OPS法玻璃化冷冻牛卵母细胞的研究

用自己现用现配的玻璃化溶液 (EFS4 0、EFS5 0和EDFS30、EDFS4 0 )对二步平衡后的牛体外培养的卵母细胞进行OPS(openpulledstraw)法冷冻保存研究。体外分别培养 6h或 2 2h的牛卵母细胞冷冻解冻后再经 18h或2h培养后 ,经体外受精 ,最高囊胚发育率分别达到 12 %和 17% ;经化学孤雌激活后 ,最高囊胚发育率分别达到2 2 %和 2 4 % ,与对照组 (33% )差异不显著 (P >0 .0 5 )。

小鼠原核胚OPS法冷冻保存技术

在 2 0、2 5℃室温条件下 ,采用 OPS(open pulled straw)法对小鼠原核胚进行玻璃化冷冻保存。结果表明 ,EFS和EDFS各冷冻组的原核形态正常率 (95 %～ 10 0 % )、体外发育率 (76 %～ 82 % )和对照组 (10 0 %、88% )无显著性差异 (P>0 .0 5 )。采用 EPFS4 0冷冻后的原核胚形态正常率 (70 %～ 76 % )与对照组相比差异极显著 (P<0 .0 1)。而 EPFS30和EPFS4 0冷冻后的胚胎发育率 (34%～ 5 7% )均极显著低于对照组 (P<0 .0 1)。另外 ,在 2 5℃室温条件下冷冻保存的原核胚 ,解冻后其囊胚发育率 (76 %～ 80 % )与对照组 (86 % )无显著性差异 (P>0 .0 5 )。冷冻保存的原核胚移植后的妊娠率和产仔率达 4 5 %和 4 4 % ,与新鲜原核胚移植的对照组 (5 6 %和 4 6 % )相比均无显著性差异 (P>0 .0 5 )

OPS玻璃化冷冻对山羊卵母细胞超微结构的影响

对山羊不同发育阶段卵母细胞ＯＰＳ玻璃化冷冻的超微结构损伤进行了电镜观察。结果表明，卵丘细胞除内质网扩张外，未见其他明显的结构损伤；卵母细胞的质膜损伤以ＧＶ期最为严重，其次为培养９ ｈ的，ＩＶＭ 的最轻；ＧＶ期卵几乎看不到微绒毛，而培养９ ｈ和ＩＶＭ卵微绒毛保存较好；ＧＶ期卵母细胞线粒体有的发生了损 伤，主要表现在嵴不清或扩张，培养９ ｈ和ＩＶＭ卵母细胞的线粒体基本上保持了正常的结构；培养９ ｈ卵母细胞的 内质同发生了扩张，ＩＶＭ卵母细胞内质网结构正常。

小鼠孵化囊胚细管法和OPS法玻璃化冷冻保存技术的研究

利用小鼠孵化囊胚为模型 ,为猪孵化囊胚的冷冻保存摸索适宜的方法和条件 :在 2 5和 37℃条件下 ,用不同含量的玻璃化溶液 (EFS和EDFS) ,对小鼠孵化囊胚实施细管法和OPS法冷冻保存。在 2 5℃条件下 ,细管一步法冷冻保存后的囊胚恢复率仅为 32 5 %～ 74 4 % ,与对照组 (10 0 % )差异极显著 (P <0 0 1) ;而细管二步法冷冻组用方法C解冻后 ,孵化囊胚恢复率达 87 0 % ,为细管法最佳组 ,但仍与对照组有显著差异 (P <0 0 5 )。在 37℃条件下 ,改用OPS法冷冻后 ,以方法A脱出抗冻保护剂 ,孵化囊胚恢复率最高值为 87 2 % (P <0 0 5 )。当采用EDFS30和EDFS4 0对孵化囊胚冷冻保存后 ,以方法C脱出抗冻保护剂 ,恢复率分别高达 97 8%和 93 3% (P >0 0 5 )。利用细管法和OPS法 2种最佳冷冻 -解冻组获得的 133和 15 4枚胚胎 ,分别移植给 12和 10只假妊娠 3～4d的受体母鼠。使 2种冷冻方法均有 6只妊娠 ,各产仔 2 2和 36只 ,产仔率分别为 35 5 %和 39 1% ,与对照组(39 8% )差异均不显著 (P >0 0 5 )。证明 2种方法对胚胎冷冻后均起到了保护作用。

