Sysmex UF5000尿沉渣分析仪建立RBC WBC CAST阳性cut off值及准确性评估

目的建立Sysmex UF5000尿沉渣分析仪检测尿液标本相关参数红细胞(RBC)、白细胞(WBC)、管型(CAST)的阳性cut off值,并评价其性能。方法选取1059例尿液标本在Sysmex UF5000尿沉渣分析仪上进行检测,并离心镜检。以镜检结果作为金标准,ROC曲线分析RBC、WBC、CAST的阳性cut off值,并计算其敏感性、特异性、符合率、假阳性率和假阴性率等。进一步分析假阳性标本的影响因素和部分假阴性标本。结果阳性cut off值:RBC>16/μL(男)或>15/μL(女);WBC>17/μL(男)或>30/μL(女);CAST>0.49/μL。相关的敏感性、特异性、符合率均较高。假阳性标本影响因素中RBC男性主要是结晶,女性以结晶、细菌为主;WBC女性以鳞状上皮细胞为主,男性未见明显的影响因素;CAST均以黏液丝和鳞状上皮细胞为主。假阴性率低于5%,其中仅有9例为肾脏、泌尿系统疾病标本,占比0.85%。结论本实验室设置的UF5000尿沉渣分析仪RBC、WBC、BACT阳性cut off值,相关的敏感性、特异性、假阴性率和符合率均符合ISO15189认可和实验室的日常工作需求。

血清过敏原特异性IgE酶联免疫吸附法检测CUT OFF值的建立

目的通过对酶联免疫吸附法检测血清中过敏原特异性IgE的干扰因素分析和判读方式优化,建立该实验室的CUT OFF值。方法采用酶联免疫吸附法过敏原特异性IgE检测试剂盒,对861例患者血清中过敏原特异性IgE进行定性检测;采用专用扫描分析软件判读结果并结合人工辅助判读,依据统计学方法建立该实验室的CUT OFF值。根据不同的判读方式结合试剂说明书提供的CUT OFF值,分别计算不同CUT OFF值条件下的假阴性率和假阳性率;比较两者之间有无差异。结果分析软件判读结果显示,蛋清、屋尘螨、屋尘和柏树的血清过敏原特异性IgE判读的CUT OFF值为0.29 IU/mL,各组之间差异无统计学意义(P>0.05)。鳕鱼、虾、牛肉、芒果、花生、苦艾和猫毛血清过敏原特异性IgE判读的CUT OFF值为0.21 IU/mL,各组之间差异无统计学意义(P>0.05)。牛奶和点青霉血清过敏原特异性IgE判读的CUT OFF值为0.25 IU/mL,各组之间差异无统计学意义(P>0.05)。结合人工辅助判读结果显示,屋尘螨、屋尘、苦艾和点青霉血清过敏原特异性IgE判读的CUT OFF值为0.27 IU/mL,各组之间差异无统计学意义(P>0.05)。鳕鱼、虾、牛肉、芒果、花生和猫毛血清过敏原特异性IgE判读的CUT OFF值为0.21 IU/mL,各组差异无统计学意义(P>0.05)。牛奶和蛋清血清过敏原特异性IgE判读的CUT OFF值为0.19 IU/mL,差异无统计学意义(P>0.05)。柏树血清过敏原特异性IgE抗体判读的CUT OFF值为0.33 IU/mL。结论各实验室应建立各自的血清过敏原特异性IgE CUT OFF值。采用人工辅助判读方式可以排除干扰因素,降低假阳性率和假阴性率,为临床提供准确可靠的结果。

乙型肝炎病毒表面抗原定性试验中临界值再确定的必要性与方法

目的探讨乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)定性试验中S/CO的分布规律、最低检测限、临界(cutoff)值再确定的必要性及其可行方法。方法以SPSS软件分析HBsAg的S/CO分布规律,用电化学发光仪E170鉴定待检标本的HBsAg,评价酶联免疫吸附试验试剂盒最低检测限,以常规条件下的变异(ROC)曲线对HBsAg的cut off值进行再确定。结果HBsAg阴性标本S/CO呈正偏态分布,阳性标本S/CO呈负偏态分布;科华HBsAg试剂盒的最低检测限约为8.0 COI;一步法时,由ROC曲线计算的cut off值为0.103,灵敏度与特异度分别为97.1%、100%,曲线下面积(AUC)为0.993(P<0.01);两步法计算的cut off值为0.218,灵敏度与特异度分别为97.8%、100%,AUC为0.996(P<0.01);两步法优于一步法,但两方法之间差异无统计学意义(P>0.05)。结论重新认识和确定HBsAg定性试验的S/CO分布规律、最低检测限、cut off值有利于提高检验质量。

