细菌外膜囊泡(OMV)研究进展

外膜囊泡(outer membrane vesicles,OMV)是在细菌生命活动中不断从细菌细胞表面脱离而形成的功能性囊泡,其内部含有蛋白质、脂质和核酸等成分,具有多种特殊的生物学功能,在细菌-细菌和细菌-宿主相互作用中起着关键作用。虽然大多数OMV的研究都是关于动物病原菌,但最近OMV在植物-细菌相作领域的作用已逐渐被揭示。围绕OMV的发现、产生、成分,以及在发病和应激过程中,特别是OMV在植物-细菌相作中生物学功能的相关研究进展进行阐述,为细菌外膜囊泡的分子机理与应用研究提供思路,并为广泛开展微生物外膜囊泡的研究提供参考。

HP-OMVs对2型糖尿病患者大动脉内皮细胞LR11及动脉硬化危险因子表达水平的影响

目的探讨幽门螺杆菌外膜泡(Helicobacter pylori outer membrane vesicles,HP-OMVs)对2型糖尿病患者大动脉内皮细胞(Diseased human aortic endothelial cells-type 2diabetes,D-HAEC)的低密度脂蛋白受体11(Low-density lipoprotein receptor relative 11,LR11)及动脉硬化危险因子表达水平的影响。方法体外培养HP菌株,从过滤后的上清收集外膜泡。体外培养D-HAEC,加入不同浓度幽门螺杆菌外膜泡,培养24h,提取RNA后用Real time PCR法测定LR11、IL-1β、IL-6、MCP-1、TNF-α、VCAM-1的表达水平,与对照组进行比较。用HP-OMVs刺激的DHAEC里加入10μmol/L腺苷酸环化酶抑制剂(SQ22536)作用30 min,测定LR11、IL-1β、IL-6、MCP-1、TNF-α、VCAM-1的表达水平。结果①HP组(加入HP-OMVs)的LR11、IL-1β、IL-6、MCP-1、TNF-α及VCAM-1的表达水平与对照组比较显著升高(P<0.05)。HPS组(加入腺苷酸环化酶抑制剂)的LR11、IL-1β、IL-6、MCP-1、TNF-α及VCAM-1的表达水平与HP组比较显著降低(P<0.05)。②多因素分析示LR11与IL-1β、IL-6、VCAM-1有显著相关性(r=0.967,0.733,0.683),多元逐步回归分析示LR11与IL-1β最密切相关(B=0.046,t=7.064,P<0.001)。结论Hp-OMVs可升高2型糖尿病患者大动脉内皮细胞的LR11及动脉硬化危险因子的表达水平,腺苷酸环化酶抑制剂可抑制HP-OMVs的作用,Hp-OMVs可促进D-HAEC增值。

OMV小车及5G技术在高纯石英棒智能制造车间的融合应用

伴随国内人口红利的逐步消失,制造业用工成本逐年上涨,如何在高纯石英棒制造过程中降低操作技师劳动强度及减少用工数量,是亟需解决的问题。本文描述了高纯石英棒智能制造车间建设过程中对OMV小车、5G、多轴机器人等技术的综合性融合应用。通过大胆尝试和深入解析,成功实现高纯石英棒在生产中的不同工序之间物料无缝衔接和自动化、高效化流转,项目实施后,有效降低了现场操作技师的劳动强度,减少了各个工序间物料流转的用工数量,大幅降低了高纯石英棒生产制造成本,有效保证了产品制造过程中品质控制的一致性,为国产高纯石英棒智能制造做了积极的示范作用。

单价B群脑膜炎奈瑟菌OMV疫苗免疫后的抗体亲和力及其IgG亚型

脑膜炎奈瑟菌(简称脑膜炎球菌)是导致全球范围脑膜炎和败血症的重要病原菌,B群脑膜炎球菌血清亚型P1.7-2.

