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产酶溶杆菌OH11菌株几丁质酶基因的克隆与表达
被引量:
7
1
作者
朱慧
王云霞
+1 位作者
胡白石
刘凤权
《南京农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第1期47-50,共4页
利用PCR方法从产酶溶杆菌OH11菌株中克隆到编码几丁质酶的chiA基因。同源性比较发现,其推测产物与产酶溶杆菌C3菌株和N4-7菌株的ChiA有97%以上的序列一致性。基因经NdeⅠ和XhoⅠ双酶切后连接到含T7启动子的高表达载体pET21a(+)上构建重...
利用PCR方法从产酶溶杆菌OH11菌株中克隆到编码几丁质酶的chiA基因。同源性比较发现,其推测产物与产酶溶杆菌C3菌株和N4-7菌株的ChiA有97%以上的序列一致性。基因经NdeⅠ和XhoⅠ双酶切后连接到含T7启动子的高表达载体pET21a(+)上构建重组质粒pChiA,并转化宿主菌BL21(AI)产生BLChiA表达菌株。经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导后发现,BLChiA菌株产生相对分子质量约为75×103的蛋白质。生物活性试验表明,该蛋白能水解几丁质,在几丁质培养基上产生一透明的水解圈,并对立枯丝核菌菌丝的生长有抑制作用。因此该蛋白具有一定的生物防治作用。
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关键词
产酶溶杆
菌
oh11菌株
chiA基因
克隆
表达
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职称材料
产酶溶杆菌OH11菌株摇瓶发酵条件研究
被引量:
5
2
作者
王云霞
钱国良
+1 位作者
胡白石
刘凤权
《中国生物防治》
CSCD
北大核心
2008年第3期267-271,共5页
采用单因素试验法研究了温度和转速等因子对产酶溶杆菌OH11液体发酵的影响。结果表明温度以30℃为宜,转速以210r/min为宜。通过正交试验在摇瓶中以LB为基础培养基对发酵培养基进行了优化。优化后的培养基中活菌数在48h时可达到4.5×...
采用单因素试验法研究了温度和转速等因子对产酶溶杆菌OH11液体发酵的影响。结果表明温度以30℃为宜,转速以210r/min为宜。通过正交试验在摇瓶中以LB为基础培养基对发酵培养基进行了优化。优化后的培养基中活菌数在48h时可达到4.5×109cfu/ml,明显高于原基础培养基的结果;通过正交试验对其他发酵条件的优化结果表明,装液量40ml/250ml、发酵时间72h、接种量108cfu/ml和初始pH值7.5为最适条件。
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关键词
产酶溶杆
菌
oh11菌株
发酵
培养基优化
正交试验
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职称材料
产酶溶杆菌OH11菌株β-1,3-葡聚糖酶基因的克隆与表达
被引量:
3
3
作者
朱慧
王云霞
+1 位作者
胡白石
刘凤权
《江苏农业学报》
CSCD
北大核心
2008年第2期136-141,共6页
利用PCR方法从OH11菌株中克隆到β-1,3-葡聚糖酶基因,通过同源性比较发现其推测产物与产酶溶杆菌C3菌株和N4-7菌株的β-1,3-葡聚糖酶有90%以上的同源性。该基因经NdeⅠ、XhoⅡ或HindⅢ酶切后连接到含T7启动子的高表达载体pET21a(+)和载...
利用PCR方法从OH11菌株中克隆到β-1,3-葡聚糖酶基因,通过同源性比较发现其推测产物与产酶溶杆菌C3菌株和N4-7菌株的β-1,3-葡聚糖酶有90%以上的同源性。该基因经NdeⅠ、XhoⅡ或HindⅢ酶切后连接到含T7启动子的高表达载体pET21a(+)和载体pET30a(+)上构建重组质粒,并分别转化宿主菌BL21(AI)和BL21(DE3)产生表达菌株。表达菌株BLGluA和BLGluC经IPTG诱导后分别产生相对分子量约为29 000(GluA蛋白)和44 000(GluC蛋白)的蛋白。酶活性和抑菌活性测定结果表明,GluA蛋白和GluC蛋白能将海带多糖水解,在海带多糖培养基上产生透明的水解圈,并对立枯丝核菌菌丝的生长有抑制作用,具有一定的生物防治作用。
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关键词
产酶溶杆
菌
oh11菌株
β-1
3-葡聚糖酶基因
克隆
表达
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职称材料
产酶溶杆菌OH11菌株α-水解蛋白酶基因的克隆与表达
被引量:
4
4
作者
朱慧
王云霞
+1 位作者
胡白石
刘凤权
《中国生物防治》
CSCD
北大核心
2007年第4期358-362,共5页
α-水解蛋白酶是产酶溶杆菌OH11菌株分泌的一种胞外丝氨酸蛋白酶。利用PCR方法从OH11菌株中克隆到该基因。同源性比较其推测产物与产酶溶杆菌ATCC29478菌株和ATCC29487菌株的α-水解蛋白酶有90%以上的序列一致性。基因经NdeⅠ和XhoⅠ双...
