龙牙百合花氨基酸含量的柱前衍生OPA-HPLC法测定

[目的]测定龙牙百合花中的氨基酸含量。[方法]以邻苯二甲醛(OPA)与9-芴基羰酰氯(FMOC-Cl)作衍生剂,利用VWD检测器可变波长检测程序,采用柱前衍生OPA-HPLC法测定邵阳龙牙百合花中的17种氨基酸含量。[结果]邵阳龙牙百合花中含有苏氨酸、丝氨酸、脯氨酸、蛋氨酸、谷氨酸、甘氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸、酪氨酸、天门冬氨酸、丙氨酸、组氨酸、半胱氨酸、异亮氨酸等17种氨基酸。其中必需氨基酸的含量为49.7 mg/g,占氨基酸总量的31.20%;儿童必需氨基酸的含量为30.6 mg/g,占氨基酸总量的19.20%;含量最高的是谷氨酸(28.7 mg/g,占氨基酸总量的18.03%);其次是精氨酸(27.5 mg/g,占氨基酸总量的17.30%)。[结论]该方法操作简便,灵敏度高,结果准确,可靠。龙牙百合花中氨基酸的种类齐全,含量丰富,具有很高的开发利用价值。

红曲霉与乳酸菌混合发酵产γ-氨基丁酸工艺研究

混合发酵在中国传统酿造工业中应用非常广泛，在生产领域具有很高的地位。γ-氨基丁酸（GABA）是目前研究较为深入的一种重要的抑制性神经递质，它广泛存在于各种动植物和微生物中并参与多种代谢活动，具有很高的生理活性，对生物的生存具有重要作用。利用红曲霉（Monascus）和乳酸菌（Lacticacid bacteria）混合发酵生产GABA具有非常明显优越性和良好的开发前景。红曲霉SM048在与植物性乳酸杆菌Lac．1同时接种后，其生长速度受到一定程度的抑制，适合采用分段培养的方式进行混合发酵。在pH4～4．5，30℃条件下，分段发酵GABA产量为0．52g／L，比SM048和Lac．1单独发酵分别提高了147．62％和62．5％。

OPA柱前自动衍生-紫外检测米胚芽中的γ-氨基丁酸的HPLC法研究

研究了OPA柱前自动衍生 紫外检测米胚芽中的γ 氨基丁酸的HPLC法 ,在最适的条件下 ,γ 氨基丁酸的线性范围为 10～ 2 5 0mg/L ,r =0 9999,RSD小于 1 2 % ,回收率为98 7%～ 10 1 2 %。通过富集 ,米胚芽中的GABA含量由 0 3 0 1mg/g提高到 4 3 9mg/g。

用高效液相色谱紫外检测法测定赖氨酸注射液中赖氨酸含量

研究了采用高效液相色谱 紫外检测法对盐酸赖氨酸注射液中赖氨酸含量的测定 .作者在AminoQuant方法的基础上 ,改为仅采用邻苯二醛 (OPA)衍生化 ,省略了原方法衍生化试剂中的不稳定成分 ,而采用优化的反应条件提高紫外测定的灵敏度 ;又对这个组成较简单的样品改用恒定组成的流动相淋洗 ,手动方法测定避免了对该试样不必要的梯度淋洗 ,较原AminoQuant氨基酸分析法简便、快速 ,结果峰面积与浓度相关系数r =0 9998,回收率为 99 7% (RSD为 1 0 %～ 1 5 % ) .在采用紫外检测法时 ,最小检出量为 5 3× 10 -8(S/N =3)

高效液相色谱法测定海水中溶解态游离氨基酸

采用邻苯二甲醛柱前衍生-高效液相色谱-荧光检测器（OPA—HPLC-FLD）联用技术分离测定了海水中的14种主要溶解游离氨基酸（DFAA），通过邻苯二甲醛-3-巯基丙酸（OPA-3-MPA）柱前衍生后，在XDB—C18柱上分离。不同氨基酸测定的精密度（RSD）为1．62％～3．80％，检测限为11．4～69．7ng·L^-1，海水加标回收率在92％～110％之间。利用该方法测得青岛近海表层海水中氨基酸浓度为0．015～0．284μmolL^-1。

