补肾健脾法对骨质疏松大鼠OPGmRNA、RANKLmRNA表达影响的实验研究

目的:研究中医药补肾健脾法对骨质疏松症大鼠OPG、RANKL基因表达情况的影响。方法::取10月龄大鼠36只随机分成三组:补肾健脾组(BSJP)、正常组、模型组。BSJP组及模型组无菌条件下摘取双侧卵巢制造骨质疏松模型,正常组采取假手术。术后1周开始给药,12周后处死。取出大鼠腰3锥体液氮冻存。经Trizol法抽提总RNA,RT-PCR半定量检测OPG、RANKL基因表达情况,经美国BritainGGM/D2凝胶图象分析系统分析各组目的基因的表达强度。结果:BSJP组大鼠RANKL的表达强度(Rv值)分别与正常组比较结果P<0.05,有显著差异;与模型组比较,结果P<0.01,有显著差异。将BSJP组的OPG的Rv值与正常组比较结果P>0.05,没有有显著差异;与模型组比较结果P>0.05,也没有显著差异。BSJP组OPGmRNA/RANKLmRNA与正常组比较P<0.01,与模型组比较P<0.01,有显著差异。结论:中医药补肾健脾法可以明显抑制RANKL的表达,降低破骨细胞活性,同时有促骨形成作用。

前列腺素E_2对成骨细胞OPGmRNA的调节

目的 研究前列腺素E2 (PGE2 )对成骨细胞OPG基因表达的调节 ,探讨PGE2 引发骨吸收的机制。方法 体外培养大鼠成骨细胞 ,分别在不同时间、给予不同剂量PGE2 进行干预试验 ,提取总RNA进行半定量逆转录PCR分析 ,检测OPGmRNA水平的改变。结果 PGE2 可以抑制OPG基因的表达 ,其作用强度随时间、剂量而改变。结论 PGE2 调节骨代谢、增加骨吸收的作用 ,与其下调成骨细胞OPG基因表达 ,诱导破骨细胞形成及功能有关。

人工关节磨损钛微粒诱导破骨的RANK/OPG通路机制的实验研究

目的分析人工关节磨损钛微粒诱导溶骨的RANK/OPG通路机制。方法巨噬细胞分别与清洁钛微粒、细菌内毒素结合钛微粒和细菌内毒素联合培养,作为清洁钛微粒组、细菌内毒素结合钛微粒组及细菌内毒素组,与单纯巨噬细胞组作为对照。每组分别在培养4,8,16,32h各时点取巨噬细胞,分别用反转录聚合酶链反应技术,分别检测核激活因子受体RANKmRNA、骨保护素OPGmRNA表达。结果与对照组比较,清洁钛微粒组和细菌内毒素结合钛微粒组巨噬细胞培养4h时RNKmRNA表达开始增加,之后逐渐升高(<0.01);培养8h时骨保护素OP-GmRNA表达轻度增高,随后恢复到对照组水平。细菌内毒素组未检测到核激活因子受体RANKmRNA表达,培养4h时骨保护素mRNA表达轻度一过性增加。结论清洁钛微粒可能通过刺激巨噬细胞过量表达RANK,传导破骨信号,而细菌内毒素并不参与RANK/OPG信号途径诱导溶骨。