人源CLC-7/Ostm1复合物结构揭示一种新构象

CLC-7是位于溶酶体膜上的Cl^(-)/H^(+)交换转运蛋白。CLC-7及其β亚基Ostm1的缺陷均会导致骨硬化症和神经退行性疾病。本文解析了一个具有3.6Å分辨率的人源CLC-7/Ostm1复合物的冷冻电镜结构。该结构揭示了CLC-7/Ostm1异源四聚体的一种新构象,其中CLC-7的胞质结构域可能由于高度柔性而缺失。柔性的细胞质结构域无法限制CLC-7的跨膜结构域,从而允许两个亚基相对远离,使得CLC-7跨膜结构域的二聚界面与已知具有稳定胞质结构域的结构相比减小了约一半。这种二聚界面的变化影响了多个骨硬化症相关残基的相互作用。

miR-106a-5p靶向OSTM1对阿尔茨海默病细胞模型的保护作用

目的研究miR-106a-5p对阿尔茨海默病(AD)细胞模型存活率和凋亡的影响及潜在分子机制。方法实时荧光定量-聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测OSTM1和miR-106a-5p mRNA的表达,噻唑蓝(MTT)法测定AD细胞的存活率,流式细胞术测定AD细胞凋亡率,Western印迹检测OSTM1蛋白表达,双荧光素酶报告系统验证miR-106a-5p与OSTM1的调控关系。结果与对照组相比,模型组miR-106a-5p表达量显著下降(P<0.05),OSTM1 mRNA和蛋白表达量均显著升高(P<0.05);过表达miR-106a-5p和抑制OSTM1表达均可提高AD细胞存活率,抑制AD细胞凋亡;双荧光素酶报告系统结果表明,miR-106a-5p靶向负调控OSTM1的表达;过表达miR-106a-5p会降低OSTM1的表达,抑制miR-106a-5p表达则会提高OSTM1的表达;过表达OSTM1逆转了上调miR-106a-5p对AD细胞存活和凋亡的影响作用。结论miR-106a-5p通过抑制OSTM1表达提高AD细胞存活率,抑制细胞凋亡。miR-106a-5p有望成为AD临床治疗的分子靶点。

MITF在破骨细胞中的作用研究进展

MITF(microphthalmia-associated transcription factor,MITF)是小眼畸形相关转录因子,它在破骨细胞中的作用成为近几年骨科领域的研究热点。不断有研究证实,MITF调节破骨细胞中众多功能相关基因的转录,包括抗酒石酸酸性磷酸酶(tartrateresistant acid phosphatase,TRAP),组织蛋白酶K(Cathepsin K),破骨细胞相关受体(osteoclast-associated receptor,OSCAR),氯离子通道-7(chloride channel-7,Clcn7),骨硬化相关跨膜蛋白-1(osteopetrosis-associated transmembrane protein 1,Ostm1)和E-钙粘蛋白(E-cadherin)等。无论在MITFmi/mi突变的小鼠模型还是来源于MITFmi/mi突变的小鼠体外培养的破骨样细胞中,我们都能检测到上述与破骨细胞众多功能相关基因的表达都会受到明显抑制,导致破骨细胞功能异常,小鼠患有严重的骨硬化病。因为小鼠和人类的MITF基因序列具有很高的同源性,所以理解MITF调控系统对小鼠破骨细胞的作用也将有助于我们阐明妇女绝经后的骨质疏松症、骨硬化病或者发生在多发性骨髓瘤患者身上的溶骨性骨质破坏和高钙血症等人类疾病的分子作用机制。现就MITF在破骨细胞中的作用做一综述。