携带人OCT4A基因的慢病毒载体的构建及其稳定转染K562白血病细胞株的建立

本研究旨在构建共表达人OCT4A与绿色荧光蛋白(GFP)慢病毒载体p LVX-OCT4A-Zs Green1,并通过感染获得稳定表达重组质粒的白血病K562细胞系,观察OCT4A在其中的表达。根据Gen Bank数据库提供的OCT4A mRNA序列,合成编码mRNA基因的特异性引物序列,通过RT-PCR技术扩增出OCT4A全长片段,克隆至p CR-Blunt载体。将OCT4A DNA片段酶切回收后克隆至经EcoR1酶切线性化的慢病毒载体p LVX-IRES-ZsGreen1,构建p LVX-OCT4A-Zs Green1慢病毒重组质粒,利用测序鉴定所构建的重组载体是否正确。经三质粒包装系统包装后获得高滴度慢病毒颗粒并感染人白血病细胞系K562,通过流式细胞仪分选获得稳定表达的白血病细胞系,应用Real-time PCR和Western blot方法分别检测稳定转染细胞系的OCT4A mRNA和OCT4A蛋白表达。应用CCK-8法和平板细胞克隆形成试验测定OCT4A对K562细胞增殖能力的影响。结果表明,经限制性内切酶检测及基因测序证实成功构建了携带OCT4A基因的重组慢病毒;包装病毒颗粒超速离心后病毒滴度达(1.43±0.25)×108U/ml;病毒感染K562细胞后经流式细胞仪分选获得GFP+细胞,实时定量PCR及Western blot证实病毒感染后OCT4A基因及蛋白的表达可有效上调;CCK-8法及平板集落形成试验显示病毒感染的K562细胞体外增殖活性明显升高,与对照组相比均有统计学差异(P<0.05)。结论:成功构建了表达OCT4A基因的慢病毒载体,并且获得可稳定上调OCT4A表达的K562细胞株。

脑胶质瘤组织中OCT4A和OCT4B水平及临床意义分析

目的探讨脑胶质瘤组织中八聚体结合转录因子4(OCT4)剪切变体OCT4A和OCT4B水平及临床意义。方法收集本院2011年1月至2016年12月手术切除并经病理证实的脑胶质瘤组织84例和正常脑组织36例,采用实时荧光定量PCR(QPCR)检测以上组织中的OCT4A和OCT4B mRNA水平,分析脑胶质瘤组织中OCT4A和OCT4B mRNA水平与临床病理参数(年龄、性别、病理分级、病理类型、分化程度、瘤周水肿及浸润深度)和预后的关系,采用Cox比例风险回归模型分析影响预后的因素。结果 84例脑胶质瘤组织中的OCT4A mRNA水平为2. 144±1. 293,高于36例正常组织的1. 181±0. 688(t=4. 212,P<0. 001); OCT4B mRNA水平为2. 912±1. 540,亦高于正常组织的1. 258±0. 882(t=6. 025,P<0. 001);脑胶质瘤组织中OCT4A和OCT4B mRNA水平呈正相关(r=0. 462,P=0. 012)。脑胶质瘤组织中OCT4A和OCT4B水平与患者的性别、年龄和瘤周水肿均无关,而与病理类型、分化程度和病理分级有关,且在胶质母细胞瘤、低分化和病理分级Ⅲ～Ⅳ级患者中较高(P<0. 05)。单因素分析发现脑胶质瘤患者的总生存期与性别、年龄、瘤周水肿和浸润深度均无关,而与病理类型、分化程度、病理分级及OCT4A和OCT4B表达水平有关(P<0. 05); Cox风险比例回归模型分析发现病理类型、分化程度、病理分级及OCT4A和OCT4B表达水平为影响预后的独立因素,其中胶质母细胞瘤、低分化程度、病理分级较晚及OCT4A、OCT4B高表达为风险因素。结论脑胶质瘤组织中OCT4A和OCT4B水平升高,且与病理类型、分化程度和病理分级有关,OCT4A和OCT4B高表达者的预后较差,可能参与了该恶性肿瘤的发生发展,对脑胶质瘤的诊治及预后预测有一定意义。

