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瑞马唑仑调节HIF-1α/BNIP3信号通路对OGD/R诱导神经细胞自噬和凋亡的影响
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作者 王效德 后晓超 +3 位作者 李青青 司玉婷 周小平 徐桂萍 《河北医药》 CAS 2024年第8期1138-1141,1146,共5页
目的探讨瑞马唑仑对OGD/R诱导的神经细胞自噬和凋亡的影响及作用机制。方法体外培养小鼠海马神经元细胞(HT22)并进行神经细胞氧糖剥夺/再复氧(OGD/R),筛选实验用瑞马唑仑浓度;将HT22细胞分为对照组、OGD/R组、瑞马唑仑组、2-ME2组、瑞... 目的探讨瑞马唑仑对OGD/R诱导的神经细胞自噬和凋亡的影响及作用机制。方法体外培养小鼠海马神经元细胞(HT22)并进行神经细胞氧糖剥夺/再复氧(OGD/R),筛选实验用瑞马唑仑浓度;将HT22细胞分为对照组、OGD/R组、瑞马唑仑组、2-ME2组、瑞马唑仑+2-ME2组;CCK8法检测5组HT22细胞活力;流式细胞术检测5组HT22细胞凋亡率;透射电子显微镜观察5组HT22细胞自噬小体的形成;Western blot检测5组HT22细胞HIF-1α、BNIP3、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ的表达。结果确定实验用瑞马唑仑浓度为50μg/mL;与对照组比较,OGD/R组HT22细胞OD450值、HIF-1α、BNIP3、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ蛋白水平下调,凋亡率上调(P<0.05);与OGD/R组比较,瑞马唑仑组HT22细胞自噬小体增加,OD450值、HIF-1α、BNIP3、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ蛋白水平上调,凋亡率下调(P<0.05);2-ME2组HT22细胞OD450值、HIF-1α、BNIP3、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ蛋白水平下调,凋亡率上调(P<0.05)。与瑞马唑仑组比较,瑞马唑仑+2-ME2组HT22细胞自噬小体数量减少,OD450值、HIF-1α、BNIP3、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ蛋白水平下调,凋亡率上调(P<0.05);与2-ME2组比较,瑞马唑仑+2-ME2组HT22细胞OD450值、HIF-1α、BNIP3、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ蛋白水平上调,凋亡率下调(P<0.05)。结论瑞马唑仑可通过激活HIF-1α/BNIP3信号通路促进OGD/R诱导的神经细胞自噬,抑制细胞凋亡,从而减轻OGD/R诱导的神经细胞损伤。 展开更多
关键词 瑞马唑仑 HIF-1α/BNIP3信号通路 ogd/R诱导的神经细胞 自噬 凋亡
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右美托咪定通过抑制RIPK/MLKL通路减轻OGD/R诱导的神经元坏死性凋亡
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作者 孙凯 《河南外科学杂志》 2024年第1期41-44,共4页
目的评价右美托咪定对氧糖剥夺/再灌注(OGD/R)诱导的HT22神经元细胞坏死性凋亡的影响。方法体外培养HT22小鼠海马神经元细胞,建立OGD/R模型。细胞分为对照组,OGD/R模型组,右美托咪定低、中、高浓度组(2.5、5、10μM)。采用CCK-8测定细... 目的评价右美托咪定对氧糖剥夺/再灌注(OGD/R)诱导的HT22神经元细胞坏死性凋亡的影响。方法体外培养HT22小鼠海马神经元细胞,建立OGD/R模型。细胞分为对照组,OGD/R模型组,右美托咪定低、中、高浓度组(2.5、5、10μM)。采用CCK-8测定细胞存活率,乳酸脱氢酶(LDH)试剂盒检测细胞上清LDH含量,流式细胞仪检测细胞凋亡,RT-qPCR和免疫印迹检测坏死性凋亡关键因子受体相互作用蛋白激酶1(RIPK1)和混合系列蛋白激酶样结构域(MLKL)的mRNA和蛋白表达水平。结果与对照组比较,OGD/R模型组细胞存活率显著降低(P<0.001),上清LDH含量和细胞凋亡率、RIPK1和MLKL的mRNA和蛋白表达水平均显著升高(P<0.01);与OGD/R模型组比较,右美托咪定5和10μM显著提高了细胞存活率,减少了LDH含量和凋亡率,下调RIPK1和MLKL的mRNA和蛋白表达水平(P均<0.01)。结论右美托咪定可减轻OGD/R诱导的神经元损伤,其机制可能与抑制RIPK1/MLKL通路介导的坏死性凋亡有关。 展开更多
关键词 右美托咪定 ogd/R HT22细胞 坏死性凋亡
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姜黄素调控KLF2表达对BV2细胞OGD模型中的作用及机制
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作者 魏建明 曹湘玉 +1 位作者 叶紫阳 杨霞 《医学理论与实践》 2024年第9期1441-1444,共4页
目的:研究姜黄素对氧糖剥夺(OGD)模型损伤神经元的保护作用并探讨其机制。方法:采用BV2细胞在OGD环境中培养2h模拟神经元缺血缺氧损伤,MTT法检测BV2小胶质细胞活力,Western blot法检测KLF2、p-NF-κB、NF-κB蛋白的表达水平;ELISA法检... 目的:研究姜黄素对氧糖剥夺(OGD)模型损伤神经元的保护作用并探讨其机制。方法:采用BV2细胞在OGD环境中培养2h模拟神经元缺血缺氧损伤,MTT法检测BV2小胶质细胞活力,Western blot法检测KLF2、p-NF-κB、NF-κB蛋白的表达水平;ELISA法检测炎症因子TNF-α、IL-1β的含量。结果:与Control组相比,OGD组BV2细胞活力显著降低,KLF2蛋白表达下降,p-NF-κB蛋白表达增高,炎症因子TNF-α、IL-1β水平增高(P<0.05);10μmol/L的姜黄素可显著增加OGD诱导的BV2细胞活力,上调KLF2蛋白表达,下调p-NF-κB的表达,降低炎症因子的水平(P<0.05)。而KLF2-si RNA显著逆转姜黄素对OGD诱导的BV2细胞上述保护作用(P<0.05)。结论:姜黄素上调KLF2的表达并降低促炎细胞因子TNF-α、IL-1β的水平,其机制可能通过抑制NF-κB信号通路来实现对神经元缺血缺氧损伤的神经保护作用。 展开更多
关键词 姜黄素 缺血性脑卒中 KLF2 NF-ΚB ogd
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小续命汤对OGD/R诱导HT22细胞损伤后突触可塑性的影响 被引量:1