小鼠2-细胞胚胎细管法和OPS法玻璃化冷冻保存技术的研究

本试验在室温 (2 0℃和 2 5℃ )条件下 ,利用不同浓度的玻璃化溶液 (EFS和EDFS) ,对小鼠 2 细胞胚胎进行细管法和OPS法玻璃化冷冻保存。在 2 0℃室温条件下 ,用EFS4 0平衡 1min细管一步法冷冻 ,解冻后囊胚发育率仅为35 .0 % ,和新鲜 2 细胞体外培养的对照组 (6 5 .0 % )的差异极显著 (P <0 .0 1)。当 2 细胞胚胎在 10 %EG +10 %D溶液中预处理 5min ,再移入EDFS中平衡 30s二步法冷冻保存 ,解冻后囊胚发育率达 4 7.8%～ 4 8.8% ;当室温升至2 5℃时 ,二步法冷冻保存后 2 细胞的囊胚发育率达到 5 2 .2 % ,与对照组无显著差异 (P >0 .0 5 )。改用OPS二步法EFS30冷冻组保存后的 2 细胞胚胎的囊胚发育率高达 6 2 .2 % ,为试验中的最佳组。

猪胚胎的OPS玻璃化冷冻

以广西巴马小型猪为供体，采用超数排卵技术，采集5～6日龄具有完整透明带的胚胎（囊胚／桑葚胚），采用二步法OPS（Open pulled straw）玻璃化冷冻技术进行保存，即胚胎首先在冷冻液1（TCM199＋20％FBS＋10％EG＋10％DMSO）中平衡3min，然后立即转入冷冻液2（TCM199＋20％FBS＋20％EG＋20％DMSO＋0．4mol／LSUC）中并在1min内装管（每管含2～6枚胚胎），直接投入液氮保存；3个月后解冻移植给8头受体母猪（每头移入25～26枚胚胎），其中1头怀孕产仔（8头活仔），获得猪胚胎超低温（-196C）冷冻后代。

绵羊体外成熟卵母细胞OPS法玻璃化冷冻保存试验

研究以EDFS30为玻璃化冷冻液,以卵母细胞解冻后孤雌激活和体外受精后的卵裂率、囊胚发育率作为评价指标,探讨了以OPS法玻璃化冷冻保存体外成熟绵羊卵母细胞的效果。结果表明:卵母细胞孤雌激活后的卵裂率,冷冻组(64.2%)显著(P<0.05)低于毒性组(76.7%)和对照组(79.1%),而毒性组和对照组无显著(P>0.05)差异;卵母细胞孤雌激活后的囊胚发育率,冷冻组(4.2%)和毒性组(5.8%)均显著(P<0.05)低于对照组(20.2%),毒性组和冷冻组无显著(P>0.05)差异;冷冻组和毒性试验组卵母细胞体外受精后的卵裂率和囊胚发育率(67.6%和7.1%;62.3%和9.1%)均显著低于对照组(78.4%和28.4%)(P<0.05),而毒性组和冷冻组无显著(P>0.05)差异。可见以EDFS30为玻璃化冷冻液,采用OPS法冷冻保存绵羊体外成熟卵母细胞会在一定程度上降低其受精能力和胚胎发育能力。

宫颈癌盆腔外照射经OPS引导提高摆位精确度临床研究

目的:探讨宫颈癌盆腔外照射治疗中OPS系统应用价值。方法:选取61例宫颈癌患者,随机分为实验组、对照组,实验组使用OPS辅助CBCT验证,对照组仅使用CBCT验证。CBCT采集治疗前图像信息,匹配实时摆位图像与定位图像,分析比较两组X、Y、Z三轴误差数据,对放疗中及放疗后所致不良反应及疗效进行临床比较分析。结果:实验组摆位误差X(2.9±0.8)mm、Y(3.9±1.1)mm、Z(2.0±0.9)mm小于对照组误差X(4.3±1.4)mm、Y(5.9±1.7)mm、Z(3.2±1.5)mm。实验组骨髓抑制、急性肠道症状等可观测不良反应大于Ⅰ级的患者数明显少于对照组。实验组在X、Y、Z三个方向上的值分别是4.03 mm、5.45 mm、3.65 mm;对照组在X、Y、Z三个方向上值分别是6.51 mm、8.38 mm、5.49 mm(P<0.05)。结论:在宫颈癌放疗摆位中引入OPS可有效提高摆位精确度,降低摆位误差;在不降低治疗疗效情况下,有效减轻了放疗期间不良反应。