Oct4假基因在肝癌中作用的研究进展

在21世纪,肿瘤死亡率极高,也将是人类面临的重大威胁。其中肝癌是较常见的恶性癌症,在世界范围内死亡率高。肝癌起病隐匿,患者确诊时多为肝癌中期或晚期阶段,治疗手段有限且效果不理想,因此肿瘤标志物的发现对于早期诊断有很大帮助。研究表明八聚体结合转录因子4(Oct4),在维持胚胎干细胞的多潜能和自我替换方面起着关键作用。

子宫内膜异位症不孕患者miR-145与Fascin-1、OCT4的相关性及临床意义

目的 研究子宫内膜异位症(EMs)不孕患者miR-145与Fascin-1、OCT4的相关性及临床意义。方法 选择2020年1月至2022年1月于重庆高新区第一人民医院行腹腔镜手术的100例EMs不孕患者作为研究组,留取异位子宫内膜组织;另取同期因宫腔粘连行宫腔镜手术的55例患者作为对照组,留取正常子宫内膜组织。检测两组以及EMs组中不同AFS分期患者内膜组织中miR-145、Fascin-1、OCT4的表达水平,分析EMs组中miR-145与Fascin-1、OCT4表达的相关性,随访EMs不孕患者术后1年的自然妊娠情况,比较EMs组中不同miR-145表达患者术后自然妊娠率。结果 EMs组子宫内膜组织中miR-145的表达水平及Fascin-1、OCT4的mRNA和蛋白表达水平均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);EMs组中AFSⅢ~Ⅳ期患者子宫内膜组织中miR-145的表达水平及Fascin-1、OCT4的mRNA和蛋白表达水平均高于Ⅰ~Ⅱ期患者,差异有统计学意义(P<0.05);EMs组患者子宫内膜组织中miR-145的表达水平与Fascin-1、OCT4的mRNA和蛋白表达水平均呈正相关(P<0.05);根据EMs组患者子宫内膜组织中miR-145表达水平的中位数分为miR-145高表达患者和低表达患者,miR-145高表达患者术后累积自然妊娠率低于miR-145低表达患者,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 EMs不孕患者子宫内膜组织中miR-145表达增加与Fascin-1、Oct4表达增加及术后自然妊娠率降低有关。

OCT4A基因对K562细胞生物学活性的影响

目的:探讨OCT4A基因体外对K562细胞生物学行为的影响及与凋亡相关的分子机制。方法:克隆人OCT4A基因,构建靶向上调及下调OCT4A基因与绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)的重组慢病毒表达载体p LVX-OCT4A-Zs Green1、PLB-OCT4A sh RNA,三质粒包装系统包装病毒,并测定滴度。实验分为空白对照、p LVX空质粒、p LVX-OCT4A-Zs Green1、PLB-OCT4A sh RNA和非特异sh RNA共5组。Western-blot检测各组OCT4A蛋白表达。CCK-8法绘制各组细胞增殖曲线。采用Annexin V/7-AAD标记流式细胞术检测细胞凋亡,流式细胞术检测细胞分化抗原CD11b和CD15表达;实时定量PCR检测caspase3、BIM、BCL-x L和BAX m RNA表达变化。结果:成功克隆人OCT4A基因,并成功构建重组慢病毒载体p LVX-OCT4A-Zs Green1和PLB-OCT4A sh RNA。Western blot证实2种病毒感染后可分别有效上调及下调OCT4A蛋白的表达。CCK-8法检测显示,p LVX-OCT4A-Zs Green1组K562细胞体外增殖活性明显升高,而p LVX-OCT4A sh RNA组K562细胞增殖活性显著降低(P<0.05)。感染后p LVX-OCT4A-Zs Green1和PLB-OCT4A sh RNA 2组K562细胞凋亡率分别为(3.48±0.52)%和(7.25±0.57)%(P<0.05),而OCT4A过表达及抑制后细胞表面分化抗原CD15、CD11b的表达无明显变化。OCT4A上调后Caspase-3、BIM、BAX较对照组均下调,但差异无统计学意义(P>0.05),而BCL-x L基因表达则明显升高(P<0.01)。结论:成功构建重组慢病毒载体p LVX-OCT4A-Zs Green1及PLB-OCT4A sh RNA,它们可分别有效地上调及下调OCT4A蛋白表达。OCT4A基因可促进K562细胞的增殖、抑制凋亡,其抑制凋亡机制可能与BCL-x L基因上调有关。

