菌悬液稀释倍数与OD_(600)的关系实验

将实验室从陕北石油污染土壤中分离出来的S3#菌用牛肉膏液体培养基在摇床中以30℃、160 r/min恒温培养48 h,离心、用磷酸盐缓冲液淋洗3次后,用磷酸盐缓冲溶液配制成菌悬液。然后,用磷酸盐缓冲溶液将菌悬液稀释成不同倍数,以磷酸盐缓冲溶液作为空白对照,用WFJ7200可见分光光度计在600 nm下测量菌悬液的吸光度。得出结论,溶液稀释倍数和OD600是乘幂关系,关系式为y=1.402 5x-0.935 3,R2=0.998 8。

快速准确制备大肠杆菌高效感受态细胞中有关OD_(600)值的探讨

目的探讨在不同转速下大肠杆菌OD600值与时间的关系，为能快速而准确的制备高效感受态细胞提供OD600值的量化标准。方法在不同转速下每隔一定时间测定大肠杆菌OD600值。结果总结了不同转速下OD600值在0．3—0．4所需时间段，并且用此时间段培养的细菌制备的感受态细胞的转化效率可高达（6．45±0．05）×107转化子／μg DNA。结论用此法制备的感受态细胞完全可以满足大部分在质粒中进行的常规克隆的需要。

BOD Exertion and OD600 Measurements in Presence of Heavy Metal Ions Using Microbes from Dairy Wastewater as a Seed

BOD measurements in presence of cobalt, nickel, copper, zinc, silver and cadmium are reported using wastewater from dairy industry as a seed. Extent of inhibition in BOD is studied for variables like, concen-tration of metal ions (0.2 mM to 1.4 mM), pH (3 to 8) and temperature of incubation (15℃, 20℃, 25℃, 30℃ and 35℃). Results of BOD inhibition are supported by absorbance measurement (OD600) studies of microbial matter preserved in Luriya broth medium. OD measurement results are used to derive minimum inhibitory concentration, i.e., threshold concentration of each metal showing toxicity towards microbes. Sil-ver is found to be the most toxic element.

微生物矿化对黏土渗透性影响的试验研究

为探究矿化对黏土渗透性的影响,采用球形赖氨酸芽孢杆菌属kp-22菌诱导矿化处理黏土,测定了碳酸盐生成率,研究了矿化处理后黏土的渗透性,系统分析了渗透系数随菌液OD600值、胶结液浓度和土中镉含量变化的规律,探讨了各因素对渗透系数的影响规律及机理,建立了考虑菌液OD600值和胶结液浓度影响的矿化后黏土渗透系数的经验公式。结果表明:矿化后的土样中生成了碳酸盐颗粒,填充了部分土体孔隙,渗透系数最多可降低约一个数量级;随着菌液OD600值的增大,矿化后黏土的碳酸盐生成率先升高后逐渐稳定,而土样的渗透系数先减小后趋于平稳,当菌液OD600值大于0.9时,碳酸盐生成率和渗透系数都变化很小;随着胶结液浓度增大,碳酸盐生成率先升高后下降,而渗透系数先减小后增大,当胶结液浓度为0.8 mol/L时,黏土的渗透系数最小;随着土中镉含量的增大,矿化反应受到抑制,渗透系数逐渐增大;矿化后黏土的渗透系数与碳酸盐生成率负相关,两者满足线性关系;所建立的矿化后黏土渗透系数经验公式计算值与试验结果吻合较好。

5种常见致病菌菌液OD值与其活菌数相关性研究

为确定大肠杆菌(E.coli)、巴氏杆菌(Pasteurella)、金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、表皮葡萄球菌(Staphylococcus epidermis)、牛链球菌(Streptococcus bovis)OD_(600)值与活菌浓度之间的数量关系,以及可以衡量二者间数量关系的方程。用比浊法分别测量菌液在1.5、3、4、6、8、10、12、14、16、18 h的OD_(600)值,并对各时间点的菌液稀释,进行平板计数,获得菌液浓度。综合OD_(600)与菌液浓度间的关系,得到5种致病菌在细菌生长对数期菌液OD_(600)值与活菌数量的关系方程。分别为:大肠杆菌:y=8 708.7e^(36.43x)(R^2=0.828);巴氏杆菌:y=34.82e^(35.57x)(R^2=0.866);金黄色葡萄球菌:y=49 331e^(28.16x)(R^2=0.743);表皮葡萄球菌:y=4×108e^(24.73x)(R^2=0.928);牛链球菌:y=8×109e^(68.21x)(R^2=0.971)。该研究结果可为菌液中活菌数量的测量提供依据。

