Ohmefentanyl stereoisomers induce changes of CREB phosphorylation in hippocampus of mice in conditioned place preference paradigm

The present study was designed to determine the changes of phosphorylation of cAMP- response ele-ment binding protein (CREB) in hippocampus induced by ohmefentanyl stereoisomers (F9202 and F9204)in conditioned place preference (CPP) paradigm. The results showed that mice receiving F9202 and F9204displayed obvious CPP. They could all significantly stimulate CREB phosphorylation and maintained for along time without affecting total CREB protein levels. The effect of F9204 was similar to morphine whicheffect was more potent and longer than F9202. We also examined the effects of ketamine, a noncompetitiveN-mthyl-D-aspartate receptor (NR) antagonist, on morphine-, F9202- and F9204- induced CPP and phos-phorylation of CREB in hippocampus. Ketamine could suppress not only the place preference but also thephosphorylation of CREB produced by morphine, F9202 and F9204. These findings suggest that alterationsin the phosphorylation of CREB be relevant to opiates signaling and the development of opiates dependence.NR antagonists may interfere with opiates dependence and may have potential therapeutic implications.

Enantiomers of Ohmefentanyl and Its Analgesic Activity

Since the existence of multiple opioid receptors was first proposed by Martin,this concept was subsequently substantiated by the pharmacological tests and receptor binding assays.Now three subclasses of opioid receptor have gained

三种精神依赖性评价方法的比较及应用

药物的精神依赖性是评价一个药物滥用潜力的重要指标。目前，评价药物精神依赖性潜力的方法主要有３种：自身给药实验方法、药物辨别实验方法和位置偏爱实验方法。本实验运用这３种方法对羟甲苯太尼和盐酸二氢埃托啡的精神依赖性进行了系统的评价，结果表明羟甲芬太尼和盐酸二氢埃托啡的精神依赖性潜力分别为吗啡的１０００多倍和近万倍。这也证明强效的阿片类镇痛药的精神依赖性主要是由阿片μ受体介导的。对实验结果的相关性进行的比较表明３种行为药理学模型评价的结果具相关性。为其在药物精神依赖性评价方面的广泛应用提供了有力的依据。

二氢埃托啡,羟甲芬太尼和依托尼秦对小鼠免疫功能的影响

二氢埃托啡,羟甲芬太尼和依托尼秦等高效麻醉镇痛剂慢性给药能降低小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能,使小鼠淋巴细胞转化和抗体形成能力下降,抑制白介素1和白介素2的产生,但这些抑制作用均较等剂量的吗啡为弱。

麻醉剂量羟甲芬太尼对大鼠血浆皮质酮、皮质醇和抗利尿激素含量的影响

麻醉剂量羟甲芬太尼对大鼠血浆皮质酮、皮质醇和抗利尿激素含量的影响金昔陆金文桥周德和李桂芬池志强（中国科学院上海药物研究所，上海２０００３１）羟甲芬太尼（ｏｈｍｅｆｅｎｔａｎｙｌ，ＯＭＦ）是我室研制的芬太尼（ｆｅｎｔａｎｙｌ，ＦＥＮ）衍生物，从受体水...

阿片样μ受体与低氧及高二氧化碳通气反应

本文利用强效高选择性阿片样μ受体激动剂－羟甲芬太尼研究阿片样μ受体对家兔低氧和高二氧化碳通气反应的调节及参与部位。实验在麻醉兔上进行。股静脉注射羟甲芬太尼对低氧通气反应无影响，对高二氧化碳通气反应有明显的抑制作用。股静脉注射纳洛酮使高二氧化碳通气反应增强。巨细胞旁核及孤束核处微量注射纳洛酮均可部分反转羟甲芬太尼对高二氧化碳通气反应的抑制作用。结果表明：阿片样μ受体并不影响低氧通气反应，但抑制高二氧化碳通气反应。

麻醉剂量羟甲芬太尼对大鼠脑内单胺递质及其代谢物含量的影响

麻醉剂量羟甲芬太尼对大鼠脑内单胺递质及其代谢物含量的影响金昔陆１唐琴梅金文桥周德和李桂芬池志强（中国科学院上海药物研究所，上海２０００３１）羟甲芬太尼（ｏｈｍｅｆｅｎｔａｎｙｌ，ＯＭＦ）是一种新的高选择性高亲和力μ阿片受体激动剂，在动物中能产生麻醉作...