OPA柱前衍生高效液相色谱法测定茶氨酸的研究

研究了OPA柱前自动衍生-紫外检测茶汁中茶氨酸的 HPLC法,色谱条件为:Hypeml ODS C18柱,洗脱液为醋 酸钠和甲醇混合液,采用梯度洗脱,流速为1.0mL／min. 检测波长为338nm。茶氨酸在0.05-1.00mg／mL范围内浓 度与峰面积线性关系良好,线性相关系数为0.9998,平均 回收率为98.85％,RSD小于1％(n=5)。

高效液相色谱法测定乳酸菌发酵液中γ-氨基丁酸的含量

建立了高效液相色谱邻苯二甲醛(OPA)柱前衍生-紫外检测法对乳酸菌发酵液中γ-氨基丁酸的含量进行了测定。乳酸菌发酵液经离心,OPA柱前衍生后,利用Luna-C18色谱柱(250×4.6mm,5μm),以15mmol/mL醋酸钠缓冲液∶甲醇为55∶45为流动相,在流速为0.8mL/min,柱温30℃,紫外检测波长334nm的条件下进行测定。结果表明:γ-氨基丁酸在50～800μg/mL的浓度范围内线性关系良好,线性方程为y=5465.9x-5411(R2=0.9996),检测限为2.6714μg/mL,平均回收率为98.31%,RSD=2.27%。该方法操作简单、快速,分离度好,精密度高,满足痕量分析要求。

RP-HPLC测定人血浆中还原型谷胱甘肽浓度

目的 :建立并考察人血浆中还原性谷胱甘肽的测定方法。方法 :采用邻苯二甲醛 (OPA)柱前衍生化RP-HPLC测定人血浆中谷胱甘肽的含量 ,并进行了方法学考察。结果 :3种浓度谷胱甘肽的平均回收率为 10 4.0 0 %± 3 .91% ,日内RSD≤ 3.6 9% ;日间RSD≤ 5 .38%。结论

HPLC柱前衍生法测定发芽糙米中γ-氨基丁酸的含量

利用基于OPA柱前衍生-紫外检测的HPLC方法测定糙米中γ-氨基丁酸（GABA）含量。结果表明：在最适的条件下，GABA的线性范围为10～250mg／L，R2=0．9996，RSD小于1．200％，回收率为101．3％～108．5％；用该方法验证测定原料糙米和发芽糙米的GABA含量分别为3．891～7．709mg／100g和12．77-24．89mg／100g，测定结果准确，重现性好。

有机相阴离子交换固相萃取HPLC-UV法快速测定食品接触材料中4种尼泊金酯的特定迁移量

建立了有机相阴离子交换固相萃取/高效液相色谱紫外法(HPLC-UV)快速测定10%乙醇、3%乙酸、20%乙醇、50%乙醇和橄榄油食品模拟物中尼泊金甲酯、尼泊金乙酯、尼泊金异丙酯和尼泊金丙酯的特定迁移量(SM)。橄榄油食品模拟物样品采用有机相阴离子交换固相萃取法净化,水基食品模拟物样品经亲水性聚四氟乙烯针式过滤器过滤后直接进样。以甲醇和纯水为流动相,4种尼泊金酯在ZORBAX SB-Phenyl柱上等度洗脱,12.5 min内达到基线分离;紫外外标校准曲线法定量。4种尼泊金酯在0.5~100 mg/L范围内线性关系良好(r2≥0.999 8),在10、50、100 mg/kg 3个浓度水平下的加标回收率为97.9%~103%,相对标准偏差为0.02%~2.2%,在5种食品模拟物中的定量下限为0.1~0.5 mg/kg。结果表明,该方法的色谱分离和线性关系好,回收率和准确度高,满足欧盟(EU)NO 10/2011法规附表1中4种尼泊金酯SM的限量要求,并已应用于实际样品的检测。