不同假小链双歧杆菌对碳水化合物利用能力的比较研究

该研究通过生长曲线和体外发酵实验对12株假小链双歧杆菌利用17种碳水化合物的能力进行了比较探究。从整体上看,假小链双歧杆菌能在葡萄糖、乳糖、低聚半乳糖培养基中达到较高的生长量(OD_(600)≥0.99),在蔗糖、低聚半乳糖培养基中达到高的生长速率(代时≤150 min)。研究发现12株假小链双歧杆菌对于碳水化合物利用具有较大的差异性,其中FJSNT36M3仅能利用5种碳水化合物,而3株菌(FHNBA14M1、FGZ16I1M1、FXJWS49M21)能利用10种以上。3株菌(FGSYC12M4、FGZ16I1M1、FFJND17M1)在9种碳源培养基中的生长速率(代时)和生长量(OD_(600))较高。12株假小链双歧杆菌编码的大多为降解植源性碳水化合物的糖苷水解酶,在碳水化合物利用中展现出的差异可能是因为降解和转运碳水化合物的酶具有差异性。人粪便体外发酵实验证明,假小链双歧杆菌对碳水化合物利用能力的不同与其占据肠道内丰度的潜力相关。

分光光度法测定酿酒酵母细胞悬液浓度研究

采用分光光度法测定酿酒酵母（Saccharomyces cerevisiae）在不同生长条件、不同时间菌悬液OD600nm值,建立OD600nm在不同稀释区间的分段回归方程,利用OD600nm回归值绘制生长曲线,对比平板菌落计数法测得的生长曲线,研究在对数期与稳定期,OD600nm值nm与菌体数量以及稀释倍数的关系.结果表明,稀释前后OD600nm值在对应区间内呈线性关系,用OD600nm回归值绘制的生长曲线没有明显的衰亡期,其主要是由于在对数期以后OD600nm值与菌体数量不呈线性关系,而在稳定期以前两者线性良好;得到了OD600nm值在0.2～0.8范围内与细胞数量的对应关系,还发现实际OD600nm值与稀释倍数之间并不是简单的乘积关系,而呈幂函数关系.

重组大肠杆菌DH5α生长曲线的测定

为了探讨重组大肠杆菌适宜的培养时间,试验将携带质粒的重组大肠杆菌DH5α单菌落液体培养至OD600值为0.6左右,按一定比例接种于LB液体培养基中进行培养,分别在0,1.5,3,4,6,8,10,12,14,16,18,20小时时取菌液,用分光光度计测定OD600值,以培养时间为横坐标、OD600值为纵坐标作重组菌生长曲线图,同时提取质粒比较不同培养时间质粒量的变化。结果表明:重组大肠杆菌DH5α的生长经历了迟缓期、对数期、稳定期、衰亡期4个时期,符合细菌生长的规律;重组大肠杆菌生长至平台期时提取质粒的量最多。

紫花苜蓿组织培养体系的建立及其遗传转化

为建立高效的农杆菌介导的紫花苜蓿的遗传转化体系,以紫花苜蓿无菌苗叶片作为外植体,用8种含有不同激素浓度梯度的培养基对其进行愈伤组织及不定芽的诱导,结果表明,M7培养基(MS+1 mg/L 2,4-D+2 mg/L CH+0.25 mg/L KT+2mg/L琼脂)的愈伤组织诱导率最高,可达100%;继代表现最好,为胚性愈伤组织;同时,继续培养后可直接分化出不定芽,分化率达100%。结果表明,最适宜条件分别为卡那霉素(Kan)筛选浓度为75 mg/L;农杆菌菌液OD_(600)值为0.45-0.6之间。

纺织品抗菌性能测试中试验菌活性确定的研究

研究了对定时扩增培养后菌液OD600值与纺织品抗菌性能测试中试验菌活性确定相关性，有效地缩减了织物抗菌性能振荡测试法中试验有效性判定所需的试验周期。研究中确定了以扩增培养3．5h后的试验菌OD600值作为纺织品抗菌性能测试中试验菌活性的评判指标；结果显示OD600值大于0．6的菌液制备接种菌液，标准空白试验菌增长值F≥1．0，即后续抗菌性能测试试验有效；当OD600值在0．6～0．8时，OD600值越大，F值越大，即后续抗菌性能测试试验结果越准确。