基于OPS技术的超高速光孤子通信实现方案

通过对光分组交换(OPS)技术的讨论,实现了多交换节点的超高速光孤子通信传输方案。在详细阐述光孤子通信系统中光分组形式和OPS节点结构的基础上,进一步分析了传输方案实现的可行性,最后对该技术的优劣进行分析。指出,基于OPS技术的光孤子通信是实现未来全光网的首选。

OPS法玻璃化冷冻牛卵母细胞和囊胚

本文报道了利用拉细开口型细管 (Open Pulled Straw,OPS)方法进行玻璃化冷冻保存体外成熟(IVM)的牛卵母细胞及体外生产 (IVP)的牛囊胚的实验结果。实验 1的牛卵母细胞冷冻处理分 2组 ,组 1(G1 )是将卵母细胞在 IVM2 1 h时去除部分卵丘细胞后马上进行冷冻处理。组 2 (G2 )卵母细胞在 IVM6h时去除部分卵丘细胞 ,然后继续培养至 2 2 h冷冻 ;冷冻后的卵母细胞在液氮中保存 0 .5～ 2 h后解冻再继续 IVM1 h后与正常 IVM2 4h的对照组卵母细胞一起进行体外受精 (IVF)处理。实验 2则冷冻了来自IVP的 6、 7日龄的牛囊胚。结果显示 ,G1的卵母细胞 IVF后 8d的囊胚率 (2 2 .8% ,2 6/1 1 4)和孵化囊胚率 (1 4.9% ,1 7/1 1 4)都极显著地高于 G2 (分别为 2 .9% ,5 /1 71和 0 .5 % ,1 /1 71 ,P<0 .0 0 1 ) ;但两处理组的受精卵裂率差别不大 (分别为 48.2 %和 41 .5 % ,P>0 .3 )。冷冻第 6d和第 7d的体外囊胚 ,其冻后存活率和囊胚孵化率分别为 92 .7%、 89.2 %和 83 .6%、 66.7%。结果表明 ,利用

小鼠4-细胞胚胎OPS法冷冻保存技术

在25℃室温和37℃恒温台条件下，利用玻璃化冷冻溶液EFS30、EFS40、EDFS30或EDFS40，对小鼠4-细胞胚胎进行玻璃化冷冻保存．以解冻后培养72h的囊胚发育率为其体外发育能力的考核指标，同时对解冻后培养1～3h的胚胎进行移植以判定其体内发育潜力。开放式拉长塑料细管（OPS）二步法冷冻保存，即胚胎首先移入预处理液（10％EG或10％EG＋10％DMSO）中平衡30s，再移入玻璃化溶液中洗涤后吸入OPS管中，分别经35、30或25s后直接投入液氮中冷冻保存。一步法冷冻保存则无需预处理液处理。结果表明，小鼠胚胎4-细胞一步法和二步法冷冻后囊胚最高发育率分别为87．7％和88.6％，与对照组（93.0％）差异不显著（P〉0．05）。利用最佳冷冻组获得的143枚胚胎移植于12只假妊娠50～60h的受体母鼠，结果有4只妊娠产仔17只，妊娠产仔率为42．5％（17／40），与对照组59．4％（19／32）差并不显著（P〉0.05）。

OPS玻璃化冷冻小鼠MII期卵效果观察

目的 以小鼠为研究模型 ,探讨MII期卵母细胞冷冻后纺锤体和染色体改变的有效观察方法。研究OPS玻璃化冻存成熟卵的可行性。 方法 运用激光扫描共聚焦显微镜 (LSCM)的光学切片和三维图像重建技术 ,系统研究了OPS玻璃化冷冻对小鼠MII期卵纺锤体和染色体的影响。 结果 冷冻组卵复苏后存活率达 5 8% ,纺锤体和染色体形态正常率分别为 46%和 5 2 % ,与对照组 ( 76%和 70 % )相比 ,差异具显著性 (P <0 0 5 )。暴露组卵纺锤体和染色体结构正常率较对照组略有下降 ,但无统计学差异。 结论 LSCM能够清晰有效地观察冷冻对卵母细胞纺锤体和染色体影响。