Delcam OMV技术在模具行业的应用

Delcam OMV目前在国内模具行业应用非常广泛，Delcam OMV关注用户核心工艺技术和知识积累，全面提供更多的先进加工技术，帮助客户进一步提高加工效率、降低生产成本，达到更好的加工结果，通过OMV过程质量控制，Power INSPECT产品终检，可以大幅度减少模具调整时间，降低人员工作量以及技能要求，使用户产品品质得到飞越。

拉塞尔中心(IBM、OMV与奥地利银行)

三栋大厦的入口处的开敞空间的设计具有特别重大的意义。作为一个城市空间,它必须平衡各个基地相互之间的优点和缺点,同时建筑设计语言又不失其个性。各栋大厦的建筑外观受外部要求(规划要求)和内部功能的影响。拉塞尔中心作为建设一个建筑综合区的开端,将成为该地区发展的标志,在未来几十年内,此地区将是维也纳的主要的发展中心。

基于超滤浓缩法和差速离心法制备细菌OMVs的方法探讨

目的比较超滤浓缩法、差速离心法提取细菌外膜囊泡(OMVs)的效率,并观察两种方法提取的OMVs对细胞存活率影响的差异。方法分别采取超滤浓缩法和差速离心法提取大肠埃希菌(E.coli)的OMVs,BCA法检测两种方法提取的OMVs蛋白浓度;负染电镜检测其形态及纯度;纳米颗粒跟踪分析检测OMVs粒径大小分布和浓度;CCK8法检测OMVs对细胞存活率的影响。结果两种方法提取的OMVs均为形态典型的球状囊泡结构,差速离心法提取的OMVs的存在包膜不完整,有缺口的情况,产量为(2.7±0.1)μg/10^(10)CFU;超滤浓缩法提取OMVs的产量为(3.3±0.3)μg/10^(10)CFU,高于差速离心法(P<0.05);差速离心法提取的OMVs直径<247.5 nm囊泡数量占总量(82.3±4.6)%,超滤浓缩法提取的OMVs平均粒径更加集中,直径<247.5 nm的囊泡数量占总量(88.8±3.7)%,占比更高(P<0.05);CCK8法检测发现两种方法提取的OMVs均对RAW264.7细胞存活率产生影响(P均<0.05),差速离心法和超滤浓缩法提取的OMVs作用后,细胞存活率分别为(84.0±4.6)%和(74.1±6.6)%,组间无显著性差异(P>0.05)。结论超滤浓缩法提取的E.coli的OMVs的完整性、纯度和产量均高于差速离心法,具有更高的提取效率,两种方法提取的OMVs对细胞存活率的影响无差异。

卢克石油公司收购OMV的欧洲润滑油业务

卢克石油公司的全资子公司于2013年7月日宣布收购OMV公司维也纳附近3.5万t/a的滑油调配厂及相关资产。卢克石油子公司LLC际公司也收购了九个欧洲城市的经销单位。

大肠杆菌DH5α通过外膜囊泡传递抗生素抗性基因AmpR

【目的】探究大肠杆菌(Escherichia coli)DH5α外膜囊泡(outer membrane vesicles,OMVs)在细菌间传递抗生素抗性基因AmpR的能力。【方法】通过超速离心法提取外膜囊泡;然后通过透射电镜,纳米颗粒跟踪分析(NTA)以及Western blot检测和表征OMVs的形态、粒径和浓度。同时PCR鉴定OMVs中的氨苄青霉素抗性基因AmpR。将OMVs与大肠杆菌DH5α共孵育培养,观察细菌在氨苄抗生素培养基上的生长情况,挑取单菌落进行菌落PCR鉴定AmpR的存在。【结果】所提取的囊泡的平均粒径约为125 nm,在OMVs粒径范围之内,OMVs标志蛋白OmpC阳性,显示所提取的囊泡为细菌外膜囊泡OMVs。同时PCR鉴定该OMVs中含有氨苄青霉素抗性基因AmpR。与OMVs共孵育培养后的大肠杆菌DH5α能在LB固体平板上生长,通过菌落PCR鉴定大肠杆菌中含有AmpR基因。【结论】具有抗性基因的大肠杆菌Escherichia coli DH5α可以通过外膜囊泡OMVs将AmpR传递给周围的大肠杆菌,实现耐药性转移。

面向在机检测系统的IGES复杂型面再生及其虚拟仿真模型

为实现在机检测系统与通用实体建模软件的数据传输以及与虚拟仿真模型的实时交互,深入研究了基于初始图形交换规范(initial graphics exchange specification,IGES)的拓扑信息,提出了符合该文件格式中各种常用图形实体几何信息的存储结构.以Visual C++为开发平台,设计出符合IGES规范的数据结构及其程序算法,为非均匀有理B样条(non-uniform rational B-spline,NURBS)曲线、直线和组合曲线等多种图元实体都定义了各自的结构体,并且以结构体为节点将其存储到各自的链表当中,最终以类的形式进行封装.借助于OpenGL图形库函数读取存储到链表中的实体数据,实现了IGES数据中基面的绘制以及对内外边界的裁剪,最终完成了对在机检测系统中复杂空间型面的再生以及与虚拟仿真模型的交互.程序成功读取了约1,M大小的IGES数据文件,并实现了原模型的再生.