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作者 王漫漫 兰瑞 +6 位作者 张勇 付雪琴 邹旭欢 王玮玮 李泓宇 唐琛 刘双 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期126-133,共8页
目的:探讨小续命汤(XXMD)对缺血性脑卒中后脑缺血再灌注损伤突触可塑性的影响。方法:体外建立小鼠海马神经元(HT22细胞)氧糖剥夺/复氧(OGD/R)模型,模拟脑缺血性脑卒中后海马神经元缺血再灌注损伤。采用CCK-8法检测HT22细胞活力,筛选XXM... 目的:探讨小续命汤(XXMD)对缺血性脑卒中后脑缺血再灌注损伤突触可塑性的影响。方法:体外建立小鼠海马神经元(HT22细胞)氧糖剥夺/复氧(OGD/R)模型,模拟脑缺血性脑卒中后海马神经元缺血再灌注损伤。采用CCK-8法检测HT22细胞活力,筛选XXMD最佳作用浓度。将HT22细胞随机分为对照组、OGD/R组和OGD/R+XXMD组,倒置荧光显微镜观察各组细胞形态变化,ELISA法测定细胞上清液中炎症因子IL-1β、IL-6和TNF-α水平,透射电镜观察细胞超微结构改变,免疫荧光染色检测神经元标志物Neu N及突触相关蛋白NF200和MAP2的荧光强度,Western blot检测各组细胞中NF200和MAP2蛋白表达水平。结果:XXMD在浓度为100 mg/L时细胞活力最强(P<0.05)。与对照组相比,模型组细胞变圆皱缩,线粒体呈现肿胀甚至空泡样改变,活力明显下降(P<0.05),IL-1β、IL-6和TNF-α含量升高(P<0.05),NF200和MAP2的荧光强度及蛋白表达水平显著降低(P<0.05)。而XXMD可改善细胞形态及超微结构,提升生存率(P<0.05),降低炎症因子水平(P<0.05)。免疫荧光染色及Western blot结果显示,与模型组相比,OGD/R+XXMD组可以增强NF200和MAP2平均荧光强度(P<0.05),提升蛋白表达水平(P<0.05)。结论:XXMD可以减轻OGD/R诱导的HT22细胞损伤,其机制可能涉及减轻炎症反应和增强突触可塑性。 展开更多
关键词 小续命汤 氧糖剥夺 HT22细胞 缺血性脑卒中 突触可塑性
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天麻蛋白对OGD/R诱导的HT22细胞损伤的保护作用及机制研究 被引量:2
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作者 杨丽萍 童英 +1 位作者 陈普 段小花 《世界科学技术-中医药现代化》 CSCD 北大核心 2023年第4期1367-1374,共8页
目的研究天麻蛋白对氧糖剥夺/复糖复氧(OGD/R)诱导的HT22细胞损伤的保护作用及机制。方法将体外HT22细胞常规培养,生长至对数生长期后铺板并随机分为对照组、OGD/R组、依达拉奉组、天麻蛋白组。以连二亚硫酸钠(Na_(2)S_(2)O_(4))10 mmol... 目的研究天麻蛋白对氧糖剥夺/复糖复氧(OGD/R)诱导的HT22细胞损伤的保护作用及机制。方法将体外HT22细胞常规培养,生长至对数生长期后铺板并随机分为对照组、OGD/R组、依达拉奉组、天麻蛋白组。以连二亚硫酸钠(Na_(2)S_(2)O_(4))10 mmol·L^(-1)合并无糖DMEM培养基造成氧糖剥夺培养2 h,继而恢复为无血清高糖DMEM培养2 h进行复糖复氧处理,以建立体外OGD/R模型。依达拉奉和天麻蛋白为自氧糖剥夺前24 h开始即加入相应药物终浓度,持续至复糖复氧结束。采用MTT法检测细胞存活率,乳酸脱氢酶(LDH)法测定LDH泄露率,试剂盒测定超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)活性,丙二醛(MDA)含量及活性氧(ROS)水平,流式细胞技术Annexin V-FITC/PI双染检测细胞凋亡,Western blot检测OGD/R诱导损伤的HT22细胞内Bcl-2、Bax、Caspase-9、Caspase-3、p-AMPK、AMPK、Nrf2、Nrf2入核、HIF-1α、VEGF蛋白表达水平变化。结果与对照组相比,OGD/R组细胞存活率下降(P<0.01),LDH泄露率升高(P<0.01),SOD、GSH-PX活性下降(P<0.01),MDA含量及ROS水平增加(P<0.01),细胞凋亡率增加(P<0.01),Bcl-2蛋白的表达量下降(P<0.01),Bax、Caspase-9、Caspase-3蛋白的表达量升高(P<0.01);与OGD/R组相比,天麻蛋白可提高细胞存活率(P<0.01),降低LDH泄露率(P<0.01),提高SOD活性及GSH-PX活性(P<0.01),降低MDA含量及ROS水平(P<0.01),降低细胞凋亡率(P<0.01),上调HT22细胞中Bcl-2、p-AMPK、Nrf2入核、HIF-1α、VEGF蛋白的表达量(P<0.01),有效抑制Bax、Caspase-9、Caspase-3蛋白的表达(P<0.01)。结论天麻蛋白对HT22细胞OGD/R损伤具有神经保护作用,其机制与活性氧/线粒体凋亡通路、AMPKNrf2通路和缺氧诱导因子通路相关蛋白密切相关。 展开更多
关键词 天麻蛋白 ogd/R HT22细胞 凋亡 神经保护
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青蒿琥酯调节PERK/ATF4/CHOP信号通路对OGD/R诱导的心肌细胞铁死亡的影响 被引量:2
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作者 洪莉莉 吴玲娟 何海刚 《微循环学杂志》 2023年第1期24-32,共9页
目的:探讨青蒿琥酯调节蛋白激酶R样内质网激酶(PERK)/激活转录因子-4(ATF4)/C/EBP同源蛋白(CHOP)信号通路对氧糖剥夺/复氧(OGD/R)诱导的心肌细胞铁死亡的影响。方法:体外培养大鼠心肌细胞H9c2构建OGD/R模型,通过CCK-8法检测0、1.0、2.5... 目的:探讨青蒿琥酯调节蛋白激酶R样内质网激酶(PERK)/激活转录因子-4(ATF4)/C/EBP同源蛋白(CHOP)信号通路对氧糖剥夺/复氧(OGD/R)诱导的心肌细胞铁死亡的影响。方法:体外培养大鼠心肌细胞H9c2构建OGD/R模型,通过CCK-8法检测0、1.0、2.5、5、10、20μmol/L青蒿琥酯处理24h后各组细胞活力,筛选合适的青蒿琥酯作用浓度。将体外培养H9c2细胞随机分为对照组、模型组、青蒿琥酯低剂量组、青蒿琥酯高剂量组、MK-28(PERK激活剂)组、青蒿琥酯高剂量+MK-28组,除对照组外的其余各组细胞构建OGD/R模型,然后马上使用青蒿琥酯和MK-28分组处理,采用CCK-8法和流式细胞术分别检测各组H9c2细胞活力和凋亡率;ELISA检测各组H9c2细胞培养基上清中心肌肌钙蛋白I(cTnI)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、肌红蛋白(MB)、炎性因子[前列腺素E2(PGE2)、环氧化酶-2(COX-2)、白细胞介素(IL)-1β]水平;化学荧光法检测活性氧(ROS)水平,微量法检测铁含量、丙二醛(MDA)水平,微板法检测谷胱甘肽(GSH)水平;免疫印迹实验检测各组H9c2细胞PERK/ATF4/CHOP通路相关蛋白表达。