OPS两步法玻璃化冷冻小鼠8-细胞胚胎生存发育率的研究

目的为实验动物、家畜和人类胚胎的冷冻保存探索简易、高效的玻璃化冷冻程序。方法以小鼠8-细胞胚胎为材料,在25℃室温和37℃恒温台条件下,利用玻璃化冷冻溶液EDFS30, 对小鼠8-细胞胚胎进行玻璃化冷冻保存,解冻后培养60 h后的囊胚发育率为其体外发育能力的考核指标,同时对解冻后培养1-3 h的胚胎进行移植以判定其体内发育潜力。OPS(Open-pulled straw)两步法冷冻保存,即胚胎首先移入预处理液(10％EG+10％DMSO)中平衡30 s,再移入玻璃化溶液中吸入OPS平衡15、25、35、45和60 s连同胚胎直接投入液氮中冷冻保存。结果小鼠胚胎8-细胞冷冻后囊胚发育率最佳组高达95．6％,与对照组(96．8％)差异无统计学意义(P> 0．05)。利用最佳冷冻组获得的165枚胚胎移植于11只假孕63-67 h的受体母鼠,结果有4只妊娠,产仔23只,妊娠产仔率为38．3％(23/60),与对照组37．9％(22/58)差异无统计学意义(P>0．05)。结论 EDFS33为玻璃化冷冻液,OPS两步法能有效地冷冻保存小鼠8-细胞胚胎。

小鼠未成熟卵母细胞OPS法冷冻保存技术的研究

试验用OPS法对小鼠未成熟卵母细胞进行玻璃化冷冻保存研究,并对解冻后小鼠未成熟卵母细胞的成熟情况进行观察。结果表明:小鼠未成熟卵母细胞在10%EG、10%DMSO前处理后,在EFS30、EFS40、EDFS30和EDFS40中平衡15～45s进行冷冻保存,使卵母细胞解冻后的形态正常率最高达92.4%,与对照组无显著差异(P>0.05),成熟率达40.5%。

OPS法与细管法冷冻小鼠胚胎的研究

用0.25 mL细管和OPS(open pu lled straw)管,对小鼠囊胚进行玻璃化冷冻,以比较2种方法的冷冻效果。结果表明,冷冻-解冻胚胎体外培养24 h后,2组的发育率分别为63.3%(31/49)和71.4%(55/77);OPS法在冻胚发育率上稍优于细管法,但无统计学差异(P>0.05);2组冷冻胚胎的培养发育率均显著低于鲜胚培养组94.3%的发育率(P<0.05)。采用OPS法冷冻小鼠8-细胞胚,其冻后培养发育率为55.6%,似乎要低于囊胚冷冻后的培养发育率,但差异不显著(P>0.05)。

欧洲专利局OPS服务专利法律状态数据结构分析

对专利法律状态数据结构的解析是进行专利法律状态数据加工的基础。本文以欧洲专利局(EPO)开放专利服务(OPS)提供的专利法律状态XML数据为研究对象,介绍了OPS专利法律状态数据获取的方法以及当前使用的法律状态数据格式,解析了XML数据结构,并分析了重点数据元素,为EPO OPS法律状态数据加工提供参考。

构架原油长输管道SCADA/OPS系统的探讨

结合国内石油集输行业的特点,对长输管道(站库)的SCADA系统进行初步探讨。主要包括SCADA/OPS系统及简要分析,包括由PLC/RTU/LEP等为控制器的硬件构成及框架组成,常规的通信方式及其特点比较;系统功能主要包括控制中心功能,现场站控系统功能,系统辅助功能,以及目前国内系统基本功能的应用情况;在系统安全上,主要对Internet和Intranet接入进行了重点分析和风险评估等。

糖尿病患者闪光ERG、OPs和图形VEP的联合检测

目的 探讨糖尿病患者早期F -ERG、OPs和P -VEP的改变情况。方法 本实验分三组 :①观察A组 :单纯型糖尿病视网膜病变 (DR)患者 2 2例 (44只眼 ) ;②观察B组 :无DR的糖尿病患者 42例 (84只眼 ) ;③对照组 :正常受检查 32例 (64只眼 )。所有受检者均常规检测瞬态F -ERG、OPs和P -VEP ,记录各项检测指标。结果 与正常组比较 :①观察A组 :用F -ERG、OPs和P -VEP检测均发现有显著差异 (P <0 .0 5) ;②观察B组 :用F -ERG检测未发现有显著差异 (P >0 .0 5) ,用OPs检测发现第 1、2子波波幅明显降低 (P <0 .0 5) ,各子波的潜伏期明显延长 (P <0 .0 5)。用P -VEP检测发现P1 0 0潜伏期延长 (P <0 .0 5)、波幅降低 (P <0 .0 5)。结论 用OPs和P -VEP联合检测 ,可以早期发现糖尿病对视网膜的损害。

华数DevOps建设之路

随着Docker的兴起,DevOps的落地成为现实,华数通过桌面云、容器云、持续集成等一系列的建设,将华数原有Dev VS Ops模式变更为DevOps模式更快、更高效,有效推动华数的快速发展。