大肠埃希菌外膜囊泡递呈猪瘟病毒E2蛋白的表达及其免疫效果评价

为探讨大肠埃希菌外膜囊泡(outer membrane vesicles,OMVs)作为猪瘟病毒(classical swine fever virus,CSFV)E2蛋白的递呈载体所产生的免疫效应,将切除跨膜区后的CSFV E2基因连接到p BAD18-Cm-Cly A的C-端,转化E.coli DH5α,用0.2%阿拉伯糖诱导表达后,收集含E2蛋白的OMVs免疫家兔。免疫印迹表明,该OMVs可特异性地与组氨酸标签单抗结合。间接ELISA结果表明,重组OMVs可诱导兔体产生高水平的Ig G抗体。免疫后的家兔能很好地防御高剂量CSFV活疫苗攻击。说明大肠埃希菌OMVs递呈CSFV E2蛋白具有较好的免疫原性,为研究OMVs递呈CSFV E2蛋白疫苗奠定了基础。

布鲁氏菌外膜囊泡生物信息学分析及免疫原性评价

【目的】探索布鲁氏菌外膜囊泡(OMVs)在亚单位疫苗上的应用前景,制备布鲁氏菌OMVs亚单位疫苗,评估布鲁氏菌OMVs的免疫原性。【方法】利用高速离心法制备羊种布鲁氏菌OMVs,通过透射电镜、SDS-PAGE和生物信息学分析对制备的OMVs进行形态和组分分析;使用纳米佐剂(LDH)和弗氏佐剂乳化OMVs后免疫小鼠,通过间接ELISA方法检测免疫后7、14、21、28和35 d小鼠血清中的特异性抗体,利用小鼠IgG ELISA检测试剂盒检测免疫后小鼠血清中IgG抗体水平,评估OMVs诱导产生的体液免疫水平;通过小鼠脾脏淋巴细胞分离与细胞因子白细胞介素4(IL-4)和γ-干扰素(IFN-γ)测定及小鼠外周血T淋巴细胞亚群的流式细胞术测定评估OMVs免疫小鼠的细胞免疫水平。【结果】成功提取并纯化了布鲁氏菌OMVs,其直径大小为20~160 nm。生物信息学分析结果显示,OMVs主要组成蛋白OMP25、OMP31、OMP16、OMP19、BP26及SOD均属于亲水性蛋白和抗原性蛋白,且存在多个B细胞和T细胞优势抗原表位。与PBS组相比,OMVs免疫小鼠后,不同佐剂组均可诱导小鼠产生高水平的特异性抗体和IgG抗体(P<0.01);同时OMVs可显著诱导小鼠脾脏淋巴细胞产生IFN-γ(P<0.05),并促进了CD4^(+)T细胞的表达(P<0.05)。【结论】本研究证实了羊种布鲁氏菌OMVs具有较强的免疫原性,能诱导小鼠产生强烈的体液免疫和细胞免疫反应,为布鲁氏菌新型亚单位疫苗的开发奠定了理论基础。

副鸡禽杆菌外膜囊泡提取及成分分析

为研究副鸡禽杆菌外膜囊泡(OMVs)的构成,提取A型副鸡禽杆菌的OMVs,纯化并透射电镜观察其形态结构,检测其内毒素含量和DNA含量,分析其是否具有血凝活性,测定OMVs蛋白含量,并用质谱法分析了OMVs的蛋白组成成分。结果显示,副鸡禽杆菌的OMVs呈球形、泡状,直径为20 nm^300 nm,含有内毒素和少量核酸物质。该OMVs不能凝集鸡红细胞,Western blot结果表明,OMVs蛋白与该菌外膜蛋白单克隆抗体有阳性反应,构成OMVs的蛋白分子质量大多集中于65 ku和13 ku处,蛋白成分主要有ATP依赖性RNA解旋酶等多种功能酶、铁链霉素B受体、膜蛋白等结构成分和一些未知功能的假定蛋白等,为进一步分析副鸡禽杆菌外膜囊泡在致病和免疫方面的作用奠定基础。