结果:与对照组比较,模型组细胞活力、GSH水平降低(P<0.05),凋亡率、细胞培养基上清中cTnI、CK-MB、MB、PGE2、COX-2及IL-1β水平、细胞ROS相对水平、铁含量、MDA水平、p-PERK/PERK及ATF4、CHOP蛋白表达升高(P<0.05)。与模型组比较,青蒿琥酯低剂量组、青蒿琥酯高剂量组细胞活力、GSH水平均升高(P<0.05),凋亡率、细胞培养基上清中cTnI、CK-MB、MB、PGE2、COX-2及IL-1β水平、细胞ROS相对水平、铁含量、MDA水平、p-PERK/PERK及ATF4、CHOP蛋白表达均降低(P<0.05);青蒿琥酯高剂量组细胞活力、GSH水平相较青蒿琥酯低剂量组进一步升高(P<0.05),凋亡率、细胞培养基上清中cTnI、CK-MB、MB、PGE2、COX-2及IL-1β水平、细胞ROS相对水平、铁含量、MDA水平、p-PERK/PERK及ATF4、CHOP蛋白表达较青蒿琥酯低剂量组进一步降低(P<0.05);MK-28组细胞活力、GSH水平降低(P<0.05),凋亡率、细胞培养基上清中cTnI、CK-MB、MB、PGE2、COX-2及IL-1β水平、细胞ROS相对水平、铁含量、MDA水平、p-PERK/PERK及ATF4、CHOP蛋白表达升高(P<0.05)。与青蒿琥酯高剂量组比较,青蒿琥酯高剂量+MK-28组细胞活力、GSH水平降低(P<0.05),凋亡率、细胞培养基上清中cTnI、CK-MB、MB、PGE2、COX-2及IL-1β水平、细胞ROS相对水平、铁含量、MDA水平、p-PERK/PERK及ATF4、CHOP蛋白表达升高(P<0.05)。结论:青蒿琥酯可通过抑制PERK/ATF4/CHOP信号激活而抑制OGD/R诱导的心肌细胞炎症、铁蓄积和脂质过氧化,减轻铁死亡,增强其细胞活力,缓解细胞损伤。 展开更多
关键词 青蒿琥酯 PERK/ATF4/CHOP ogd/R 心肌细胞 铁死亡
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Chromosome-level genome assembly of Salvia miltiorrhiza with orange roots uncovers the role of Sm2OGD3 in catalyzing 15,16-dehydrogenation of tanshinones
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作者 Xian Pan Yujie Chang +6 位作者 Caili Li Xiaoxiao Qiu Xinyun Cui Fanqi Meng Sixuan Zhang Xian’en Li Shanfa Lu 《Horticulture Research》 SCIE CSCD 2023年第6期30-42,共13页
Salvia miltiorrhiza is well known for its clinical practice in treating heart and cardiovascular diseases.Its roots,used for traditional Chinese medicine materials,are usually brick-red due to accumulation of red pigm... Salvia miltiorrhiza is well known for its clinical practice in treating heart and cardiovascular diseases.Its roots,used for traditional Chinese medicine materials,are usually brick-red due to accumulation of red pigments,such as tanshinone IIA and tanshinone I.Here we report a S.miltiorrhiza line(shh)with orange roots.Compared with the red roots of normal S.miltiorrhiza plants,the contents of tanshinones with a single bond at C-15,16 were increased,whereas those with a double bond at C-15,16 were significantly decreased in shh.We assembled a high-quality chromosome-level genome of shh.Phylogenomic analysis showed that the relationship between two S.miltiorrhiza lines with red roots was closer than the relationship with shh.It indicates that shh could not be the mutant of an extant S.miltiorrhiza line with red roots.Comparative genomic and transcriptomic analyses showed that a 1.0 kb DNA fragment was deleted in shh Sm2OGD3m.Complementation assay showed that overexpression of intact Sm2OGD3 in shh hairy roots recovered furan D-ring tanshinone accumulation.Consistently,in vitro protein assay showed that Sm2OGD3 catalyzed the conversion of cyptotanshinone,15,16-dihydrotanshinone I and 1,2,15,16-tetrahydrotanshinone I into tanshinone IIA,tanshinone I and 1,2-dihydrotanshinone I,respectively.Thus,Sm2OGD3 functions as tanshinone 15,16-dehydrogenase and is a key enzyme in tanshinone biosynthesis.The results provide novel insights into the metabolic network of medicinally important tanshinone compounds. 展开更多