羟甲芬太尼对幼年大鼠学习和记忆的影响

本文用Ｓｐｒａｑｕｅ－Ｄａｗｌｅｙ大鼠为实验动物，从生后一日龄起每日皮下分别注射一次羟甲芬太尼（ｏｈｍｅｆｅｎｔａｎｙｌ，ＯＭＦ）（０．１，０．５，１．０，５μｇ／１００ｇｂ．ｗ），对照组注射等量的生理盐水。连续注射１４天，观察１６日龄幼鼠的吸乳迷津分辨学习（ＡＤＬ）、３０日龄幼鼠的Ｙ迷津明暗分辨学习（ＢＤＬ）行为与４５日龄幼鼠不同脑区蛋白质含量的变化。结果如下：（１）各组剂量的ＯＭＦ都能显著抑制幼鼠的ＡＤＬ学习能力；（２）低、中等剂量（０．１，０．５，１．０μｇ／１００ｇｂ．ｗ）的ＯＭＦ能显著抑制幼鼠的ＢＤＬ学习能力；（３）各组剂量的ＯＭＦ使海马的蛋白质含量显著降低。实验结果提示在生后脑发育过程中，阿片肽能影响幼鼠的学习行为，其原因可能与海马蛋白质含量变化有关。

羟甲芬太尼立体异构体的晶体结构

对强效镇痛剂羟甲芬太尼的两个光学异构体体ｃｉｓ－（３Ｒ，４Ｓ，２′Ｒ）－羟甲芬太尼（Ｉ）和ｔｒａｎｓ－（３Ｒ，４Ｒ，２′Ｓ）－羟甲芬太尼（Ⅱ）进行了Ｘ－射线衍射晶体结构分析。两个异构体均有一个ｓｐ３Ｎ（ｌ）原子和一个ｓｐ２Ｎ（７）原子。哌啶环呈椅式构象，顺式异构体Ｉ的３－甲基处于直立键，４－Ｎ－苯基丙酰胺基处于平伏键；反式异构体ＩＩ的３－甲基与４－Ｎ－苯基丙酰胺基均处于平伏键。在Ｉ分子中，Ｃ（４）原子与４－丙酰胺基组成的平面与Ｎ－苯环平面近似相互垂直，而在ＩＩ中，两平面的二面角近似为１００℃。两异构体分子中均存在分子内氢键Ｏ（１）一Ｈ…Ｎ（１），反式异构体ＩＩ还存在分子间氢键Ｏ（１）一Ｈ（Ａ）…Ｏ（２）（Ｂ）。

胆囊收缩素受体拮抗剂加强大鼠的吗啡镇痛和羟甲芬太尼镇痛

已知大鼠脊髓蛛网膜下腔(i.t.)注射CCK-8能拮抗阿片μ受体介导的镇痛作用。本文给大鼠i.t.注射高选择性CCK-A受体拮抗剂devazepide和CCK-B受体拮抗剂L-365260阻断内源性释放的CCK-8,观察对阿片镇痛的影响。i.t.注射100ng devazepide或2.5ng L-365260可显著地增强吗啡镇痛(4mg/kg,sc),两者的剂量效应曲线均为钟形曲线;i.t.注射66ng devazepide或1.25ng L-365260也能显著地增强羟甲芬太尼(专一的阿片μ受体激动剂,OMF)的镇痛作用(32ng,i.t.),剂量效应曲线亦为钟形曲线。这两种CCK受体拮抗剂本身对病阈无影响。 以上结果表明,脊髓内有内源性CCK-8发挥对抗阿片镇痛作用;鉴于devazepide剂量大于L-365260剂量40-50倍,提示CCK-8在脊髓的抗阿片镇痛功能是通过CCK-B受体实现的。

CCK－8可对抗μ－阿片受体介导的对大鼠背根节神经元钙通道的抑制效应

ＣＣＫ－８在脊髓水平可对抗μ－阿片受体介导的抗伤害性作用，但其作用位，点及机制尚不清楚。本实验以急性分离的大鼠背根节（ＤＲＧ）神经元为标本，用全细胞膜片钳（ｗｈｏｌｅ－ｃｅｌｌｐａｔｃｈ－ｃｌａｍｐ）方法记录钙通道电流，观察分析特异性μ－受体激动剂羟甲芬太尼（ＯＭＦ）对电压依赖性钙通道电流的作用，以及在同一细胞上ＣＣＫ－８对此作用的影响。结果显示ＯＭＦ可明显抑制钙通道电流，其抑制作用可被μ－受体拮抗剂纳络酮或ＣＣＫ－８所翻转，而ＣＣＫ－８的作用又可被ＣＣＫ－Ｂ受体拮抗剂Ｌ３６５，２６０所对抗。结果提示：ＣＣＫ－８可在同一细胞上经ＣＣＫ－Ｂ受体对抗阿片效应。ＣＣＫ－８本身对钙通道电流并无增强效应，相反它可引起抑制作用。关于ＣＣＫ－８如何对抗μ－受体介导的机制有待进一步研究。