邻苯二甲醛法(OPA)与高效液相色谱法(HPLC)测定降胆固醇的双歧杆菌的对比

为了测定实验室保藏的5株双歧杆菌体外降胆固醇能力,分别采用邻苯二甲醛法与高效液相色谱法测定培养基中胆固醇,对两种方法的线性、精密度和加标回收率进行了对比。5株双歧杆菌菌株的降胆固醇率在12.34%-28.57%,两种方法分别在0-0.20 mg/mL和0-0.70 mg/mL范围内呈现良好的线性关系,精密度相对标准偏差分别为0.32%（n=5）和0.96%（n=5）,加标回收率在99.33%-100.18%。整体比较,两种方法均可用于测定双歧杆菌的降胆固醇能力,不过邻苯二甲醛法更适合降胆固醇双歧杆菌的初筛检测。

柱后衍生-高效液相色谱法测定玉米中伏马菌素B_1和B_2

建立了邻苯二甲醛(OPA)柱后衍生-高效液相色谱测定玉米中伏马菌素B1和B2(FB1和FB2)的方法。采用ZORBAX SB-C18色谱柱,以0.1mol/L磷酸二氢钠溶液(pH 3.3)-甲醇为流动相,梯度洗脱。流动相流速为0.8mL/min,柱温40℃;衍生剂的流速为0.4mL/min,衍生温度为室温。实验对衍生剂缓冲液的pH、衍生剂的浓度和流速、激发和发射波长等重要条件进行了优化。结果表明,衍生剂的pH在10.5、OPA的质量浓度为2g/L、流速为0.4mL/min、激发波长335nm、发射波长440nm时测定效果良好,FB1、FB2在0.2～20mg/L范围内线性关系良好,相关系数大于0.999;FB1和FB2的检出限均为0.02mg/kg;在0.1～4.0mg/kg范围内,3个添加水平的平均回收率为82.5%～89.8%。该方法精确、简单、快速,适合玉米中FB1和FB2的测定。

柱前衍生-高效液相色谱法测定暗纹东方鲀肉中牛磺酸含量

运用柱前衍生-高效液相色谱法测定暗纹东方鲀肉中牛磺酸的含量,以邻苯二甲醛为衍生剂,样品液与衍生剂进行衍生反应的体积比为1∶1,反应时间为1 min,甲醇-乙腈-水(体积比10∶20∶70)为流动相,采用XbridgeTMC18色谱柱,波长为330 nm,流速1 mL/min,进样量20μL的条件下检测样品中的牛磺酸。结果表明:牛磺酸的线性范围为5～30μg/mL,相关系数R2为0.999 1,回收率范围95.35%～98.19%,变异系数(RSD)=2.03%～3.71%(n=3),样品6次重复测定的RSD=0.51%,最小检出限1.14μg/mL。

HPLC法测定脑复清胶囊中γ-氨基丁酸的含量

目的 :建立柱前衍生高效液相色谱法测定脑复清胶囊中γ 氨基丁酸 (GABA)含量的方法。方法 :色谱柱为HypersilODSC18柱 (12 5mm× 4 .0mm ,5 μm) ,流动相A为 2 0mmol·L-1乙酸钠 +0 .0 2 %三乙胺 (pH 7.3) ;流动相B为 10 0mmol·L-1乙酸钠 (pH7.2 ) 乙腈 甲醇 (10 0∶175∶2 2 5 )梯度洗脱 ;检测波长为 338nm。结果 :线性范围0 .0 5～ 1.0 3mg·mL-1,线性方程A =4 2 3784C +6 919.5 ,r =0 .9994 ,平均加样回收率 10 1.7% ,RSD为 1.7%(n =9)。结论 :本法简便、快速、灵敏度高 ,可用于脑复清胶囊中GABA的质量控制。