关键词 ogd ROOTS ORANGE
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miR-22-3p靶向调控PLAGL2保护OGD/R诱导的心肌细胞损伤机制研究
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作者 陈玥璇 汪潞 柳华锋 《全科医学临床与教育》 2023年第9期784-789,共6页
目的探讨miR-22-3p在氧-糖剥夺/复氧(OGD/R)心肌细胞铁死亡中的作用及机制。方法大鼠心肌细胞系H9c2采用OGD/R处理以及转染miR-22-3p模拟物(miR-22-3p mimic)。细胞根据是否缺氧及有无转染分为常氧组、OGD/R组、OGD/R+miRNA模拟物阴性对... 目的探讨miR-22-3p在氧-糖剥夺/复氧(OGD/R)心肌细胞铁死亡中的作用及机制。方法大鼠心肌细胞系H9c2采用OGD/R处理以及转染miR-22-3p模拟物(miR-22-3p mimic)。细胞根据是否缺氧及有无转染分为常氧组、OGD/R组、OGD/R+miRNA模拟物阴性对照(miRNA-NC组)和OGD/R+miR-22-3p组。采用细胞计数(CCK-8)法检测细胞活力,酶联免疫吸附测定(ELISA)试剂盒检测H9c2细胞中铁死亡指标水平,Western blot检测谷胱甘肽过氧化物酶4(Gpx4)及多形性腺瘤基因样蛋白2(PLAGL2)蛋白表达,双荧光素酶报告实验验证miR-22-3p和PLAGL2靶向关系。结果OGD/R处理H9c2细胞后,第4天的吸光度值低于常氧组,活性氧(ROS)及丙二醛(MDA)水平、Fe^(2+)的积累明显高于常氧组,miR-22-3p水平明显低于常氧组(t分别=3.78、4.24、2.54、4.47、3.53,P均<0.05),H9c2细胞转染miR-22-3p mimic及OGD/R处理后,第3、4天的吸光度值高于miR-NC+OGD/R组(t分别=2.98、1.97、2.57、2.46,P均<0.05),细胞MDA、ROS、Fe^(2+)明显低于OGD/R+miR-NC组(t分别=2.62、5.35、4.11,P均<0.05),Gpx4表达水平高于OGD/R+miR-NC组。Fer-1和OGD/R处理H9c2细胞后,第3、4天的细胞吸光度值明显高于OGD/R组(t分别=3.12、3.36,P均<0.05),细胞MDA、ROS和Fe^(2+)水平显著低于OGD/R组(t分别=3.03、5.33、2.48,P均<0.05)。H9c2细胞转染miR-22-3p组的PLAGL2蛋白表达明显低于miR-NC组,且PLAGL2-WT+miR-22-3p组的荧光素酶活性明显低于PLAGL2-MUT+miR-22-3p组(t=2.69,P<0.05)。H9c2细胞共转染miR-22-3p mimic和PLAGL2过表达质粒后,Gpx4表达低于OGD/R+miR-22-3p组,吸光度值明显低于OGD/R+miR-22-3p组(t分别=3.91、3.12,P均<0.05),MDA、Fe^(2+)、ROS水平高于OGD/R+miR-22-3p组(t分别=3.78、3.87、3.05,P均<0.05)。结论miR-22-3p靶向调控PLAGL2表达抑制铁死亡,进而降低OGD/R诱导的心肌细胞损伤。 展开更多
关键词 miR-22-3p PLAGL2 ogd/R 心肌细胞 铁死亡
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萝卜硫素通过Keap1/Nrf2通路缓解OGD/R诱导的星形胶质细胞氧化应激 被引量:1
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作者 宋伟龙 郝广志 董玉书 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 2023年第2期221-225,共5页
目的:研究萝卜硫素(SFA)对糖氧剥夺/再灌注(OGD/R)大鼠星形胶质细胞氧化应激的影响。方法:将新生大鼠脑组织中分离培养的星形胶质细胞分为3组,分别是对照组(control)、OGD/R处理组、OGD/R和SFA联合处理组(OGD/R+SFA),利用低氧培养箱及无... 目的:研究萝卜硫素(SFA)对糖氧剥夺/再灌注(OGD/R)大鼠星形胶质细胞氧化应激的影响。方法:将新生大鼠脑组织中分离培养的星形胶质细胞分为3组,分别是对照组(control)、OGD/R处理组、OGD/R和SFA联合处理组(OGD/R+SFA),利用低氧培养箱及无糖DMEM培养基制备OGD/R细胞模型,OGD/R+SFA组细胞在制备OGD/R的同时给予终浓度为50μmol/L的SFA处理,用商品化试剂盒分别检测细胞活性和丙二醛(MDA)的含量,利用Western Blot检测大鼠细胞中核因子E2相关因子2(Nrf2)的核转位及血红素加氧酶-1(HO-1)和醌氧化还原酶1(NQO1)的表达。结果:SFA能够显著增加OGD/R诱导的星形胶质细胞活力(P<0.05),减少MDA的含量,同时促进Nrf2转位到细胞核并促进靶分子HO-1和NQO1表达(P<0.05)。结论:SFA通过激活星形胶质细胞中Keap1/Nrf2信号通路减轻OGD/R诱导的细胞损伤。 展开更多
关键词 萝卜硫素 糖氧剥夺/再灌注 氧化应激 Keap1/Nrf2信号通路 血红素加氧酶-1 醌氧化还原酶1 星形胶质细胞
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肌肽通过激活Nrf2/ARE信号通路改善OGD/R诱导星形胶质细胞损伤
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作者 于露 罗杰斯 +4 位作者 任毅 赵艳 杨文强 杨新霞 杨菁 《中国临床解剖学杂志》 CSCD 北大核心 2023年第3期310-317,323,共9页