哈密瓜细菌性果斑病菌悬液浓度计测及离体叶接种方法的研究

本实验通过研究得出哈密瓜细菌性果斑病菌(Acidovorax avenae subsp. Citrulli)菌悬液平板菌落计数浓度(CFU)与分光光度计测的混浊度(OD600)成直线关系,回归方程为y=4×10-10X+0.1128,相关系数R2=0.996。对供试的13个哈密瓜不同品种分别用离体叶人工接种和常规的苗期人工接种鉴定了其对果斑病的抗性。结果表明,离体叶人工接种同样可以反应哈密瓜品种的固有抗性。品种的抗病性采用病斑面积占叶面积的百分数(F)来衡量,计算公式:F=((N×d2)/(L×W))×100%其中N为病斑数,d为病斑直径,L为叶长,W为叶宽。

菌液状态对青海弧菌Q67急性生物毒性测试的影响

为了研究菌液状态对发光细菌急性毒性测试结果重现性的影响,实验选取ZnSO4·7H2O、CdCl2·2.5H2O、三氯异氰尿酸、十二烷基苯磺酸钠四种化学物质对不同状态的青海弧菌(Vibrio Qinghaiensis sp.-Q67)菌悬液进行急性毒性测试.结果表明:利用储存时间不同的菌种培养8.5 h或储存时间相同的菌种分别培养8.5 h、9.0 h、10.0 h获得的Q67菌悬液进行急性生物毒性测试,结果差异均较大.为了进一步探讨其中的原因,对实验所用菌悬液的pH、相对发光值(RLU)、OD600值(菌液密度指标)进行检测发现:菌液的pH差异不大,发光值和OD600值存在较大的不同.因此,发光值和OD600值是影响实验重现性的主要因素,而菌液的OD600值影响其发光值.因此,严格控制试验菌液的OD600值对提高实验的重现性具有重要意义.

环境变化对微生物活性及矿化的影响

微生物诱导碳酸钙沉积(MICP)技术因具有低能耗、低污染等环境友好性优势成为文物保护、水处理、混凝土修补加固等领域的研究热点。MICP的矿化效果受多因素的制约与影响。本文开展了环境温度、pH值等因素对细菌生长和微生物矿化的影响研究。结果表明,环境温度不超过40℃时对菌液脲酶活性影响不大,42.5~45℃时6h后脲酶活性急剧降低,超过45℃时30min后菌液浓度及脲酶活性均大幅下降,直至失活;pH值越大,脲酶活性衰减越明显,pH≥11时脲酶活性急剧下降,大量的细菌不能承受高碱性环境进一步分解死亡。MICP技术在30℃时碳酸钙产量最高,在pH值为11~13的环境中细菌很难生长繁殖,碳酸钙生成量较低。

乳酸菌高密度培养影响因子的研究

乳酸菌高密度培养技术以其优越性在发酵生产上已得到广泛应用,它可获得较高的产率,降低生产成本,从而提高产品在市场上的竞争力。本文通过比较接种量为1%、3%、5%的乳酸菌分别在22.5、25、28℃和的生长曲线,研究温度、接种量对乳酸菌高密度培养的影响,同时分别系列梯度稀释后平板计数。研究结果表明,28℃和3%接种量下乳酸菌的OD600值最大、活菌数最多,即3%接种量的乳酸菌在28℃时生长得最好。

钩端螺旋体对数生长期的测定

目的 了解在实验室条件下钩端螺旋体的生长规律 ,为进一步开展蛋白质组和基因表达谱的研究做准备。方法 使用pH为 7 4的EMJH液体培养基 ,在 30℃条件下置摇床上以 90r/min对该菌进行通气振荡培养 ,记录不同时间点的活菌数和培养物的光密度。结果 研究发现 ,钩体的生长与其它细菌培养相似 ,也有静止期、对数生长期、稳定期和衰老期。在该培养条件下 ,钩端螺旋体的对数生长期为培养的第 12～ 5 4h。在对数生长期 ,钩端螺旋体复制一代所需的时间约为 11 35h。并且 ,钩端螺旋体活菌计数和光密度值OD60 0 之间有较好的相关性。结论 本文比较详细地描述了钩端螺旋体的生长参数—活菌数和OD60 0 ,并找到了钩端螺旋体生长的对数生长期 ,在严格控制试验条件的情况下 ,可以使用测定液体培养物的OD60 0值的方法来推算菌体数 。