ROC曲线对ELISA法检测HBsAg阳性判断值的确定及应用评价

目的 应用受试者工作特征（ROC）曲线对ELISA法定性检测乙型肝炎表面抗原（HBsAg）的cut-off值进行确定,并将确定结果应用于低水平HBsAg阳性标本进行综合评价.方法 采用酶联免疫吸附法（ELISA）检测1 021例乙型肝炎HBsAg血清学标志物,对从中筛选出的195例低水平HBsAg阳性标本进行化学发光微粒子免疫分析法定量,并对两种方法的结果进行评价.结果 195例HBsAg低水平阳性标本,经化学发光微粒子免疫分析法定量阳性190例（97.4%）,阴性1例（0.5%）,不确定4例（2.1%）.ROC曲线分析结果显示,当ELISA检测HBsAg的A值在0.11时,灵敏度和特异度的比例较为合适,特异度为97.1%,敏感度为98.6%,用0.11作cut-off值对195例低水平HBsAg阳性标本重新判读结果,与应用试剂盒本身根据公式计算的cut-off值判读结果进行比较结果差异无统计学意义.结论 ELISA实验目前广泛使用的根据公式计算cut-off值判读结果的方法是可行的,能够满足临床的基本需求.

乙型肝炎病毒表面抗原阳性判断值的探讨

目的探讨乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)定性试验中cut off值再确定的必要性及其可行方法。方法应用定值血清法,阴性对照均值法及ROC曲线法对乙型肝炎表面抗原cut off值进行了探讨。结果 ROC曲线法计算的cut off值为0.109,灵敏度与特异度分别为98.1%、96.0%,曲线下面积(AUC)为0.992;定值血清法计算的cut off值为0.169;阴性对照均值法计算的cut off值为0.101。结论重新认识和确定HBsAg定性试验的cut off值有利于提高其检验质量。

儿童地中海贫血复合缺铁性贫血表型及临床意义

目的了解地中海贫血(地贫)患儿合并缺铁性贫血(IDA)时血液学各指标的变化,为临床治疗和筛查提供理论依据。方法通过外周血细胞计数和毛细管电泳筛查确定可疑阳性患儿,采用反向点杂交(RDB)和跨越缺口PCR(Gap-PCR)方法确定初筛阳性患儿的基因突变类型。同时应用化学发光方法检查患儿的血清铁蛋白情况。利用统计学方法比较单纯地贫患儿与地贫复合IDA患儿以及单纯缺铁患儿在血液学各参数上的差异。结果静止型地贫或轻型地贫复合IDA后会加重地贫患儿的症状,中重度地贫患儿在其复合缺铁后血液学指标改变并不明显。结论应该关注地贫患儿的缺铁情况,达到有效预防,合理治疗目的。

四种结核抗原的诊断效能分析与建立结核抗原诊断效能的评价体系

目的通过对4种结核分枝杆菌抗原的诊断效能分析,初步建立其诊断效能评价体系,为结核病免疫学诊断筛选特异、有效抗原提供根据。方法采用酶联免疫吸附试验(ELISA)和受试者工作特征曲线法(Receiver Operating Characteristic,ROC)建立结核抗原诊断效能评价体系。然后,对4种重组结核抗原的诊断效能进行分析,得出各种抗原组合的检测阳性率,进而评价得出最佳的抗原组合方式。结果该结核抗原诊断效能的评价体系包括最佳ELISA反应体系、ROC曲线的建立、确定各种抗原最佳临界值(Cut-off value)、最佳抗原组合方式的确定。ELISA检测体系的中CFP10、38kDa、MPT64和Ag85B的最佳蛋白包被浓度分别为0.5μg/mL、2μg/mL、2μg/mL和1μg/mL,最佳血清稀释度分别为1∶250、1∶225、1∶225和1∶225;对这4种结核抗原及其不同组合的ELISA检测诊断效能进行了评价,以组合抗原的诊断效能较好,最佳组合为38kDa+CFP10+MPT64,阳性率为64.7%。结论成功建立了结核抗原诊断效能评价体系。结果显示ELISA检测中以多组分抗原组合为宜。

酶联免疫法(ELISA)对低浓度HBsAg的检测与评价

目的探讨酶联免疫法（ELISA）在低浓度HBs Ag检测中的效果。方法以本院2014年1~12月门诊与住院患者中53例采用科华ELISA法检测HBs Ag呈阳性且S/CO≤10的标本为研究对象,对所有标本采用HBs Ag确认试剂盒以及配套使用的ELISA法进行检测,比较检测结果。结果 53例科华ELISA检测HBs Ag阳性患者,经确认试剂盒及其配套ELISA法检测,阳性的45例（84.9%）,8例（15.1%）确认试验为阴性,并经科华试剂复测结果亦为阴性。结论对低浓度阳性标本进行HBs Ag ELISA法复检,并用中和试验去除假阳性结果,能够有效避免报告错误率,减少手术,输血及器官移植等安全隐患。