目的探讨肌肽对缺糖缺氧/复糖复氧(OGD/R)引起星形胶质细胞(astrocyte,AS)损伤的保护作用,并阐明其机制。方法分离新生24 h SD大鼠大脑皮质,培养并纯化AS后,随机分为对照组、模型组、OGD/R+肌肽组(1、3、9 mmol/L)。倒置显微镜观察细胞... 目的探讨肌肽对缺糖缺氧/复糖复氧(OGD/R)引起星形胶质细胞(astrocyte,AS)损伤的保护作用,并阐明其机制。方法分离新生24 h SD大鼠大脑皮质,培养并纯化AS后,随机分为对照组、模型组、OGD/R+肌肽组(1、3、9 mmol/L)。倒置显微镜观察细胞形态;免疫荧光GFAP染色法测定细胞纯度;噻唑蓝(MTT)法检测细胞存活率;比色法检测乳酸脱氢酶(LDH)的漏出率;Hoechst 33258染色法检测细胞凋亡;流式细胞仪检测细胞内活性氧(ROS)含量;免疫荧光检测Phospho-Nrf2(S40)的入核水平;Western blotting法检测Nrf2总蛋白以及Phospho-Nrf2(S40)蛋白表达;qPCR法检测HO-1、NQO1 mRNA含量。结果与对照组相比,模型组细胞活力明显降低(P<0.01),LDH漏出及细胞凋亡率显著增加(P<0.01),细胞内ROS生成明显增加(P<0.01),AS核内Phospho-Nrf2(S40)含量及其下游产物HO-1、NQO1 mRNA表达量下调(P<0.01)。与模型组相比,OGD/R+肌肽组(1、3、9 mmol/L)细胞活力明显升高(P<0.01),LDH漏出及细胞凋亡率降低(P<0.01),细胞内ROS生成不同程度减低(P<0.01),AS核内Phospho-Nrf2(S40)含量及其下游产物HO-1、NQO1 mRNA表达量上调(P<0.01)。结论肌肽可通过抑制OGD/R诱导ROS释放,激活Nrf2-ARE通路,进而增强其下游抗氧化酶HO-1、NQO1 mRNA的表达,对AS发挥保护作用。 展开更多
关键词 肌肽 缺糖缺氧/复糖复氧 星形胶质细胞 氧化应激 NRF2
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大鼠大脑皮质神经细胞氧糖剥夺再复氧(OGD/R)后自噬对凋亡的抑制作用 被引量:4
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作者 张磊 李阳 +5 位作者 胡玉奇 许晖 朱超 王旭 赵冬 贺昕 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第7期590-597,共8页
目的 观察大脑皮质神经元氧糖剥夺再复氧(OGD/R)后自噬对凋亡的影响。方法 取18只出生在24 h内的新生SD大鼠,采用机械分离胰蛋白酶消化法提取大脑皮质神经元培养7 d后,建立OGD/R模型,随机分为3组,正常对照组、OGD/R组、OGD/R联合巴弗洛... 目的 观察大脑皮质神经元氧糖剥夺再复氧(OGD/R)后自噬对凋亡的影响。方法 取18只出生在24 h内的新生SD大鼠,采用机械分离胰蛋白酶消化法提取大脑皮质神经元培养7 d后,建立OGD/R模型,随机分为3组,正常对照组、OGD/R组、OGD/R联合巴弗洛霉素A1(BafA1)组。采用CCK-8法和乳酸脱氢酶(LDH)实验检测细胞活力,用异硫氰酸荧光素标记的膜联素Ⅴ/碘化丙啶(annexinⅤ-FITC/PI)双标记结合流式细胞术检测细胞凋亡,采用反转录PCR法检测微管相关蛋白1轻链3(LC3)、 P62及胱天蛋白酶3(caspase-3)的mRNA表达,Western blot法检测LC3、 P62及caspase-3的蛋白表达。采用红色荧光蛋白-绿色荧光蛋白-LC3(RFP-GFP-LC3)腺病毒转染神经细胞检测自噬荧光强度,透射电子显微镜观察自噬体的超微结构变化。结果 与对照组相比,OGD/R组神经细胞活力明显降低,LDH释放水平明显升高,凋亡增加;LC3、 P62、 caspase-3的mRNA和蛋白表达增强;RFP荧光强度增加,自噬体增加且自噬溶酶体更加聚集,加用自噬晚期抑制剂BafA1后RFP荧光强度显著降低。结论 OGD/R诱导了神经元细胞的自噬和凋亡,抑制自噬后加重了神经细胞的损伤和凋亡。 展开更多
关键词 皮质神经元细胞 氧糖剥夺再复氧(ogd/R) 细胞凋亡 自噬 巴弗洛霉素A1(BafA1)
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器官型脑片培养OGD复氧复糖模型中丁苯酞对于bcl-2/bax、及bim蛋白的调节作用 被引量:4
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作者 董梅 程树彬 +4 位作者 郭彦芳 李钊 李世平 张祥建 李春岩 《中风与神经疾病杂志》 CAS 北大核心 2017年第1期16-20,共5页
目的观察正丁基苯酞(NBP)对乳大鼠大脑皮质器官型脑片的氧糖剥夺模型(OGD)中细胞凋亡bcl-2、bax及bim蛋白的调节作用。方法用生后7 d的SD乳大鼠制备大脑皮质运动区器官型脑片,将培养2 w的脑片随机分为对照组(C组)、模型组(M组)、溶剂对... 目的观察正丁基苯酞(NBP)对乳大鼠大脑皮质器官型脑片的氧糖剥夺模型(OGD)中细胞凋亡bcl-2、bax及bim蛋白的调节作用。方法用生后7 d的SD乳大鼠制备大脑皮质运动区器官型脑片,将培养2 w的脑片随机分为对照组(C组)、模型组(M组)、溶剂对照组(Sc组)和实验组(T组),T组在OGD干预30 min后给予NBP 10μM。将脑片制备OGD模型30 min,部分脑片在NBP干预前后不同时间点(0 h、1 h、24 h、72 h)进行PI染色;部分脑片在NBP干预后6 h用戊二醛固定,做石蜡切片,行HE染色及bcl-2、bax、bim免疫组化染色。结果 PI染色可见C组在不同时间点荧光强度无明显变化,M组、Sc组和T组荧光强度均随时间有不同程度增强,M组和Sc组各时间点荧光强度无明显差异,T组荧光强度较前两者降低,随时间延长,降低幅度增大,尤其是72 h时间点。HE染色C组可见皮质运动区特有的大锥体细胞,结构清晰,M组和T组可见细胞肿胀,细胞核溶解,M组相对明显。免疫组化染色可见在3种染色中M组和T组阳性细胞数均较C组增多,其中bcl-2染色中T组阳性细胞增多更明显,bax和bim染色中M组阳性细胞增多更明显,3种染色中C、M、T各组之间差异均有统计学意义。结论NBP对OGD后的细胞损伤具有保护作用,可能是通过对bcl-2、bax以及bim蛋白的调节减少细胞凋亡。 展开更多
关键词 器官型脑片 ogd 丁苯酞 细胞凋亡 bcl-2 BAX bim
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黄芪甲苷基于PI3K/Akt/Bcl-2信号通路对PC12细胞OGD/R损伤的保护机制研究 被引量:2
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作者 张佳琳 李元元 +4 位作者 杨文亮 刘富甲 田子夏 谢欣梅 庞晓斌 《神经药理学报》 2017年第5期1-8,共8页