异位高表达OCT4的人骨髓间充质干细胞对T淋巴细胞功能的影响

目的:探讨异位高表达OCT4的人骨髓间充质干细胞(MSC)在体外对T细胞增殖、活化及分泌功能的影响。方法:分离健康儿童外周血单个核细胞,使用Anti-CD3/CD28单克隆抗体体外激活T淋巴细胞,白介素(IL)2体外刺激培养的T细胞1周。建立异位高表达OCT4的MSC(MSC-OCT4)与活化T细胞的体外共培养体系,收集共培养1周后的上清液,流式细胞仪测定Th1/Th2细胞因子(IL-2、IL-4、IL-6、IL-10、肿瘤坏死因子-α、γ干扰素)水平。收集共培养1周后的淋巴细胞,通过Countstar软件进行计数,用流式细胞仪测定T细胞及活化T细胞亚群的比例后,计算出绝对值,以均数±标准差表示。结果:与对照单独T细胞培养组相比,MSC及MSC-OCT4均能显著抑制CD3^(+)T细胞、CD3^(+)CD4^(+)T细胞和CD3^(+)CD8^(+)T细胞增殖。与MSC相比,MSC-OCT4能更好地抑制CD3^(+)CD8^(+)T细胞增殖(P=0.049),且主要抑制早期T细胞活化。与对照单独T细胞培养组相比,MSC及MSC-OCT4均能显著下调细胞因子IL-2和γ干扰素水平。与T细胞共培养1周后,MSC与MSC-OCT4组细胞因子IL-6水平显著增加。与对照MSC组相比,MSC-OCT4组在共培养1周后活细胞数更高(P=0.019),且能耐受更高浓度丝裂霉素C的抑制增殖作用。结论:MSC及MSC-OCT4在体外均能抑制IL-2刺激的T细胞增殖及活化,过表达OCT4后MSC能更强地抑制CD3^(+)CD8^(+)T细胞增殖,且具有更好的体外增殖能力,可能具有更好更持久地调节Th1/Th2造血因子平衡的作用。

肺金生方对肺癌干细胞自我更新的抑制作用及其机制研究

目的:检测肺金生方对肺癌干细胞自我更新的抑制作用,并探究其可能的分子机制。方法:采用无血清培养法从人源A549肺癌细胞中诱导肺癌干细胞,建立肺癌干细胞体外培养体系;通过球落形成实验检测肺金生方对肺癌干细胞自我更新的作用;同时,检测肺金生方对肺癌干细胞相关分子造血干细胞抗原CD133、转录因子SOX2、八聚体结合转录因子4(OCT4)及Notch信号通路关键分子Notch1、Jagged1表达的影响。结果:无血清培养法培养的肺癌干细胞成球落状生长,肺癌干细胞表面标志物CD133及干细胞核转录因子SOX2、OCT4的表达增加,表明本研究成功建立了肺癌干细胞体外培养体系。肺金生方可显著减少肺癌干细胞的球落形成数量及体积。与对照组相比,肺金生方可显著抑制肺癌干细胞相关分子CD133、SOX2、OCT4及Notch信号通路关键分子Notch1、Jagged1的表达。结论:肺金生方可抑制肺癌干细胞自我更新,其作用机制可能与抑制Notch1信号通路相关分子有关。