高效液相色谱法测定人血浆中羧甲司坦浓度

目的:建立高效液相色谱法测定人血浆中羧甲司坦浓度.方法:采用邻苯二甲醛为柱前衍生化试剂,反相高效液相色谱法检测羧甲司坦衍生物:Hypersil BDS C18柱(4.6 mm×150 mm,5 μm);流动相:甲醇-0.05 mol·L-1醋酸钠缓冲液(pH 5.9)-四氢呋喃(15:84:1);流速:1. 0 mL·min-1;进样量:5μL,使用荧光检测器检测激发波长:338 nm,发射波长:450 nm.结果:标准曲线线性、范围1.0～40.0 mg·L-1(r=0.999 9,n=6),血浆中羧甲司坦最低检测限为0.5 mg·L-1,日内RSD为0.3%～1.3%,日间RSD为0.4%～4.5%,准确度为97.9%～102.7%,羧甲司坦回收率为99.5%～103.0%.结论:该方法分离效果好,方法学结果满意,适用于人血浆中羧甲司坦的检测.

高效液相色谱法同时测定糯米酒中17种氨基酸

建立反相高效液相色谱法(RP-HPLC)用以测定糯米酒中的17种氨基酸。采用OPA试剂柱后衍生,RP-HPLC经梯度洗脱后检测糯米酒中17种氨基酸的含量。结果表明,该方法测定17种氨基酸的线性相关系数R在0.9990～0.9998,平均回收率为94.5%～98.7%,精密度RSD为0.51%～1.90%。该方法专属性强、操作方便、灵敏度高,可用于糯米酒和花雕酒等黄酒中17种氨基酸含量的检测。

邻苯二甲醛柱前衍生反相高效液相色谱法测定茶叶中17种游离氨基酸

采用邻苯二甲醛作为柱前衍生化试剂,结合反相高效液相色谱,优化了色谱条件,实现对茶汤中17种一级氨基酸的精确定性和定量分析。17种氨基酸的保留时间和峰面积的RSD分别在0.02%～0.70%与0.11%～1.15%之间,经方法学考察,该方法具有良好的稳定性和重现性。

反相高效液相色谱法拆分谷氨酸和天门冬氨酸对映体

目的:建立 HPLC 法拆分了谷氨酸(Glu)和天门冬氨酸(Asp)对映体的方法。方法:本文利用邻苯二甲醛(OPA)柱前衍生,以β-环糊精(β-CD)为手性添加剂,乙腈-缓冲溶液(0.02mol·L^(-1)醋酸钠:三乙胺=100:0.018,)为流动相,检测波长为330nm。考察了不同色谱柱、缓冲溶液 pH、β-环糊精浓度、流动相比例和柱温对分离的影响。优化的色谱条件为:色谱柱为 Hypersil AA-ODS,分离温度40℃,流动相为乙腈-缓冲溶液(0.02mol·L^(-1)醋酸钠:三乙胺=100:0.018,用2%醋酸调pH 7.2,其中含6mmol·L^(-1)β-CD)=1:99。结果:在优化的色谱条件下,上述两种氨基酸对映体均得到基线分离。结论:所建立的方法简便、快速、分离度高。

HPLC柱前衍生法测定海水中溶解态游离氨基酸

本文采用反相高效液相色谱法测定海水中溶解态游离氨基酸,整个分析过程只需40 min就可使所有海水样品中的氨基酸得到很好分离,对各含6pmol的16种氨基酸混合样分析偏差在10%左右,检测极限为100fmo1,线性范围在1pmol到Inmol之间。

江苏栽培明党参中γ-氨基丁酸累积规律研究

目的用OPA柱前衍生HPLC法测定明党参中γ-氨基丁酸的含量，探寻γ-氨基丁酸含量与明党参生长时间的关系。方法取样品试液1mL，OPA衍生试剂1mL，硼酸缓冲液（0．2mol／L，pH8．5）5mL，定容至10mL，反应时间45min；流动相：流动相A为1．35％醋酸钠缓冲液（pH7．3），流动相B为135％醋酸钠（pH7．2）：甲醇（100：400），洗脱梯度及流速：0-20minB相30％，20—25minB相增至100％，维持8min；检测波长：336nm。柱温：40℃。结果在10-50μg／mL范围内对不同月份采收的样品在实验条件下测定，其平均含量为0．034％-0．116％。结论γ-氨基丁酸含量在1月、5月、8月相对较高，9月、10月和次年3月相对较低。