邻苯二甲醛法、OPA法、脲酶—Berthlot法测定游泳池水中尿素的研究

目的 录求一个较好的一步法测定游泳池水中尿素的方法。方法 分别对邻苯二甲醛法、OPA法和酶—Berthlot法 ,进行标准曲线、干扰性实验、灵敏度、准确度、精密度以及显色剂比例 ,显色稳定性和与国标比较试验等研究。结果 邻苯二甲醛法对游泳池水中尿素测定 ,抗干扰强 ,线性范围宽 ,线性好 (r =0 9998) ,灵敏度高 ,准确度、精密度、重现性均好 ;该法不需要煮沸 ,无需避光反应 ,方法简便快速 ,适于各级实验室使用 ;OPA法在游泳池水中尿素大于 3 0mg/L时 ,线性良好 ,低于 3 0mg/L时线性不好 ;脲酶波氏法 ,在无干扰情况下 ,线性良好 (r =0 9999)。但当CuSO4含量在游泳池水中达 0 3mg/L时 ,脲酶与铜离子生成不溶性盐而失活 ,从而使实验不能正常反应 ,所以该法存在着一定的局限性。结论 邻苯二甲醛法准确、灵敏、简单、线性范围宽 。

油菜蜂花粉蛋白水解度测定方法比较

采用Alcalase2.4LFG水解油菜蜂花粉蛋白,比较pHstat法、OPA法和TNBS法测定蜂花粉蛋白水解度的差异。水解118min后,pHstat法、OPA法和TNBS法测得的水解度分别为24.7%﹑13.4%﹑6.6%。由于OPA试剂和甘氨酸﹑半胱氨酸﹑赖氨酸反应生成的化合物在340nm波长处的吸光度较低,致使OPA法测得的水解度低。TNBS试剂和ε-NH2的作用不稳定,也可能是由于TNBS试剂产生的发光物使测定结果降低。在水解度较低的情况下,α-NH2平均解离度的变化可以忽略,pHstat法测得的水解度比较准确。

FIA—F4010流动注射荧光分光光度计测定本身不发荧光的氨基酸

介绍了OPA(O-phthalaldehyde)衍生法的基本原理及其在FIA-F4010流动注射荧光分光光度计分析中的应用。给出了L-Leu,L-Asp,L-Ser,Gly等氯基酸分析应用实例。同时对实用性、灵敏度、流路等有关问题进行了讨论。

不同蛋白酶水解小米分离蛋白工艺

以小米蛋白粉为原料,使用胃蛋白酶和碱性蛋白酶进行水解反应,用邻苯二甲醛法(OPA法)测定水解度,得到小米蛋白水解最佳时间,在此时间范围内进行单因素试验优化小米蛋白粉在不同底物浓度、温度和pH下胃蛋白酶和碱性蛋白酶的水解条件,通过聚丙烯酰胺凝胶电泳法观察水解过程中肽段变化,制备高水解度小米蛋白。结果表明,采用胃蛋白酶水解浓度1%蛋白时,底物浓度[E]/[S]=10%, pH 2,温度35℃水解1 h水解度最大;采用碱性蛋白酶水解浓度1%蛋白时,底物浓度[E]/[S]=10%, pH 9,温度45℃水解1 h水解度最大;由聚丙烯酰胺凝胶电泳图谱可以看出肽段逐渐水解的过程。

水产品中生物胺的两种衍生测定方法比较

分别采用邻苯二甲醛柱前衍生高效液相色谱（HPLC）荧光检测法（简称OPA法）和丹磺酰氟柱前衍生HPLC紫外检测法（简称DNS—Cl法）测定水产品中生物胺含量。比较这两种方法对水产品中多种生物胺检测的差异。结果表明。两种方法对生物胺的检测质量浓度范围在1～100mg／L，OPA法的检出限（0．03-0．35mg／kg）略优于DNS—CI法（0．15～0．90mg／kg）。方法的精确度试验表明：0PA法的加标回收率（76．2％～107％）略优于DNS—Cl法（62.2—118％），然而两种方法的测量精密度均小于lO％（OPA法13％-6．7％，DNS—CI法2．6％～9．9％，n=6）。OPA法操作简便、快速，然而其衍生产物不太稳定，对亚精胺和精胺的检测灵敏度低；而DNS—Cl法操作相对繁琐，其衍生产物稳定，可同时测定包括亚精胺和精胺在内的多种生物胺。用这两种衍生方法检测水产品中组胺、腐胺、酪胺和色胺存在显著性差异（P〈0．05）。