α-水解蛋白酶是产酶溶杆菌OH11菌株分泌的一种胞外丝氨酸蛋白酶。利用PCR方法从OH11菌株中克隆到该基因。同源性比较其推测产物与产酶溶杆菌ATCC29478菌株和ATCC29487菌株的α-水解蛋白酶有90%以上的序列一致性。基因经NdeⅠ和XhoⅠ双酶切后连接到含T7启动子的高表达载体pET30a(+)上构建重组质粒pαLP,并转化宿主菌BL21(DE3)获得BLαLP表达菌株。经IPTG诱导后发现BLαLP菌株产生一相对分子量约为44kD的蛋白。研究表明,该蛋白能将蛋白质水解,在脱脂奶粉培养基上形成水解圈,并对立枯丝核菌菌丝的生长有抑制作用。
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关键词
产酶溶杆
菌
oh11菌株
α-水解蛋白酶基因
克隆与表达
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职称材料
题名
产酶溶杆菌OH11菌株几丁质酶基因的克隆与表达
被引量:
7
1
作者
朱慧
王云霞
胡白石
刘凤权
机构
南京农业大学农业部病虫监测与治理重点开放实验室/植物保护学院
出处
《南京农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第1期47-50,共4页
基金
国家863计划项目(2006AA10A211)
重大基础研究前期研究专项项目(2005CCA02800)
文摘
利用PCR方法从产酶溶杆菌OH11菌株中克隆到编码几丁质酶的chiA基因。同源性比较发现,其推测产物与产酶溶杆菌C3菌株和N4-7菌株的ChiA有97%以上的序列一致性。基因经NdeⅠ和XhoⅠ双酶切后连接到含T7启动子的高表达载体pET21a(+)上构建重组质粒pChiA,并转化宿主菌BL21(AI)产生BLChiA表达菌株。经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导后发现,BLChiA菌株产生相对分子质量约为75×103的蛋白质。生物活性试验表明,该蛋白能水解几丁质,在几丁质培养基上产生一透明的水解圈,并对立枯丝核菌菌丝的生长有抑制作用。因此该蛋白具有一定的生物防治作用。
关键词
产酶溶杆
菌
oh11菌株
chiA基因
克隆
表达
Keywords
Lysobacter enzymogenes strain
oh
11
chiA gene
cloning
expression
分类号
S432.42 [农业科学—植物病理学]
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职称材料
题名
产酶溶杆菌OH11菌株摇瓶发酵条件研究
被引量:
5
2
作者
王云霞
钱国良
胡白石
刘凤权
机构
南京农业大学植物保护学院/农业部病虫监测与治理重点实验室
出处
《中国生物防治》
CSCD
北大核心
2008年第3期267-271,共5页
基金
国家"863"计划(2006AA10A211)
重大基础研究前期研究专项(2005CCA02800)
文摘
采用单因素试验法研究了温度和转速等因子对产酶溶杆菌OH11液体发酵的影响。结果表明温度以30℃为宜,转速以210r/min为宜。通过正交试验在摇瓶中以LB为基础培养基对发酵培养基进行了优化。优化后的培养基中活菌数在48h时可达到4.5×109cfu/ml,明显高于原基础培养基的结果;通过正交试验对其他发酵条件的优化结果表明,装液量40ml/250ml、发酵时间72h、接种量108cfu/ml和初始pH值7.5为最适条件。
关键词
产酶溶杆
菌
oh11菌株
发酵
培养基优化
正交试验
Keywords
Lysobacter enzymogenes
oh
11
rmentation
dium optimization
rthogonal erperiment
分类号
S476.3 [农业科学—农业昆虫与害虫防治]
Q965 [生物学—昆虫学]
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职称材料
题名