目的:探究黄芪甲苷(astragaloside Ⅳ,AS-Ⅳ)对大鼠嗜铬细胞瘤(pheochromocytoma 12,PC12)细胞缺氧缺糖复供(oxygen deprivation reoxygenation,OGD/R)损伤的保护作用及基于磷脂酰肌醇3激酶(phosphatidylinositol 3 kinase,PI3K)/蛋白激... 目的:探究黄芪甲苷(astragaloside Ⅳ,AS-Ⅳ)对大鼠嗜铬细胞瘤(pheochromocytoma 12,PC12)细胞缺氧缺糖复供(oxygen deprivation reoxygenation,OGD/R)损伤的保护作用及基于磷脂酰肌醇3激酶(phosphatidylinositol 3 kinase,PI3K)/蛋白激酶B(protein kinase B,PKB,又称Akt)及B 细胞淋巴瘤-2 蛋白(B-cell lymphoma-2,Bcl-2) PI3K/Akt/Bcl-2 信号通路的机制研究。方法:体外培养 PC12 细胞,细胞随机分为空白对照组、模型组(OGD/R),尼莫地平阳性对照组(5 μmol·L^-1)和黄芪甲苷组(1.00、0.10、0.01 μmol·L^-1),除空白组外其余各组均建立体外PC12细胞OGD/R模型。CCK-8试剂盒法检测PC12 细胞存活率;乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)试剂盒法测定乳酸脱氢酶的漏出量;采用Hoechst33342和碘化丙啶(propidium iodide,PI)双染法检测各组细胞凋亡与坏死情况;Western blot检测各组细胞Akt、p-Akt、Bcl-2、Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2 associated X protein,Bax)和含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-3(cysteinyl aspartate specific proteinase-3,Caspase-3)的蛋白表达情况。结果:黄芪甲苷提高PC12 细胞OGD/R 损伤的细胞存活率,降低LDH 漏出量和细胞凋亡。黄芪甲苷浓度依赖性上调p-Akt/Akt、Bcl-2的蛋白表达和下调促凋亡蛋白Bax、Caspase-3的表达。PI3K/Akt通路的抑制剂LY2940002 能抑制黄芪甲苷对OGD/R损伤的PC12细胞中凋亡相关蛋白的影响。结论:黄芪甲苷对OGD/R损伤的PC12细胞具有保护作用,且其保护作用机制可能与PI3K/Akt/Bcl-2信号通路有关。 展开更多
关键词 黄芪甲苷 PC12 ogd/R PI3K/Akt/Bcl-2信号通路 神经保护
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OGD模型乳小鼠的星状胶质细胞内miR-31对共培养神经元氧化应激损伤的影响 被引量:1
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作者 李洁 车玉琴 《中国血液流变学杂志》 CAS 2020年第3期269-278,372,封2,共12页
目的探究氧-糖剥夺(OGD)模型乳小鼠的星状胶质细胞内miR-31调控PKD1基因表达,进而抑制JAK-STAT3信号通路活化介导的OGD共培养神经元炎症反应以及氧化应激损伤的保护机制.方法提取乳小鼠原代星状胶质细胞和神经元,流式细胞仪分选纯化,之... 目的探究氧-糖剥夺(OGD)模型乳小鼠的星状胶质细胞内miR-31调控PKD1基因表达,进而抑制JAK-STAT3信号通路活化介导的OGD共培养神经元炎症反应以及氧化应激损伤的保护机制.方法提取乳小鼠原代星状胶质细胞和神经元,流式细胞仪分选纯化,之后将星状胶质细胞分别转染miR-31 mimic、miR-31 inhibitor、si-PKD1或加入JAK-STAT3通路抑制剂;构建OGD模型将转染后的星状胶质细胞与神经元共培养,并分为七组:normal组,blank OGD组,NC OGD组,miR-31 mimic OGD组,miR-31 inhibitor OGD组,si-PKD1 OGD组,si-PKD1+CdCl_(2)OGD组.MTT法检测OGD共培养体系中神经元存活率;LDH漏出率测定OGD共培养体系中神经元细胞损伤;TUNEL法检测OGD共培养体系中神经元凋亡;免疫荧光法检测OGD共培养体系中氧化应激损伤相关蛋白4-HNE和8-OHdG表达;TBA法检测OGD共培养体系中MDA含量;黄嘌呤氧化酶法检测OGD共培养体系中SOD含量;ELISA检测OGD共培养体系中炎症因子;qRT-PCR检测OGD共培养体系中miR-31和PKD1的表达;Western blot检测OGD共培养体系中PKD1及JAK-STAT3通路相关蛋白表达.结果OGD模型乳小鼠星状胶质细胞miR-31调控炎症反应结果显示:与blank组和NC组相比,miR-31 mimic组炎症因子IL-1β、IL-6、TNF-α的表达量显著降低(均P<0.05),miR-31 inhibitor组炎症因子IL-1β、IL-6、TNF-α的表达量显著上升(均P<0.05).与blank组和NC组相比,miR-31 mimic组神经元存活率上升,LDH漏出率、ROS表达量显著降低(均P<0.05),miR-31 inhibitor组神经元存活率显著降低,LDH漏出率和ROS表达量显著升高(均P<0.05);OGD模型乳小鼠星状胶质细胞miR-31调控对神经元的活性的影响结果显示:与单独培养(Neuron组)相比,共培养条件下神经元(Neuron+astrocytes)的增殖及存活率、LDH表达及凋亡率差异均无统计学意义(均P>0.05);与神经元组(Neuron组)相比,神经元OGD模型组(Neuron OGD组)细胞增殖及存活率减少,培养液中LDH表达增加,细胞凋亡率增加(均P<0.05);与神经元OGD模型(Neuron OGD组)相比,神经元+星状胶质细胞OGD组(Neuron+astrocytes OGD)细胞存活率减少,培养液中LDH表达增加,细胞凋亡率增加(均P<0.05);OGD模型乳小鼠星状胶质细胞miR-31调控PKD1各组细胞中mRNA、蛋白表达水平及炎症因子表达结果显示:相比于normal组,blank OGD组的星状胶质细胞中miR-31的表达量下降(P<0.05),而PKD1表达和p-STAT3/STAT3显著上升(P<0.05),炎症因子IL-1β、IL-6、TNF-α表达量上调(P<0.05);相比于blank OGD组,miR-31 mimic OGD组星状胶质细胞中miR-31的表达量上调(P<0.05),而PKD1表达和p-STAT3/STAT3显著降低(P<0.05),炎症因子IL-1β、IL-6、TNF-α表达量下调(P<0.05);miR-31 inhibitor OGD组miR-31的表达量下降(P<0.05),而PKD1表达和p-STAT3/STAT3显著上升(均P<0.05),炎症因子IL-1β、IL-6、TNF-α表达量上调(P<0.05);si-PKD1 OGD组和si-PKD1+CdCl_(2)OGD组miR-31的表达量无显著变化(P>0.05),而PKD1表达和p-STAT3/STAT3显著降低(均P<0.05),炎症因子IL-1β、IL-6、TNF-α表达量下调(P<0.05);NC OGD组各指标差异无统计学意义(均P>0.05);OGD模型乳小鼠星状胶质细胞miR-31调控PKD1基因抑制OGD导致的神经元氧化应激损伤结果显示:相比于normal组,blank OGD组LDH和MDA表达量上升,SOD表达下降,神经元膜脂质过氧化损伤标志蛋白4-HNE和DNA氧化损伤标志蛋白8-OHdG免疫染色强度增强,神经元存活率降低,神经元出现氧化应激损伤(均P<0.05);与blank