结核分枝杆菌菌悬液光密度值与菌落计数的关联性

目的建立一种基于光密度值计算结核分枝杆菌菌落数的可靠方法。方法利用低频超声和玻璃珠研磨两种方法制备H37Ra菌悬液,菌悬液2倍梯度稀释后,分别测定各个稀释度菌悬液在600 nm处的光密度值（OD600值）,并分析OD600值与稀释倍数曲线,确定最佳的菌悬液制备方法,OD600线性范围,以及OD600值与CFU关联曲线。结果 OD600值为0.1～0.6,线性范围内OD600值与稀释倍数线性回归分析结果显示,玻璃珠研磨法和低频超声法相关系数（R2）分别为0.98、1.00,均呈良好的相关性,且低频超声法比玻璃珠研磨法的相关性好,其菌液分散更均匀。OD600值与CFU值线性回归分析结果显示,玻璃珠研磨法和低频超声法回归方程分别是：CFU=2.35×107×OD600＋4.42×105、CFU=3.26×107×OD600＋6.89×105。结论低频超声法是一种较好的结核分枝杆菌菌悬液制备方法,结合OD600值测定,可成为一种可靠、快速的结核分枝杆菌定量方法。

大肠杆菌计数方法的比较与相关性分析

为了对大肠杆菌的不同计数方法进行比较研究,并探究OD600值、浊度与大肠杆菌活菌数之间的关系。试验采用大肠杆菌作为试验菌株,将细菌配制成菌悬液,用分光光度计、浊度计测量其OD600值及浊度,并采用平板计数法、显微计数法检测细菌数量,进行比较分析。结果表明:大肠杆菌2种计数方法的计数结果为显微计数法>平板计数法,且2种计数方法之间存在各自的特点;同时,大肠杆菌菌液OD600值和浊度与活菌数呈线性关系,其回归方程分别为y=27.067 x-4.025和y=0.156 x-0.169,均呈良好的相关性,可根据回归方程,测量OD600值或浊度直接推算出细菌的活菌数,其方法简单方便,为大肠杆菌计数问题提供理论依据。

γ辐射对青海弧菌Q67发光强度的影响

采用^(60)Coγ射线源对青海弧菌Q67辐照,研究了辐射剂量(率)对其发光强度的影响。实验表明,在0.05 Gy·min^(-1)、0.1 Gy·min^(-1)、0.2 Gy·min^(-1)三种剂量率下,青海弧菌Q67经过短时间的照射后,其发光强度明显受到抑制。剂量率(d)和照射时间(t)两个变量中,d的增加对于青海弧菌Q67发光强度影响更大,并且通过软件SPSS19.0进行回归拟合分析,发现青海弧菌Q67的相对发光值(RLV)与d和t的自然对数值呈现二元线性关系。最后,以0.2 Gy·min^(-1)的剂量率梯度为对象,测定了辐照后青海弧菌Q67光密度(OD600)的变化,发现经过不同短时间辐照后相对光密度(ROD)也受到抑制,说明辐照引起的青海弧菌Q67菌体的损伤和死亡是其发光强度抑制的重要原因。研究表明,青海弧菌Q67对于γ辐照有较好的敏感性,可以作为一种潜在的评价γ射线对生命体危害的生物材料。

鼻气管鸟杆菌生长曲线的测定

为了解鼻气管鸟杆菌(Ornithobacterium rhinotracheale,ORT)的生长规律,试验采用分光光度法测定鼻气管鸟杆菌不同生长时间的OD600nm值,并绘制鼻气管鸟杆菌生长曲线,再利用平板菌落计数法绘制生长曲线进一步验证,探究该菌在合适时间段内的吸光值OD600nm与平板菌落计数法测定的活菌数(cfu)的关系。结果显示:两种方法测定的生长曲线基本一致,2~16 h为对数生长期,16~20 h为稳定期,20 h以后进入衰亡期。对16 h鼻气管鸟杆菌吸光值与活菌数的关系进行探讨,成功建立回归方程:y=2.7591x-0.0897(R2=0.9973),为根据不同需要控制鼻气管鸟杆菌的生长提供了参考。

不同类型Zn胁迫对1株好氧反硝化细菌功能影响的比较研究

本文通过分析在不同浓度普通氧化锌(ZnO)、硫酸锌(ZnSO4)及纳米氧化锌(ZnO-NPs)胁迫下1株筛自胶州湾的好氧反硝化菌Zobellella sp.B307生长量和反硝化能力的变化,比较研究了不同类型Zn对该菌株生长及脱氮功能的影响。结果表明,ZnO-NPs对该菌株的生长有明显的持续抑制作用,显著降低其最大生长量,并对其脱氮功能产生持续抑制;ZnSO_(4)对菌株生长及脱氮功能前期抑制作用较强,后期抑制效应逐渐减弱;普通ZnO对菌株生长及脱氮功能并不产生显著影响。3种类型锌对该菌株的功能抑制表现为ZnO-NPs抑制作用最强,其次是ZnSO_(4),普通ZnO的抑制相对较弱,产生影响差异的主要原因与这三种类型Zn化合物作用机制的不同有关。研究结果可为深入探讨不同类型的Zn污染对近海沉积物氮素循环产生的潜在影响提供依据。