纳曲酮与纳洛酮对吗啡，依托尼秦及羟甲芬太尼的拮抗作用比较

在整体和受体水平对阿片受体拮抗剂纳曲酮和纳洛酮对吗啡，依托尼秦和［３Ｈ］羟甲芬太尼的拮抗作用进行了比较．研究表明，在整体水平，纳曲酮在很小剂量下就能对抗吗啡在小鼠的镇痛作用，小鼠吗啡急性中毒以及依托尼秦致大鼠翻正反射消失．与纳洛酮相比，纳曲酮强效，长效，ｉｇ有效．受体水平纳曲酮抑制［３Ｈ］羟甲芬太尼与大鼠脑阿片受体结合的强度是纳洛酮的３．６倍，与整体水平实验结果一致。

羟甲芬太尼对慢性缺氧大鼠呼吸功能的影响

目的 :探讨 μ阿片受体激动剂羟甲芬太尼 (OMF)对慢性缺氧大鼠呼吸功能的影响。 方法 :将 86只雄性 SD大鼠随机分为正常组和慢性缺氧组 ,慢性缺氧模型由经尾静脉 6次注射木瓜蛋白酶而建立。正常组大鼠侧脑室微量注射 OMF(n=1 0 )和同体积人工脑脊液 (a CSF) (n=1 0 )。慢性缺氧组大鼠又随机分为 :(1 )侧脑室组 ,分别微量注射阿片受体拮抗剂纳络酮(NL X) (n=1 2 )和 OMF(n=1 2 ) ,同时另有两组均注射 a CSF(n=1 2 )作为对照 ;(2 )孤束核组 ,分别微量注射 OMF(n=9)和同体积 a CSF(n=9)。在注射后 5、1 5、30、4 5、6 0 min测定各组大鼠呼吸频率 (RR)和潮气量 (VT)。 结果 :正常大鼠侧脑室注射OMF后 1 5、30、4 5、6 0 min,RR、VT 均显著下降 (P<0 .0 5 ) ;慢性缺氧大鼠侧脑室及孤束核注射 OMF后 1 5、30、4 5、6 0 m in,RR、VT 均显著降低 (P<0 .0 1 ) ,侧脑室注射 NL X后 1 5、30、4 5、6 0 m in,RR、VT均显著增高 (P<0 .0 5 )。结论 :μ阿片受体激动剂可能通过中枢相应受体降低 RR、VT 等呼吸指标 。

HPLC和~1HNMR分析确定cis-A-和cis-B-羟甲芬太尼的组成和构型

羟甲芬太尼（１）是一个强效的镇痛剂和高亲和、高选择性的阿片μ受体激动剂。通过ＨＰＬＣ和１ＨＮＭＲ分析，ｃｉｓ－Ａ－ｌ被确定为由等量的ｃｉｓ－（＋）－（３Ｒ，４Ｓ，２＇Ｓ）－ｌ和：ｃｉｓ－（—）－（３Ｓ，４Ｒ，２＇Ｒ）－１组成的外消旋体，ｃｉｓ－Ｂ－ｌ被确定为由等量的ｃｉｓ－（—）－（３Ｒ，４Ｓ，２＇Ｒ）－１和ｃｉｓ－（＋）－（３Ｓ，４Ｒ，２＇Ｓ）－１组成的外消旋体。

(±)-反式-1-苄基-3-甲基-4-苯胺基哌啶的合成

采用金属钠还原Ｎ苄基３甲基４苯亚胺基哌啶，大大提高了反式产物的比例；将其制成草酸盐后，采用分步结晶的方法对（±）顺，反１苄基３甲基４苯胺基哌啶的混合物进行分离．

高效镇痛剂羟甲芬太尼药效构象的系统分析

本文用合理简化的系统搜索方法研究了柔性化合物羟甲芬太尼的构象性质，使用分子力学ＭＭＰ２程序，以（３Ｒ，４Ｓ，２０Ｒ）－羟甲芬太尼的Ｘ－射线晶体参数作为起始结构，通过能量优化得到该化合物的六个最低能量构象；在此基础上进一步研究了活性最高异构体（３Ｒ，４Ｓ，２０Ｓ）－羟甲芬太尼的低能构象。对比二者的低能构象推测出羟甲芬太尼两个可能的活性构象，（３Ｒ，４Ｓ，２０Ｒ）－羟甲芬太尼晶体中呈现的构象可能并不是该化合物的活性构象。依据所推测的活性构象和药效基团，可进一步设计新化合物分子，以提高药物的药效强度和选择性，

