瘤大小、血管侵犯及TNM分期有关(P<0.05)。结论 Oct4蛋白在肝细胞癌的发生发展中发挥重要作用,可作为判断预后有价值的分子标记物。

Oct4蛋白在胃癌及癌旁组织中的表达及其意义

目的检测干细胞标记物Oct4蛋白在胃癌组织及其相应癌旁组织中的表达,并探讨其与临床病理因素的相关性。方法收集54例患者手术切除的胃癌组织及对应的癌旁组织标本,应用免疫组织化学方法检测Oct4蛋白的表达。结果胃癌组织Oct4蛋白阳性表达率显著高于癌旁组织(75.9%vs.33.3%)(P<0.05);胃癌组织中Oct4蛋白的表达与肿瘤分化程度呈正相关(P<0.05),亦与胃癌的浸润深度、淋巴结转移密切相关(P<0.05),但与年龄、性别、TNM分期无关。结论胃癌组织中Oct4蛋白的表达与肿瘤分化程度相关,Oct4可以作为胃癌预后判断有价值的分子标记物。

干细胞转录因子Oct4和CD133蛋白在肝外胆管癌组织中的表达及临床意义

目的:探讨干细胞转录因子Oct4(Oct4)和CD133蛋白在肝外胆管癌(EHCC)中的表达及临床意义。方法:应用免疫组化方法检测50例EHCC、30例癌旁胆管组织(TAC)和20例正常胆管组织(NBDT)中Oct4和CD133蛋白表达水平,并结合临床病理特征进行分析。结果:在EHCC中Oct4和CD133蛋白阳性表达率分别为62.0%(31/50)和68.0%(36/50)。EHCC中Oct4和CD133表达阳性率显著高于TAC和NBDT(P<0.05)。Oct4和CD133的表达与EHCC的TNM分期、分化程度和转移相关(P<0.05),且两者表达呈正相关(r=0.33,P<0.05)。结论:检测Oct4和CD133基因蛋白表达可作为评估EHCC生物学行为和预后的参考指标。

Tat融合蛋白表达载体TAT-OCT4的克隆化及蛋白表达研究

目的构建重组表达载体TAT-OCT4,在E.coli BL21中高效表达并纯化融合蛋白。为进一步通过蛋白转导方式诱导多能干细胞提供物质基础。方法经RT-PCR获得编码人OCT4的全基因序列,连接到原核表达载体TAT-V2上,得到重组表达载体TAT-OCT4,转化大肠埃希菌,异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(isopropylβ-D-thiogalactopyranoside,IPTG)诱导TAT-OCT4融合蛋白的表达。表达产物用SDS-PAGE鉴定,亲和层析柱纯化融合蛋白,并应用Western Blot检测蛋白的特异性,应用免疫荧光检测融合蛋白转导人皮肤成纤维(human skin fibroblasts,HSF)细胞的效果。结果成功构建了TAT-OCT4融合蛋白的原核表达载体,在诱导下获得了高效表达并纯化了融合蛋白,Western Blot鉴定正确。免疫荧光提示融合蛋白可快速转导入HSF细胞内。结论 TAT-OCT4融合蛋白可以安全,高效地转导入HSF细胞中。

OCT4在膀胱癌中的表达及其临床意义

目的检测干细胞标记物OCT4在膀胱癌中的表达,并探讨其与临床病理因素及肿瘤转移的相关性。方法采用Westernblotting、qRT-PCR检测OCT4在5种膀胱癌细胞株及人膀胱上皮永生化细胞株SV-HUC-1中的表达情况;同时收集46例患者膀胱癌根治手术切除的膀胱癌组织标本,应用免疫组织化学方法检测OCT4蛋白的表达。结果 OCT4在人类膀胱癌细胞株RT-4、Tcc-Sup、KK47、T24、5637中均有表达,而在人膀胱永生化细胞株中无表达。OCT4在膀胱癌组织中的表达率为76.1%,在正常膀胱组织中无表达。其异性染色定位于肿瘤细胞核内;膀胱癌组织OCT4蛋白阳性表达率显著高于正常组织(P<0.05);膀胱癌组织中的OCT4蛋白的表达与肿瘤病理分级呈正相关(P<0.05),与膀胱癌的浸润深度无相关性(P>0.05);与肿瘤转移呈正相关(P<0.05);与年龄、性别、TNM分期无明显相关性。OCT4阳性膀胱癌患者及阴性患者的3年总生存率分别为42.2%和76.7%,无转移生存率分别为35.4%和59.2%,结果均有统计学意义。结论膀胱癌组织中OCT4蛋白的表达与肿瘤分化程度及转移相关,对膀胱癌的早期诊断和预后分析有显著意义。