泪膜稳定性对FS-LASIK术后视觉质量的影响

分析泪膜稳定性对FS-LASIK术后视觉质量的影响。方法 从2021年3月-2022年3月的行FS-LASIK术的近视患者中随机抽取70例,按照是否存在干眼症分为A组(35例,无干眼症)和B组(35例,轻度干眼症),对比两组效果。结果 术后早期两组安全性和有效性均较好,均未丢失BCVA。术后1月A组安全指数、有效指数为(1.04±0.12)(1.03±0.11)和B组的安全指数、有效指数为(1.02±0.10)(1.04±0.13),组间对比(t=0.757、0.347,p=0.451、0.729);和术前相比两组术后1月、3月BUT明显降低(p<0.05),术后6月基本恢复到术前。B组BUT术前(6.23±1.92)s、术后1月(3.31±1.43)s、3月(4.23±1.75)s、6月(6.52±2.14)s低于A组的(9.68±2.34)s、(4.47±2.14)s、(5.78±2.13)s、(9.35±2.56)s(p<0.05),B组术后1年BUT(8.81±2.35)s低于A组(9.78±1.84)(t=0.919,p=0.361);B组OSI值术前(0.65±0.52)、术后1月(2.37±0.13)、3月(2.18±0.26)、6月(1.18±0.25)大于A组(0.43±0.26)、(2.03±0.34)、(1.52±0.84)、(0.74±0.08)(p<0.05),B组术后OSI值1年(0.68±0.32)低于A组(0.61±0.14)(t=1.185,p=0.239)。结论 行FS-LASIK术治疗后近视患者能获得理想的视觉质量,术前泪膜稳定性直接影响视觉质量术后客观动态变化。

母体血清中AFP、HCG联合超声、核磁共振对前置胎盘的预测

探讨母体血清中AFP、HCG联合超声、核磁共振检查对前置胎盘的预测,求出AFP、HCG预测前置胎盘的临界值(cut off值)。方法 收集2020年10月至2022年2月在北京怀柔医院进行产检并同时在北京怀柔医院进行了住院分娩孕妇中存在发生了前置胎盘高危因素并且符合上述情况的孕妇最终进行了以剖宫产终止妊娠的案例共计有86例。在此基础上,根据在手术过程中的实际情况将收集到的案例中的孕妇分为前置胎盘组和非前置胎盘组两个类别,在此两种类别的划分下,属于前置胎盘组的案例有32例,而属于非前置胎盘组的案例则有54例。计算出母体血清中AFP、HCG对前置胎盘预测的临界值,分析结局为前置胎盘的产科超声、胎盘部位核磁共振(孕周相近)的特点。结果 属于前置胎盘组的分类的孕妇中经检查其血清中AFP、HCG数值是要高于非胎盘植入组的孕妇的数值的,这一对比结果呈现出的差异是具有统计学意义的(即P<0.05);孕妇的血清中检测结果对于AFP这一指标的临界值为265.62U/ml,对于HCG这一指标的临界值为28550.2U/L,通过彩色超声多普勒检查,经腹、经会阴扫、经阴道等途径对孕妇的胎盘情况进行监测,以此观察孕妇体内的胎盘位置所在、胎盘的实质回声情况以及胎盘中的低回声带情况,同时要注意对孕妇的胎盘边缘与子宫颈内口之间的关系进行密切的观察,并观察是否可见异常血流信号。胎盘部位核磁共振检查,对胎盘部位组织进行常规的T1WI、T2WI、DWI平扫序列核磁共振扫描,评估胎盘异常信号、胎盘位置。结论 母体血清中AFP、HCG联合终止妊娠前超声、核磁共振检查对预测产前前置胎盘具有较高的临床价值。

结核分支杆菌特异性抗原重组蛋白MPT63检测系统的建立

目的建立规范的结核分枝杆菌（MTB）特异性抗原重组蛋白MPT63酶联免疫吸附试验（EHSA）检测系统。方法采用方阵法确定蛋白包被浓度和酶标二抗浓度，以ROC曲线法确定MPT63蛋白EHSA法检测的cut一0ff值。探讨规范的EHSA检测系统建立的方法。结果EUSA检测系统M蹦3蛋白包被浓度1：128000，酶浓度1：1000时为最佳；在cut—ofr值为0．35—0．40时检测MPT63蛋白抗体的灵敏度和特异性最为理想，分别是75．0％和78．6％。结论用方阵法确定蛋白包被浓度和酶标二抗浓度，并以ROC曲线法确立cut—ofr值是建立规范化的EMSA检测系统的关键环节。

参与评价抗人促红细胞生成素单克隆抗体参考品国际协作国内部分的研究

目的通过不同的检测平台和实验方法对9种抗人重组人促红细胞生成素(rh EPO)单克隆抗体的测试结果的比较,评价其在临床单纯红细胞再生障碍性贫血(pure red cell aplasia,PRCA)rh EPO免疫原性研究中应用的可行性。方法中国食品药品检定研究院(中检院)和沈阳三生制药有限责任公司(三生制药)采用直接ELISA评价待测参考品的结合性抗体性质,厦门特宝生物工程股份有限公司(特宝生物)采用间接ELISA评价待测参考品的结合性抗体性质;3家单位均采用EPO依赖细胞株UT7/EPO细胞的增殖抑制法评价待测参考品的中和性抗体性质。结果不同检测平台和检测技术均能对抗rh EPO单克隆抗体参考品的性质进行有效评价。结论多种检测平台和检测方法的应用,对rh EPO在临床研究和上市后的免疫原性评价或PRCA的监测具有重要意义。