产酶溶杆菌OH11菌株β-1,3-葡聚糖酶基因的克隆与表达
被引量:
3
3
作者
朱慧
王云霞
胡白石
刘凤权
机构
南京农业大学植物保护学院农业部病虫监测与治理重点开放实验室
出处
《江苏农业学报》
CSCD
北大核心
2008年第2期136-141,共6页
基金
国家"863"计划项目(2006AA10A211)
重大基础研究前期研究专项(2005CCA02800)
文摘
利用PCR方法从OH11菌株中克隆到β-1,3-葡聚糖酶基因,通过同源性比较发现其推测产物与产酶溶杆菌C3菌株和N4-7菌株的β-1,3-葡聚糖酶有90%以上的同源性。该基因经NdeⅠ、XhoⅡ或HindⅢ酶切后连接到含T7启动子的高表达载体pET21a(+)和载体pET30a(+)上构建重组质粒,并分别转化宿主菌BL21(AI)和BL21(DE3)产生表达菌株。表达菌株BLGluA和BLGluC经IPTG诱导后分别产生相对分子量约为29 000(GluA蛋白)和44 000(GluC蛋白)的蛋白。酶活性和抑菌活性测定结果表明,GluA蛋白和GluC蛋白能将海带多糖水解,在海带多糖培养基上产生透明的水解圈,并对立枯丝核菌菌丝的生长有抑制作用,具有一定的生物防治作用。
关键词
产酶溶杆
菌
oh11菌株
β-1
3-葡聚糖酶基因
克隆
表达
Keywords
Lysobacter enzymogenes strain
oh
11
β-1,3-glucanase gene
cloning
expression
分类号
Q785 [生物学—分子生物学]
下载PDF
职称材料
题名
产酶溶杆菌OH11菌株α-水解蛋白酶基因的克隆与表达
被引量:
4
4
作者
朱慧
王云霞
胡白石
刘凤权
机构
南京农业大学植物保护学院/农业部病虫检测与治理重点开放实验室
出处
《中国生物防治》
CSCD
北大核心
2007年第4期358-362,共5页
基金
国家863计划课题(2006AA10A211)
文摘
α-水解蛋白酶是产酶溶杆菌OH11菌株分泌的一种胞外丝氨酸蛋白酶。利用PCR方法从OH11菌株中克隆到该基因。同源性比较其推测产物与产酶溶杆菌ATCC29478菌株和ATCC29487菌株的α-水解蛋白酶有90%以上的序列一致性。基因经NdeⅠ和XhoⅠ双酶切后连接到含T7启动子的高表达载体pET30a(+)上构建重组质粒pαLP,并转化宿主菌BL21(DE3)获得BLαLP表达菌株。经IPTG诱导后发现BLαLP菌株产生一相对分子量约为44kD的蛋白。研究表明,该蛋白能将蛋白质水解,在脱脂奶粉培养基上形成水解圈,并对立枯丝核菌菌丝的生长有抑制作用。
关键词
产酶溶杆
菌
oh11菌株
α-水解蛋白酶基因
克隆与表达
Keywords
Lysobacter enzymogenes strain
oh
11
α-lyric protease gene
cloning and expression
分类号
Q939.1 [生物学—微生物学]
Q78 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
产酶溶杆菌OH11菌株几丁质酶基因的克隆与表达
朱慧
王云霞
胡白石
刘凤权
《南京农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2008
7
下载PDF
职称材料
2
产酶溶杆菌OH11菌株摇瓶发酵条件研究
王云霞
钱国良
胡白石
刘凤权
《中国生物防治》
CSCD
北大核心
2008
5
下载PDF
职称材料
3
产酶溶杆菌OH11菌株β-1,3-葡聚糖酶基因的克隆与表达
朱慧
王云霞
胡白石
刘凤权
《江苏农业学报》
CSCD
北大核心
2008
3
下载PDF
职称材料
4
产酶溶杆菌OH11菌株α-水解蛋白酶基因的克隆与表达
朱慧
王云霞
胡白石
刘凤权
《中国生物防治》
CSCD
北大核心
2007
4
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职称材料
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