水痘带状疱疹病毒野毒株和疫苗株区分方法研究

目的:建立水痘带状疱疹病毒野毒株和疫苗株的聚合酶链反应和限制性片段多态性(PCRRFLP)区分方法。方法:对疫苗株和水痘临床患者疱疹液进行开放阅读框62(ORF62)区基因序列测定,确定可用于野毒株和疫苗株区分的单核苷酸的多态性(SNP)位点。PCR扩增含SmaⅠ、Bss HⅡ和NaeⅠ酶切位点的基因(DNA)片段后进行限制性内切酶酶切,利用酶切图谱区分野毒株和疫苗株。结果:用PCR-RFLP分析疫苗株和疱疹液,疫苗株酶切图谱为SmaⅠ^+Bss HⅡ^+NaeⅠ^+,疱疹液酶切图谱为SmaⅠ^-Bss HⅡ^-NaeⅠ^-。结论:基于ORF62区的106262(SmaⅠ)、107136(Bss HⅡ)、107252(NaeⅠ)的PCR-RFLP可有效区分野毒株和疫苗株。