新的高强度高选择性阿片μ受体激动剂[11C]—羟甲芬太尼的合成

羟甲芬太尼（Ｉ）是一个新的高强度高选择性阿片μ受体激动剂。本文用ｃｉｓ－Ａ－Ｎ－［１－（２－羟基－２－苯乙基）－３－甲基－４－哌啶基］－苯胺（ＩＩ）或ｃｉｓ－Ｎ－［１－（苯甲酰甲基）－３－甲基－４－哌啶基］－苯胺（ＩＩＩ）作为前体合成了［１１Ｃ］－羟甲芬太尼，以便用正电子发射断层扫描（ＰＥＴ）来观察μ受体。通过水解ｃｉｓ－Ａ－羟甲芬太尼（Ｉ）和ｃｉｓ－Ｎ－［１－（苯甲酰甲基）－３－甲基－４－哌啶］－Ｎ－苯基丙酰胺（ｃｉｓ－ＩＶ）的４－Ｎ－丙酰基分别获得ＩＩ和ＩＩＩ。溴乙烷的格氏试剂与回旋加速器产生的［１１Ｃ］－二氧化碳反应后继而直接加入邻苯二甲酸二酰氯和２，６－二叔丁基吡啶生成同位素标记中间体［１１Ｃ］－丙酰氯。［１１Ｃ］－丙酰氯与ＯＨ－前体（ＩＩ）反应后再经ＨＰＬＣ分离纯化直接得［１１Ｃ］－羟甲芬太尼；［１１Ｃ］－丙酰氯与酮－前体（ＩＩＩ）反应后，再用硼氢化钠甲醇溶液处理，然后进行ＨＰＬＣ分离纯化得［１１Ｃ］－羟甲芬太尼。两种方法均可获得ｌｌ．１～１４．８ＧＢｑ／μｍｏｌ的特异性放射化学纯［１１Ｃ］－羟甲芬太尼。总共耗时为４０～５０ｍｉｎ（ＥＯＢ）。

根据受体结构进行药物设计研究

计算机辅助药物设计可区分为直接和间接药物设计方法。如果受体蛋白的三维结构已经阐明 ,便可根据与配体的作用位点而设计相应新药结构 ;如果受体的三维结构尚不知 ,则从与受体相作用的一系列配体以推测受体的作用位点。本文介绍本实验室应用这类方法试行设计新药的研究。

OMF 对大鼠疑核呼吸相关单位电活动的影响

本工作观察了微电泳给予 OMF 对大鼠延髓疑核呼吸相关单位自发放电活动的影响。在96个单位中,呈现抑制效应的48个,兴奋效应的14个,先兴奋后抑制的14个,先抑制后兴奋的9个,其余11个单位无明显变化。在15个 OMF 产生抑制效应的单位中,有11个单位的抑制效应能被纳洛酮对抗。在6个 OMF 产生兴奋效应的单位中,有5个单位的兴奋效应能被纳洛酮对抗。在13个 OMF 引起抑制效应的单位中,有9个单位的抑制效应能被微电泳给予的 U-50488对抗。OMF 产生抑制效应持续的时间明显长于兴奋效应持续的时间。结果提示介导 OMF 抑制效应的阿片受体亚型可能不同于介导兴奋效应的阿片受体亚型。

毛细管区带电泳分析阿片受体和抗独特型抗羟甲芬太尼抗体

应用毛细管区带电泳（ＣＺＥ）分析测定阿片受体、抗独特型抗羟甲芬太尼抗体等生物大分子样品。熔融石英毛细管柱为６０ｃｍ×１００μｍｉ．ｄ．（从进样到检测器长度为５０ｃｍ），以硼砂－氢氧化钾为缓冲液。结果表明缓冲液的ｐＨ影响ＣＺＥ对阿片受体的分析，当ｐＨ为９．０时分析效果最理想，重现性良好，测得的两个主峰与同批样品进行ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析得到的两个条带相符。用ＣＺＥ分析抗独特型抗羟甲芬太尼抗体（ＩｇＧ），表明用ＰｒＯｔｅｉｎＡ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ亲和色谱分离得到部分纯化的ＩｇＧ，迁移时间不同于对照豚鼠的ＩｇＧ。