副鸡禽杆菌外膜囊泡的生物学活性分析

为研究副鸡禽杆菌(Apg)外膜囊泡(OMVs)的生物活性,提取了A型副鸡禽杆菌的外膜囊泡。纯化后的OMVs用透射电镜观察其形态结构;将OMVs加入到鸡巨噬细胞(HD-11)培养液中,检测一氧化氮(NO)产生量的变化;用荧光定量PCR(qPCR)检测HD-11各炎症相关因子的表达量变化情况;将OMVs经肌肉注射接种SPF鸡,检测鸡血清IgG抗体产生情况,并用3种血清型的副鸡禽杆菌强毒菌株攻击免疫鸡,测定其免疫保护率。结果显示,电镜下的副鸡禽杆菌OMVs呈球形,直径在20~300 nm;OMVs可极显著提高HD-11中NO产量;qPCR结果显示,OMVs作用可显著上调鸡巨噬细胞IL-2、IL-6、 IL-1β、IL-10、iNOs等炎症相关因子的表达。免疫鸡可以产生特异性的IgG抗体。用A型副鸡禽杆菌攻毒,免疫保护率为70%,对异种血清型交叉保护性较弱,仅有10%~30%。本研究为深入研究副鸡禽杆菌外膜囊泡的功能奠定了基础。

基于混合粒子群算法的在线检测路径规划

针对加工中心在线检测中的路径规划问题,采用基于全局规划与局部优化相结合的策略,将光学寻优算法、遗传算法、混沌优化与基本粒子群算法结合,提出了一种新型混合离散粒子群算法,并将其用于检测路径的全局规划。首先简述了在线检测路径规划的原理及检测数据的获取,然后介绍了混合粒子群算法的原理、步骤及其流程,最后对算法进行了仿真研究,并且与蚁群算法进行了对比分析。经仿真验证,该算法具有搜索精度高、收敛速度快、稳定性好等优点,有较好的实际应用价值。

在机检测中三角网格拓扑重建方法的研究

对STL(Stereo Lithographic)模型中三角面片进行拓扑重建是解决在机检测系统中对零件模型表面进行曲面划分的前提条件之一。在建立点-边拓扑关系的基础上,将原有基于顶点坐标值浮点数比较的半边匹配结构转化为基于索引值的整型数匹配,并提出了基于关联-散列结构三角网格拓扑重建方法。该方法采用散列结构为辅助数据结构来减少STL模型顶点归并和边界归并的计算量,利用STL模型相邻网格单元数据相关性降低哈希函数的构建难度并提高冲突处理效率,在滤除冗余数据的同时完成拓扑关系的建立。计算实例验证了该算法的高效性和有效性。

大型复杂结构零件在位测量规划研究

在位测量技术被广泛地应用在大型复杂结构零件的精度检测任务中,其测量轨迹的规划问题是实现在位测量的难点,直接影响测量的可行性及效率。文中提出了一种基于启发式算法的新型测量轨迹规划方法。该方法以遗传算法和模拟退火算法构建混合框架,并引入了新的基因型,以及与之对应的交叉、变换算子、目标函数等。干涉碰撞约束被同时考虑在测量轨迹规划过程中,从而确保该方法适用于工件结构复杂的情况。在此基础上,开发了在位测量轨迹规划系统,该系统可实现模型读取、显示及交互等操作。最后进行了仿真验证,证明了该方法可以有效地完成测量轨迹规划,显著提高测量效率。

内毒素的生物学特性及其对非洲猪瘟流行下猪只复养的影响

文章就内毒素的生物学特性及其对非洲猪瘟(ASF)流行下的复养猪只健康的影响进行了综述,指出:在当前ASF流行下,认识内毒素(ET)的生物学特性及其对复养猪只健康的影响,近期意义在于猪场的成功复养与成功“拔牙”,以维持猪只的健康生产;远期意义在于开发出有效的细菌ET净化剂,这是一个在人医和兽医学领域所面临的极富挑战性的前沿性研究课题。

WDM及其在电力通信网的应用

介绍了波分复用系统的组成及其主要元器件的功能,重点介绍了光放大器、分波/合波器、波长转换器、光分插复用器等的功能与应用,深入探讨了WDM系统在电力专网应用设计中应考虑的几个关键技术问题。针对电力专网的特点与现状,提出了电力专网应用波分复用系统组网的具体策略,对WDM系统在电力专网的推广应用具有指导意义。