肿瘤干细胞标志物CD133、CD44、SOX2、OCT4、ALDH1在非小细胞肺癌组织中的表达及临床意义

目的研究肿瘤干细胞标记物CD133、CD44、SOX2、OCT4、ALDH1在非小细胞肺癌(NSCLC)组织中的表达及临床意义,为探索非小细胞肺癌肿瘤干细胞提供参考。方法采用免疫组织化学方法检测70例NSCLC组织、14例非癌组织中的CD133、CD44、SOX2、OCT4、ALDH1蛋白的表达并对结果进行分析。结果 (1)CD133、CD44、SOX2、OCT4、ALDH1在70例NSCLC组织中的阳性表达率分别为88.57%、98.57%、100%、100%、100%,强阳性表达率分别为48.57%、67.14%、67.14%、31.43%、50%;CD133、C C D 4 4在N S C L C与非癌组织中的表达差异存在统计学意义(P均<0.0001),SOX2、OCT4、ALDH1在NSCLC与非癌组织中的表达差异无统计学意义(P均>0.05)。(2)随着病理级别的升高,CD133、CD44、SOX2、OCT4及ALDH1的表达呈上升趋势,分化越低的NSCLC表达上述指标的概率越高,其中CD133、SOX2、OCT4的表达在高、中、低分化组织中差异存在统计学意义(P值分别为0.001、0.040、<0.0001);CD133的表达在吸烟史、分化程度、淋巴结转移、肿瘤分期四个因素上差异存在统计学意义(P值分别为0.033、0.001、0.033、0.046);CD44与SOX2的表达在年龄上的差异存在统计学意义(P值分别为0.001、0.040)。结论 NSCLC组织中CD133、CD44、SOX2、OCT4、ALDH1阳性率高,CD133、CD44的表达明显高于非癌组织;CD133、SOX2、OCT4与NSCLC的恶性程度有关;CD44与SOX2与年龄因素有关。

miR-145通过下调OCT4基因抑制肺腺癌干细胞增殖

背景与目的 miR-145是通过miRNA芯片及qPCR验证筛选出的一种潜在肺癌"保护性"miRNA。本研究旨在探讨miR-145与肺癌干细胞之间的关系及分子机制。方法 miRNA芯片对肺腺癌患者瘤旁和正常组织进行表达谱分析;生物信息学软件预测miR-145潜在的靶基因;脂质体2000介导转染miR-145模拟物和阻遏物进入A549细胞株;实时定量PCR检测miR-145表达水平;Western blot检测OCT4蛋白水平;双荧光素酶报告基因验证miR-145是否作用于OCT4mRNA的3'UTR区预测靶位;细胞增殖实验检测miR-145对于A549细胞生长的作用;流式细胞术检测干细胞表型CD133+的表达。结果在肺腺癌组织中miR-145表达明显低于瘤旁正常组织;miRanda软件预测OCT4是miR-145潜在靶基因;与对照组相比,miR-145模拟物组和阻遏物组miR-145表达分别明显上调和下调;miR-145对A549细胞的生长有双向调节作用,过表达miR-145抑制细胞生长;过表达miR-145可明显降低OCT4蛋白水平及干细胞表型CD133百分比,而抑制miR-145表达则明显增加OCT4蛋白水平及CD133百分比。双荧光素酶报告基因检测证明miR-145可作用于OCT4mRNA的3'UTR区预测靶位。结论 miR-145可通过下调OCT4基因表达抑制A549肺腺癌细胞株中干细胞的增殖,是一种潜在的肺癌"保护性"miRNA。

OCT4在肝细胞癌中的表达及其临床意义

背景与目的:近年关于肝癌干细胞问题备受关注,已发现部分干细胞标志物在肝细胞癌中表达并与预后有关,其中OCT4基因是POU转录因子的重要组员,是维持胚胎干细胞自我更新能力和分化潜能的关键因子。本研究旨在检测OCT4A在肝细胞癌中的表达情况,并探讨其与病理因素和预后的关系。方法:用半定量RT-PCR检测5株人肝癌细胞系和1株永生化肝细胞系,以及107例肝细胞癌组织、相应的癌旁肝组织和20例正常无肝硬化肝组织中OCT4A mRNA的表达,并结合肝癌临床病理因素及预后进行分析。结果:OCT4A mRNA在人肝癌细胞系SMMC-7721、BEL-7402、Hep-G2、MHCC-97L、MHCC-97H中均表达,而在永生化肝细胞系L-02中无表达。OCT4A mRNA在肝癌组织中表达率为72.0%,明显高于癌旁肝组织的30.8%(P<0.001),在正常无肝硬化肝组织中无表达。肝癌组织中OCT4A mRNA的表达与肿瘤大小、血管侵犯及TNM分期有关(P<0.05)。OCT4A mRNA阳性肝癌患者及阴性患者的3年总生存率分别为48.0%和83.7%,3年无瘤生存率分别为34.1%和58.0%,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:OCT4A mRNA在肝癌细胞及肝癌组织中高表达,可能在肝癌发生发展中发挥重要作用,可以作为肝癌临床预后的一个重要参考指标。

