抑制小鼠成肌细胞O-GlcNAc对其细胞周期和细胞分化的影响

成肌细胞的高效增殖分化对于畜牧业肉产品生产具有重要意义。试验旨在通过特异性抑制剂OSMI-1抑制氧连接的β-N-乙酰葡萄糖胺(O-linked N-acetylglucosamine glycosylation,O-GlcNAc)修饰检测小鼠成肌细胞系(C2C12)细胞周期和分化。试验以小鼠C2C12细胞为试验对象,设置空白组、DMSO组和OSMI-1/DMSO组,采用Western Blot确定OSMI-1对O-GlcNAc修饰抑制,采用流式细胞术检测细胞周期变化,使用免疫荧光检测肌管分化标志(myosin heavy chain,Myhc)和qRT-PCR检测分化因子(myogenic differentiation,Myod)及Myhc基因表达水平,分析O-GlcNAc对C2C12肌管分化的影响。结果表明:与空白组和DMSO组相比,OSMI-1/DMSO组24 h和48 h显著抑制了C2C12的O-GlcNAc修饰水平,其细胞周期G2细胞比例显著下降(P<0.05);分化过程中抑制O-GlcNAc修饰水平,免疫荧光显示C2C12分化标志Myhc表达减少,Myod和Myhc的转录和翻译水平显著下降(P<0.05)。说明低水平O-GlcNAc修饰抑制C2C12细胞的细胞周期和细胞分化。