戊型肝炎病毒ORF2抗原的制备及其免疫原性评价

目的制备戊型肝炎病毒(hepatitis E virus,HEV)ORF2抗原,并对其免疫原性进行分析。方法通过基因合成获得HEV ORF2目的基因,构建重组杆状病毒,并在sf9昆虫细胞中优化表达;采用超声、硫酸铵沉淀及层析纯化HEV ORF2蛋白,免疫小鼠分析其免疫原性。结果制备的重组杆状病毒滴度为1×108 PFU/m L;重组蛋白表达条件MOI为1,收获时间为5 d时,表达量最高为20 mg/L;通过纯化获得HEV ORF2蛋白纯度> 95%;其疫苗组血清特异性抗体效价与PBS对照组比较差异有统计学意义(P <0. 05)。结论成功表达并纯化了HEV ORF2蛋白,该纯化方法可获得纯度较高的目的蛋白,且制备的HEV ORF2蛋白具有很好的免疫原性,可用于制备和开发预防性疫苗。

戊型肝炎病毒ORF2编码多肽抗原的表达及其特性研究

迄今所发现的唯一的戊型肝炎病毒 (HEV)中和表位定位于开放读码框架 2 (ORF2 )编码蛋白的第 5 78和第 6 0 7氨基酸(aa)之间的区域。将对应于此区域的基因片段通过一段柔性的甘氨酸铰链与乙型肝炎病毒 (HBV)表面抗原 (HBsAg)基因的 3’端相连 ,构建成HBV/HEV融合基因。该融合基因在毕赤酵母细胞内的表达产物为分子量约 2 9kDa的融合蛋白 ,具有组装成嵌合病毒样颗粒 (VLP)的能力。此嵌合VLP具有与HBsAgVLP相似的特性且保留了天然HBV/HEV双重抗原性。对此嵌合VLP特性的初步研究提示其可能具有HBV/HEV双价重组疫苗的潜在应用前景。

戊型肝炎病毒抗原研究进展

戊型肝炎病毒(ＨＥＶ)为线状单股正链ＲＮＡ病毒,基因组全长约7.5ｋｂ(7.2～7.6ｋｂ),编码2400～2533个氨基酸,由5′端非结构区(ＮＳ)和3′端结构区(Ｓ)组成,3′端带一个由150～200个腺苷酸残基组成的ｐｏｌｙＡ尾巴。ＨＥＶ基因组含3个开放读码框架(ＯＲＦｓ),ＯＲＦ1位?..

戊型肝炎

戊型肝炎病毒ORF2抗原在抗．HEV ELISA检测中的应用——阮冰等(浙江杭州市浙江大学医学院附属第一医院卫生部传染病重点实验室310003)《感染病杂志》2004，2(4)：167-169[比较重组蛋白与合成肽抗原建立的酶联免疫吸附试验(ELISA)在戊型肝炎实验室诊断中的应用价值。方法：选择戊型肝炎病毒第二开放读码框架(ORF2)，分别采用重组蛋白及合成肽抗原，建立ELISA，同时检测97份戊型肝炎急性期患者，47份甲、乙、丙、丁、庚型肝炎患者及120份健康供血者的血清抗．HEV。结果：重组蛋白ELISA、合成肽ELISA与Genelabs重组抗原ELISA试剂盒检测结果的总符合率分别为96．9％和92％；重组蛋白ELISA与合成肽ELISA的一致率为91％；