肺癌组织中干细胞转录因子Sox2和Oct4表达与微血管密度的相关性

背景:研究已证实干细胞转录因子Sox2和Oct4的高表达与肺癌的发生密切相关。目的:探讨肺癌组织中Sox2和Oct4表达与肿瘤微血管生成、临床病理指标的相关性。方法:应用免疫组织化学染色法检测60例肺癌组织和60例正常组织中Sox2和Oct4的表达,以及CD34标记的微血管密度。分析Sox2,Oct4的表达和微血管密度值与临床病理参数关系。结果与结论:(1)Sox2和Oct4在肺癌组织中阳性表达率为46.67%(28/60)、71.67%(43/60),而在正常肺组织中表达均为阴性,差异有显著性意义(P<0.001);(2)肺癌组织中微血管密度值为16.22±2.18,明显高于正常组织4.36±2.07,差异有显著性意义(P<0.001);(3)Sox2、Oct4和微血管密度均与肿瘤TNM分期、分化程度、脉管浸润、淋巴结转移及肝转移相关(P均<0.05),而与年龄、性别无关(P均>0.05);(4)肺癌组织Sox2和Oct4阳性表达组微血管密度值显著高于阴性组(P<0.001);(5)Spearmen相关分析显示:肺癌组织中Sox2与Oct4无明显相关性(r=2.752,P>0.05);(6)结果表明,Sox2和Oct4表达上调可作为肺癌发生的早期预警事件,并与微血管密度呈正相关,二者可能共同参与了肿瘤微血管的生成、浸润及血行转移。

OCT4在膀胱癌中的表达及其临床意义

目的检测干细胞标记物OCT4在膀胱癌中的表达,并探讨其与临床病理因素及肿瘤转移的相关性。方法采用Westernblotting、qRT-PCR检测OCT4在5种膀胱癌细胞株及人膀胱上皮永生化细胞株SV-HUC-1中的表达情况;同时收集46例患者膀胱癌根治手术切除的膀胱癌组织标本,应用免疫组织化学方法检测OCT4蛋白的表达。结果 OCT4在人类膀胱癌细胞株RT-4、Tcc-Sup、KK47、T24、5637中均有表达,而在人膀胱永生化细胞株中无表达。OCT4在膀胱癌组织中的表达率为76.1%,在正常膀胱组织中无表达。其异性染色定位于肿瘤细胞核内;膀胱癌组织OCT4蛋白阳性表达率显著高于正常组织(P<0.05);膀胱癌组织中的OCT4蛋白的表达与肿瘤病理分级呈正相关(P<0.05),与膀胱癌的浸润深度无相关性(P>0.05);与肿瘤转移呈正相关(P<0.05);与年龄、性别、TNM分期无明显相关性。OCT4阳性膀胱癌患者及阴性患者的3年总生存率分别为42.2%和76.7%,无转移生存率分别为35.4%和59.2%,结果均有统计学意义。结论膀胱癌组织中OCT4蛋白的表达与肿瘤分化程度及转移相关,对膀胱癌的早期诊断和预后分析有显著意义。

肺腺癌组织中OCT4表达与患者临床指标及预后的相关性

背景与目的肺腺癌发病率不断升高,而OCT4是调控干细胞自我更新的关键基因,在癌干细胞的增殖分化过程中起重要调节作用。本研究目的为检测肺腺癌组织中OCT4表达,并分析其与肺腺癌患者转移、化疗疗效及预后的相关性。方法采用免疫荧光方法检测肺腺癌组织OCT4表达。卡方检验OCT4表达与临床病理指标的关系,Kaplan-Meier生存曲线计算生存率,采用Cox分析评估各指标与患者生存之间的关系。结果 126例肺腺癌组织中,91例可观察到OCT4阳性细胞。OCT4表达与肺腺癌患者转移及化疗耐药密切相关,且与患者无病生存期和生存期呈明显负相关。结论 OCT4表达与肺腺癌患者的转移及化疗耐药相关,提示预后不良。

