BMP-2体外诱导OPG-/-小鼠BMSCs向成骨方向分化的实验研究

目的探讨骨形成蛋白-2（BMP-2）对OPG-/-小鼠骨髓间充质干细胞（BMsCs）体外定向诱导成骨的能力，评价BMP-2活性多肽的成骨诱导性及诱导成骨的剂量依赖性。方法取OPG-／-小鼠股骨，分离骨髓基质细胞进行体外培养，传至P，代时改用条件培养基，在15％FBS培养条件下培养基中分别加入：农度为0．3岭、0．2ug、0．1ug、0．05ug、0ug的BMP-2，并依次记为A、B、c、D和E组。细胞培养至1、3、5、7d，PNPP法测定碱性磷酸酶（ALP）、钙试剂盒测定细胞钙含量、酶联免疫法测定细胞上清中抗酒石酸酸性膦酸酶5b（TRACP5b）的表达，检测不同浓度BMP．2活性多肽体外诱导成骨的能力。结果ALP活性和钙含量检测显示，A组和B组较其他组增加明显（P〈0．05），但A、B组间比较差异无统计学意义（P〉0．05）。TRACP5b检测显示，A、B、c组第3、5和7日TRACP5b表达均低于D、E组（P〈0．05），但A和B组差异不显著（P〉0．05）。结论BMP-2活性多肽能有效地促进OPG-／-小鼠BMSCs向成骨方向分化，其诱导作用存在剂量依赖关系，最佳诱导剂量为0．2ug／ml。

成骨生长肽对不同血清浓度下OPG^(-/-)小鼠骨髓基质细胞增殖和分化作用

目的研究合成成骨生长肽(synthetic osteogenic growth peptide,sOGP)对在不同血清浓度条件下OPG-/-小鼠骨髓基质细胞(bone marrow derived stroma cells,BMSCs)的增殖和分化作用。方法取OPG-/-小鼠股骨,分离骨髓基质细胞进行体外培养。在各自培养条件下分为实验组(OGP组)、空白对照组(CON组)和阳性对照组(bone morphogenetic protein-2 group,BMP-2组),倒置相差显微镜下观察细胞形态变化、MTT法测定细胞增殖率、PNPP法测定碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)的表达。结果OGP在含10%胎牛血清(fetal bovine serum,FBS)的LG-DMEM和矿化液的培养条件下,对OPG-/-小鼠BMSCs起到增殖作用,在第3、5天均高于CON组和BMP-2组(P<0.05);OGP组对ALP表达的影响与CON组相似,而与BMP-2组存在较大差异,BMP-2组在所有不同血清浓度条件下的第3、5天ALP活性均高于CON组和OGP组(P<0.05)。结论OGP组对OPG-/-小鼠BMSCs的增殖作用要求较高血清浓度的体外培养条件,但在ALP的分化活性方面弱于BMP-2组。

BMP-2对不同血清浓度下OPG^(-/-)小鼠骨髓间充质干细胞增殖和分化的作用

研究骨形成蛋白-2(Bone Morphogenetic Protein 2,BMP-2)对在不同血清浓度条件下OPG-/-小鼠骨髓间充质干细胞(Bone Marrow Derived Stroma Cells,BMSCs)的增殖和分化作用。取OPG-/-小鼠股骨,分离骨髓基质细胞进行体外培养。在各自培养条件下分为实验组(BMP-2组)和空白对照组(CON组),倒置相差显微镜下观察细胞形态变化,MTT法测定细胞增殖率,PNPP法测定碱性磷酸酶(AlkalinePhosphatase,ALP)的表达。BMP-2组和CON组在含有10%、15%和20%FBS的培养条件下,第3、5和7d的增殖较无FBS和5%FBS条件下明显(P<0.05),而15%和20%FBS条件下增殖又较10%FBS显著(P<0.05);BMP-2组对ALP表达的影响与CON存在较大差异,BMP-2组在所有不同血清浓度条件下的第3、5和7 dALP活性均高于CON组(P<0.05)。BMP-2组对OPG-/-小鼠BMSCs无增殖作用,较高血清浓度是其增殖的主要条件,但在ALP的分化活性方面作用显著。