非小细胞肺癌组织中转录因子Oct4、Sox2的表达变化及意义

目的观察非小细胞肺癌组织中转录因子Sox2和Oct4的表达变化,并探讨其意义。方法选取非小细胞肺癌患者45例和肺部良性病变患者30例,采用免疫组化法和RT-PCR法检测Sox2、Oct4蛋白在两种不同组织中的表达,分析非小细胞肺癌组织中Sox2、Oct4蛋白表达与临床病理参数的关系。结果 Sox2、Oct4在30例肺部良性病变组织中表达均为阴性。45例非小细胞肺癌组织中Sox2蛋白阳性24例,阳性表达率为51.1%;Oct4蛋白阳性33例,阳性表达率为73.3%。Sox2、Oct4蛋白水平随分化程度的增高而降低,随TNM分期的增高而升高,差异有统计学意义(P均<0.05)。Sox2与Oct4在肺癌组织中的表达无相关性(P>0.05)。Sox2、Oct4均阳性表达者远处转移发生率明显高于阴性表达者(P<0.05)。结论非小细胞肺癌组织中Sox2与Oct4表达升高,并与肿瘤分期、分化程度密切相关;二者可能参与了非小细胞肺癌的发生发展。

肿瘤干细胞标记物CD133、CD44、SOX2、OCT4、ALDH1在NSCLC中的表达及临床意义

目的探讨肿瘤干细胞标记物CD133、CD44、SOX2、OCT4、ALDH1在非小细胞肺癌(NSCLC)组织中的表达及其临床意义。方法采用免疫组织化学方法,检测70例NSCLC组织中CD133、CD44、SOX2、OCT4、ALDH1蛋白的表达情况。结果 CD133、CD44、SOX2、OCT4、ALDH1在70例NSCLC组织中阳性表达率分别为88.57%、98.57%、100.00%、100.00%、100.00%,强阳性表达率分别为48.57%、67.14%、67.14%、31.43%、50.00%;NSCLC组织中CD44与SOX2共表达分析存在统计学意义(P=0.028);70例NSCLC中CD44++SOX2++组合占38.57%(27/70),CD44++ALDH1++组合占34.29%(24/70),SOX2++ALDH1++组合占34.29%(24/70),CD133++SOX2++组合占31.43%(22/70),双强阳性NSCLC组织与非双强阳性NSCLC组织比较,病理分化程度方面均有差别,双强阳性NSCLC组织多为中、低分化,而非双强阳性NSCLC组织倾向高分化。上述4种双强阳性组织与非双强阳性组织在病理分化程度上比较,均有统计学意义(P值分别为0.0022、0.0463、0.0463、0.003)。结论 NSCLC组织中OCT4、CD44、SOX2、CD133、ALDH1表达阳性率高;CD44与SOX2存在共表达关系;双强阳性组合CD44++SOX2++、CD44++ALDH1++、SOX2++ALDH1++、CD133++SOX2++,有可能对研究NSCLC干细胞标记物有一定的帮助。

Oct4与TGF-β信号通路相关因子在胃癌组织中的表达和相互关系

目的:探讨八聚体结合蛋白4(Oct4)与TGF-β信号通路相关因子在胃癌组织中的表达情况和相互关系。方法:57例胃癌患者手术切除的癌组织及对应正常胃组织,采用Western blotting法检测Oct4、TβRⅡ、Smad2、Smad3、E-Cadherin蛋白的表达情况,分析它们与胃癌临床病理特征的关系,以及胃癌组织Oct4表达与TβRⅡ、Smad2、Smad3、E-Cadherin的相关性。结果:胃癌组织Oct4蛋白的表达明显高于正常组织,TβRⅡ、Smad2、Smad3、E-Cadherin蛋白的表达明显低于正常组织(P<0.05)。胃癌组织Oct4、TβRⅡ、Smad2、Smad3、E-Cadherin表达与与肿瘤组织分型、临床分期、淋巴结转移和浆膜浸润有关(P<0.05)。胃癌组织Oct4表达与TβRⅡ、Smad2、Smad3、E-Cadherin呈负相关关系(r=-0.887、-0.912、-0.779、-0.879,P<0.01)。结论:胃癌组织Oct4高表达可参与胃癌的发生发展和浸润、转移,其机制可能与调节TGF-β信号通路,诱导细胞上皮间质转化有关。

Oct4和Klf4慢病毒共转染外周血细胞的研究

目的 观察Oct4和KLF4慢病毒载体共转染CD44阳性细胞并观察其在CD44阳性细胞中的表达.方法 培养CD44＋细胞并用CD44＋蛋白做免疫荧光染色.通过将Oct4和Klf4慢病毒共转染入CD44＋细胞,和免疫双染观察其在CD44＋细胞中的表达.结果 染色KLF4培养的细胞CD44的蛋白检测阳性.Oct4的和Klf4的慢病毒细胞转染成功,蛋白在48h后表达,表达阳性率为96.4%.结论 即Oct4和Klf4的慢病毒转染能在CD44＋细胞表达Oct4和Klf4的融合蛋白.