MicroRNAs与OCT4基因之间的相互作用

OCT4基因是POU转录因子家族中的一员,它能与含八聚体基序(ATGCAAAT)的DNA结合。OCT4是一个关键的转录因子,在未分化胚胎干细胞中参与维持多能性和自我更新性,在许多种癌症包括肺癌、生殖细胞肿瘤、乳腺癌、宫颈癌、前列腺癌、胃癌、肝癌和卵巢癌中过表达。Micro RNAs(mi RNAs)是一种小的非编码RNA,通过和靶基因m RNA碱基配对来调控m RNA表达,降解m RNA或阻碍蛋白合成。一些mi RNAs被证实在癌细胞中调控干细胞因子如OCT4、NANOG、SOX2和KLF4,进而调控癌细胞的增殖、凋亡、分化、抗药性和免疫性。

卵巢原始生殖细胞分化及其衍生肿瘤中Oct4、CD34、p63的表达

目的研究Oct4、CD34、p63在原始生殖细胞衍生肿瘤的表达及其与肿瘤分化的关系。方法应用免疫组化SP法分别检测34例卵巢生殖细胞肿瘤及10例正常卵巢组织中Oct4、CD34、p63的表达。结果Oct4表达于无性细胞瘤和胚胎性癌,而在卵巢生殖细胞肿瘤的其他类型及正常卵巢组织中不表达(P<0·01)。CD34主要表达于卵黄囊瘤/内胚窦瘤,阳性率为81·3%,并且在卵黄囊瘤/内胚窦瘤的不同组织学形态间表达的差异有显著性(P<0·01)。p63主要表达于未成熟畸胎瘤,在卵巢生殖细胞肿瘤的其他类型及正常卵巢组织中不表达(P<0·01)。结论卵巢生殖细胞肿瘤中无性细胞瘤和胚胎性癌分化水平最接近于生殖母细胞至胚泡阶段。卵黄囊瘤CD34的分化表型与其组织学形态结构相关。Oct4、p63可分别作为进一步鉴别无性细胞瘤和未成熟畸胎瘤的标记物。

Oct4基因在宫颈癌中的表达及其意义

目的研究胚胎特异性基因Oct4在宫颈癌中的表达及其在宫颈癌发生发展中的作用。方法通过RT-PCR、免疫组织化学等方法检测Oct4基因在宫颈癌组织、宫颈癌细胞系以及原代宫颈癌肿瘤球细胞中的表达状况。结果①Oct4 mRNA在宫颈癌组织中的表达率为73.3%(22/30),显著高于正常宫颈组织中的表达率25.0%(3/12),P<0.01;②Oct4蛋白在宫颈癌组织中表达率为53.7%(22/41),显著高于正常宫颈组织中的表达率7.7%(1/13),P<0.01;③Oct4蛋白在宫颈癌细胞系Si Ha、HeLa、Caski和C33A中表达;④Oct4蛋白的表达随着宫颈癌肿瘤细胞的分化而降低。结论Oct4基因在宫颈癌中的表达增加,可能与宫颈癌干细胞有密切的关系,这还有待于进一步的研究。

非小细胞肺癌组织中转录因子Oct4、Sox2的表达变化及意义

目的观察非小细胞肺癌组织中转录因子Sox2和Oct4的表达变化,并探讨其意义。方法选取非小细胞肺癌患者45例和肺部良性病变患者30例,采用免疫组化法和RT-PCR法检测Sox2、Oct4蛋白在两种不同组织中的表达,分析非小细胞肺癌组织中Sox2、Oct4蛋白表达与临床病理参数的关系。结果 Sox2、Oct4在30例肺部良性病变组织中表达均为阴性。45例非小细胞肺癌组织中Sox2蛋白阳性24例,阳性表达率为51.1%;Oct4蛋白阳性33例,阳性表达率为73.3%。Sox2、Oct4蛋白水平随分化程度的增高而降低,随TNM分期的增高而升高,差异有统计学意义(P均<0.05)。Sox2与Oct4在肺癌组织中的表达无相关性(P>0.05)。Sox2、Oct4均阳性表达者远处转移发生率明显高于阴性表达者(P<0.05)。结论非小细胞肺癌组织中Sox2与Oct4表达升高,并与肿瘤分期、分化程度密切相关;二者可能参与了非小细胞肺癌的发生发展。