OGD组相比,miR-31 inhibitor OGD组LDH漏出量和MDA表达量上升,SOD表达下降,神经元膜脂质过氧化损伤标志蛋白4-HNE和DNA氧化损伤标志蛋白8-OHdG免疫染色强度增强,神经元存活率降低,细胞凋亡率上升,神经元氧化应激损伤加重(均P<0.05);miR-31 mimic OGD组、si-PKD1 OGD组和si-PKD1+CdCl_(2)OGD组LDH漏出量和MDA表达量下降,SOD表达上升,神经元膜脂质过氧化损伤标志蛋白4-HNE和DNA氧化损伤标志蛋白8-OHdG免疫染色强度降低,神经元存活率增加,细胞凋亡率下降,神经元氧化应激损伤减缓(均P<0.05);NC OGD组各指标差异无统计学意义(均P>0.05);采用TUNEL染色及Western blot检测OGD共培养体系中神经元凋亡结果显示:相比于normal组,blank OGD组神经元细胞凋亡率及凋亡相关蛋白cleaved caspase-3、Bax表达显著增加(均P<0.05);与blank OGD组相比,miR-31 inhibitor OGD组神经元细胞凋亡率及cleaved caspase-3、Bax表达明显上升(均P<0.05);miR-31 mimic OGD组、si-PKD1 OGD组和si-PKD1+CdCl_(2)OGD组神经元细胞凋亡率及cleaved caspase-3、Bax表达明显下调(均P<0.05);NC OGD组各cleaved caspase-3、Bax表达差异无统计学意义(均P>0.05).结论OGD模型乳小鼠星状胶质细胞内miR-31靶向下调PKD1基因,进而通过抑制JAK/STAT3信号通路降低炎症反应,从而减轻OGD神经元氧化应激损伤. 展开更多
关键词 miR-31 PKD1 JAK/STAT3信号通路 星状胶质细胞 ogd神经元 炎症反应 氧化应激
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灯盏花素对大鼠脑微血管内皮细胞OGD损伤的保护作用及机制研究 被引量:13
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作者 李钊飞 曹小雨 +2 位作者 陈琼芳 王钢 杨秀芬 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期295-296,共2页
灯盏花素(breviscapine,Bre)是从短亭飞蓬中提取的黄酮类化合物,具有保护缺血性脑血管疾病、调节血管内皮功能、减轻炎性反应等作用本实验通过分离培养大鼠脑微血管内皮细胞(BMECs),建立氧糖剥夺(OGD)BMECs模型,研究Bre对BMECs损... 灯盏花素(breviscapine,Bre)是从短亭飞蓬中提取的黄酮类化合物,具有保护缺血性脑血管疾病、调节血管内皮功能、减轻炎性反应等作用本实验通过分离培养大鼠脑微血管内皮细胞(BMECs),建立氧糖剥夺(OGD)BMECs模型,研究Bre对BMECs损伤是否具有保护作用,并探讨其可能的机制。相关研究尚未见报道。 展开更多
关键词 灯盏花素 大鼠 脑微血管内皮细胞 ogd 保护作用 机制
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cPKCγ在HPC抗N2a细胞OGD损伤中作用及其分子机制 被引量:2
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作者 罗宏 苏吉儿 +1 位作者 韩松 李俊发 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2013年第3期308-313,共6页
目的在离体细胞水平,探讨经典型蛋白激酶Cγ(cPKCγ)在低氧预适应(HPC)对抗小鼠成神经瘤细胞(N2a)氧糖剥夺(OGD)损伤中作用及其可能的细胞分子机制。方法建立N2a细胞HPC和OGD模型,用3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐(MTT)比... 目的在离体细胞水平,探讨经典型蛋白激酶Cγ(cPKCγ)在低氧预适应(HPC)对抗小鼠成神经瘤细胞(N2a)氧糖剥夺(OGD)损伤中作用及其可能的细胞分子机制。方法建立N2a细胞HPC和OGD模型,用3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐(MTT)比色法、乳酸脱氢酶(LDH)漏出率、原位末端标记(TUNEL)和蛋白印迹(Western blot)几种方法,分别检测N2a细胞损伤、坏死、凋亡和自噬水平。结果 OGD 2和4 h可使N2a细胞的生存率显著降低、死亡率明显增高(P<0.05,n=6);HPC(20 min)明显改善OGD 3 h对N2a细胞的损伤作用,而cPKCγ抑制剂Go6983(6 nmol/L)则显著解除HPC对OGD细胞的保护作用(P<0.05,n=16);OGD 3 h明显增加N2a细胞的凋亡数目(P<0.05,n=6),但HPC和Go6983+HPC均不能明显影响OGD细胞凋亡水平;OGD 3 h显著提高N2a细胞的自噬水平,Go6983和HPC+Go6983均可明显降低OGD细胞的自噬水平(P<0.05,n=6),而HPC则对OGD细胞的自噬水平无明显影响;HPC明显改善OGD 3 h致N2a细胞坏死的程度,而Go6983则可解除HPC的保护作用(P<0.05,n=16)。结论在离体细胞水平证实了cPKCγ在HPC改善N2a细胞OGD损伤中的作用,且这种作用主要与降低OGD细胞的坏死水平有关。 展开更多
关键词 低氧预适应(HPC) 氧糖剥夺(ogd) 细胞凋亡 细胞自噬 细胞坏死
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新生大鼠海马脑片OGD模型中HO-1对NGB的影响
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作者 朱洁 张敏 贺曦 《中国急救医学》 CAS CSCD 北大核心 2017年第s2期177-178,共2页
目的 观察HO对脑红蛋白(HGB)的影响,探索NGB的调控机制.方法 体外培养新生SD大鼠海马脑片,用HO-1促进剂Hemin和抑制剂Znpp干预后建立OGD模型.用HE、尼氏染色和免疫组化法观察OGD模型中神经元和星形胶质细胞的状态及HO-1和NGB表达的变化... 目的 观察HO对脑红蛋白(HGB)的影响,探索NGB的调控机制.方法 体外培养新生SD大鼠海马脑片,用HO-1促进剂Hemin和抑制剂Znpp干预后建立OGD模型.用HE、尼氏染色和免疫组化法观察OGD模型中神经元和星形胶质细胞的状态及HO-1和NGB表达的变化.结果 ①加入Hemin后,HE及尼氏染色示,神经元和星形胶质细胞与正常培养的海马脑片比较变化不大,仅有轻微的水肿.免疫组化示,HO-1和NGB的表达均增加.②加入Znpp后,HE及尼氏染色示,神经元和星形胶质细胞结构模糊,存在广泛水肿、变性、坏死.免疫组化示,HO-1和NGB的表达下降.结论 HO-1和NGB呈同步变化,提示两者可能存在相关性.NGB对神经元和星形胶质细胞具有保护作用. 展开更多