非小细胞肺癌组织中OCT4和miRNA-155的表达及其与临床病理特征的关系

目的探讨非小细胞肺癌组织中OCT4蛋白、miRNA-155的表达及其与肺癌临床病理特征的关系。方法采用免疫组织化学及RT-qPCR方法,检测60例非小细胞肺癌患者组织中OCT4蛋白和miRNA-155的表达情况,并分析其与临床病理特征相互关系。结果免疫组织化学检测发现OCT4蛋白在肿瘤组织中的阳性表达率为61.67%。OCT4蛋白在高分化、中分化和低分化的肺癌组织中的阳性表达差异有统计学意义(P=0.021),随着癌组织分化程度的升高,OCT4的表达率逐渐下降。OCT4蛋白在有无淋巴结转移两组中的阳性表达差异有统计学意义(P=0.028)。OCT4的表达在临床病理分期中有统计学意义(P=0.049)。miRNA-155在非小细胞肺癌组织中均有不同程度表达,相对Ct值中位数是20.48。miRNA-155与高分化、中分化和低分化的肺癌组织中的表达有统计学意义(P=0.016),随着癌组织分化程度的升高,miRNA-155相对Ct值减小,说明其表达量升高。miRNA-155在OCT4阳性组中的表达量低于OCT4阴性组。结论非小细胞肺癌组织中OCT4蛋白的表达与组织分化程度、淋巴结转移和临床分期相关。miRNA-155在OCT4蛋白阳性组的表达水平低于OCT4蛋白阴性组(P<0.0001)。miRNA-155和OCT4可能是非小细胞肺癌患者在基因和蛋白两个水平的反方向的改变,并且OCT4蛋白的表达受miRNA-155的影响。

人脑胶质瘤组织中Oct4、Wnt2的表达及其临床意义

目的:探讨Oct4和Wnt2在人脑胶质瘤组织中的表达及其与临床病理特征的关系。方法:选取临床及病理资料完整的长江大学附属第一医院2006-2009年手术切除并经病理证实为胶质瘤的石蜡标本56例,采用免疫组织化学方法检测56例胶质瘤组织(其中15例为术后复发)和10例脑外伤行内减压术切除的脑组织标本Oct4、Wnt2的表达。结果:正常脑组织中Oct4表达均为阴性,Wnt2表达仅1例呈弱阳性;56例胶质瘤组织中Oct4阳性34例(60.7%),Wnt2阳性40例(71.4%)。Oct4、Wnt2在低度恶性胶质瘤组中和高度恶性胶质瘤中的阳性率分别为46.2%和73.3%(P<0.05)及57.7%和83.3%(P<0.05),Oct4在复发肿瘤和初诊肿瘤中的阳性率分别为86.7%和51.2%(P<0.05)。人脑胶质瘤组织中Oct4和Wnt2表达呈正相关(r=0.537,P<0.01)。结论:Oct4、Wnt2的表达与人脑胶质瘤的恶性程度相关,Oct4的表达与胶质瘤的复发相关;Oct4可能是通过Wnt通路而参与了胶质瘤的发生、发展。

干细胞转录因子SOX2和OCT4在喉癌中的表达及与预后的关系

目的:探讨喉癌组织中干细胞转录因子SOX2和OCT4的表达及其与临床病理特征和预后的关系。方法:构建69例喉癌组织及20例癌旁正常组织芯片,应用免疫组织化学法检测喉癌组织及癌旁正常组织中SOX2和OCT4蛋白表达。结果:SOX2和OCT4蛋白在喉癌组织中的阳性表达率高于癌旁正常组织(P<0.05)。SOX2蛋白表达与喉癌T分期、临床分期和淋巴结转移有关(P<0.01);OCT4蛋白表达与喉癌分化程度有关(P<0.05);Kaplan-Meier生存分析结果显示,SOX2阳性表达患者的生存率明显低于阴性表达患者(P<0.01);OCT4阳性表达患者的生存率与阴性表达患者比较,差异无统计学意义。COX回归分析显示,SOX2是危险因子,其表达越高,患者预后越差(P<0.01)。结论:SOX2与喉癌的浸润、转移有关,可能是影响预后的独立危险因素。