关键词 NGB HO-1 ogd HEMIN ZNPP
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nNOS参与OGD介导的促神经干细胞增殖效应 被引量:1
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作者 钱晓丹 罗春霞 朱东亚 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2014年第10期1099-1106,共8页
目的:体外研究脑缺血促神经发生的机制。方法:体外培养神经干细胞(neural stem cells,NSCs)与海马神经元,并采用氧糖剥夺模型(oxygen and glucose deprivation,OGD)模拟在体缺血,通过RT-PCR、Western blot、免疫细胞化学、酶活性测定、... 目的:体外研究脑缺血促神经发生的机制。方法:体外培养神经干细胞(neural stem cells,NSCs)与海马神经元,并采用氧糖剥夺模型(oxygen and glucose deprivation,OGD)模拟在体缺血,通过RT-PCR、Western blot、免疫细胞化学、酶活性测定、亚硝酸盐/硝酸盐(nitrite/nitrate,NOx)含量测定等多种方法研究神经干细胞的生物学行为以及介导这种效应的分子机制。结果:(1)OGD通过直接和间接(神经元)作用增加神经干细胞中BrdU+细胞比例。(2)OGD上调神经干细胞中神经元型一氧化氮合酶(neuronal nitric oxide synthase,nNOS)并下调神经元中nNOS,且都有利于神经干细胞增殖。(3)采用nNOS基因敲除小鼠来源的神经干细胞以及神经元(用于共培养)进行实验,发现OGD并不能升高神经干细胞中BrdU+细胞比例。结论:神经干细胞和神经元中nNOS水平变化共同参与了OGD诱导的促神经干细胞增殖效应。 展开更多
关键词 神经元型一氧化氮合酶 神经干细胞 氧糖剥夺 增殖
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丹参酮通过调控巨噬细胞分化保护OGD/R诱导的心肌细胞凋亡的作用 被引量:2
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作者 徐梦婷 杨乐 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第8期665-672,共8页
目的探讨丹参酮通过调控巨噬细胞分化保护OGD/R诱导的心肌细胞凋亡及相关机制。方法选用THP-1单核细胞株经佛波醇12-十四酸酯13-乙酸酯(PMA)诱导为贴壁的巨噬细胞后,分为丹参酮低剂量组(1μg/ml)、丹参酮中剂量组(2μg/ml)和丹参酮高剂... 目的探讨丹参酮通过调控巨噬细胞分化保护OGD/R诱导的心肌细胞凋亡及相关机制。方法选用THP-1单核细胞株经佛波醇12-十四酸酯13-乙酸酯(PMA)诱导为贴壁的巨噬细胞后,分为丹参酮低剂量组(1μg/ml)、丹参酮中剂量组(2μg/ml)和丹参酮高剂量组(4μg/ml),荧光定量PCR检测M1型和M2型巨噬细胞活化相关基因表达。采用巨噬细胞和心肌细胞共培养的方式探索巨噬细胞的分化对OGD/R诱导的心肌细胞凋亡的影响,Tunel染色检测心肌细胞凋亡情况,Western blot检测心肌细胞凋亡相关蛋白Bax、Bcl2和Caspase3表达以及NF-κB信号通路相关蛋白p-IKB、IKB、p-P65和P65表达。使用NF-κB信号通路激动剂探索巨噬细胞的分化对OGD/R诱导的心肌细胞凋亡影响的相关机制,进行上述相同的检测。结果丹参酮低、中和高剂量都可抑制M1型巨噬细胞分化相关基因表达,促进M2型巨噬细胞分化相关基因(P<0.05),其中丹参酮中剂量效果最佳(P<0.01)。相关机制研究发现,丹参酮可通过调控巨噬细胞分化过程抑制OGD/R诱导的心肌细胞凋亡(P<0.05)以及凋亡相关蛋白Bax/Bcl2和Cleaved-caspase3/Caspase3表达(P<0.05)。相关信号通路研究发现,M2型巨噬细胞活化相关因子主要通过影响NF-κB信号通路相关蛋白p-IKB和p-P65的表达抑制OGD/R诱导的心肌细胞凋亡(P<0.05)。使用NF-κB信号通路激动剂研究结果显示,激活NF-κB信号通路能够阻碍丹参酮通过调控巨噬细胞分化抑制OGD/R诱导的心肌细胞凋亡过程。结论丹参酮通过调控巨噬细胞分化,影响NF-κB信号通路,进而抑制OGD/R诱导的心肌细胞凋亡。 展开更多
关键词 丹参酮 M1/M2巨噬细胞 NF-ΚB信号通路 ogd/R诱导的心肌细胞凋亡
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赶黄草活性部位对OGD/R致星形胶质细胞损伤的保护作用及其机制研究 被引量:1
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作者 刘量 赵之琛 +2 位作者 骆鑫 胡琛 严鑫 《扬州大学学报(农业与生命科学版)》 CAS 北大核心 2020年第6期78-83,共6页
为探究赶黄草活性部位EPC对OGD/R致星形胶质细胞损伤的保护作用及其初步机制,利用MTT法检测EPC对正常培养和OGD/R后星形胶质细胞活力的影响;Western blot法检测OGD/R损伤的星形胶质细胞内Nrf2、HO-1、ERK1/2、p-ERK1/2、p38、p-p38、JNK... 为探究赶黄草活性部位EPC对OGD/R致星形胶质细胞损伤的保护作用及其初步机制,利用MTT法检测EPC对正常培养和OGD/R后星形胶质细胞活力的影响;Western blot法检测OGD/R损伤的星形胶质细胞内Nrf2、HO-1、ERK1/2、p-ERK1/2、p38、p-p38、JNK1/2和p-JNK1/2蛋白表达水平。结果表明:与空白对照组相比,不同浓度EPC对正常培养的星形胶质细胞均无细胞毒性,且80μg·mL-1 EPC可显著提高星形胶质细胞的活力;同时,与空白对照组相比,OGD/R组细胞中Nrf2、HO-1、p-ERK1/2、p-p38和p-JNK1/2蛋白表达水平显著升高;而与OGD/R组相比,10和20μg·mL-1 EPC可进一步上调Nrf2与HO-1蛋白表达水平,下调p-ERK1/2、p-p38和p-JNK1/2蛋白表达水平,对ERK1/2、p38和JNK1/2蛋白表达水平无影响。这提示EPC对OGD/R致星形胶质细胞损伤具有保护作用,其可能是通过抑制MAPK信号通路进而激活Nrf2/HO-1信号通路来实现的。 展开更多
关键词 赶黄草 ogd/R 星形胶质细胞 保护作用 作用机制
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