OTUB1在90例卵巢黏液性肿瘤中的表达分析

背景与目的:卵巢黏液性肿瘤是卵巢上皮性肿瘤的主要亚型之一,其恶变机制目前尚未明确。泛素化是人体主要的翻译后修饰机制,并与肿瘤密切相关。去泛素化酶可通过逆转泛素化过程从而影响肿瘤的发生、发展。该研究旨在分析编码人体最主要的去泛素化酶的癌基因泛素醛结合物1(OTU deubiquitinase,ubiquitin aldehyde binding 1,OTUB1)在卵巢黏液性肿瘤中的蛋白表达及临床应用。方法:收集2010—2015年复旦大学附属妇产科医院病理科诊断的卵巢良性黏液性囊腺瘤、卵巢交界性黏液性肿瘤及卵巢原发性黏液性癌病例共90例,收集临床病理资料,完成OTUB1的免疫组织化学法表达实验并作统计分析。结果:90例卵巢黏液性肿瘤中,卵巢良性黏液性囊腺瘤有14例,卵巢交界性黏液性肿瘤有17例,卵巢原发性黏液性癌有59例。OTUB1在卵巢原发性黏液性癌的蛋白表达率及阳性程度显著高于卵巢良性黏液性囊腺瘤(P<0.01);OTUB1在卵巢交界性黏液性肿瘤中上皮内癌的阳性率显著高于肠型交界性黏液性肿瘤(P<0.01);随着FIGO分期增高,OTUB1的阳性率及阳性程度增加(P<0.05);OTUB1在输卵管有累及的患者中表达率及阳性程度均高于未累及者(P<0.05);OTUB1在子宫和大网膜累及的患者中阳性率及阳性程度均高于未累及者(P<0.05);OTUB1在有淋巴结转移的患者中表达率及阳性程度均高于无转移者(P<0.05)。结论:OTUB1在卵巢原发性黏液性癌中的蛋白表达水平明显高于卵巢良性黏液性囊腺瘤,并且和FIGO分期及肿瘤侵袭转移性高度相关。在临床病理中可将OTUB1作为卵巢黏液性肿瘤恶变与否的评价指标及肿瘤进展的辅助判别指标。

非小细胞肺癌中卵巢肿瘤泛素异肽酶1与程序性死亡受体-1配体的表达相关性

目的探讨非小细胞肺癌(NSCLC)中卵巢肿瘤泛素异肽酶1(OTUB1)与程序性死亡受体-1配体(PD-L1)的相关性。方法分析肿瘤基因组数据库(TCGA)中NSCLC与癌旁正常组织OTUB1 mRNA的差异性。基于基因表达谱数据动态分析(GEPIA)探讨NSCLC中OTUB1与PD-L1 mRNA表达相关性。免疫组化法检测46例NSCLC及41例癌旁正常组织蜡块OTUB1及PD-L1蛋白表达,收集临床病例数据及随访资料。分析OTUB1在癌组织与癌旁组织中的表达差异,OTUB1与PD-L1相关性、临床病理特征的关系以及无复发生存期(RFS)预测意义。结果 NSCLC与癌旁正常组织的OTUB1 mRNA及蛋白表达差异均有统计学意义(P<0.05)。NSCLC的OTUB1与PD-L1 mRNA无相关性(P>0.05),但两者蛋白表达有相关性(P=0.029)。OTUB1与TNM分期有相关性(P=0.039),与年龄、吸烟史、分化程度、转移淋巴结数及病理类型无相关性(P>0.05)。Kaplan-Meier分析显示,TNM分期(P<0.001)、转移淋巴结数(P=0.001)及分化程度(P=0.042)是RFS的影响因素;OTUB1阴性及阳性中位RFS分别是18、19个月,差异无统计学意义(P>0.05)。COX多因素分析结果提示,分化程度(P=0.005)及TNM分期(P=0.006)是影响RFS的独立危险因素。结论 NSCLC中OTUB1 mRNA及蛋白表达均高于癌旁正常组织。在蛋白水平方面,OTUB1与PD-L1呈正相关。OTUB1表达与TNM分期相关。

OTUB2表达下调对胃癌细胞增殖、迁移、侵袭能力及PI3K/AKT信号通路的影响

目的探讨含OTU结构域的泛素醛结合蛋白2(OTUB2)表达下调对胃癌细胞增殖、迁移、侵袭能力及磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)信号通路的影响。方法采用Lipofectmine 2000转染试剂向MGC-803细胞中转染OTUB2小干扰RNA(si-OTUB2)序列(si-OTUB2组)和si-NC序列(si-NC组),以不进行任何转染的胃癌MGC-803细胞作为空白对照组。分别采用实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法(Western blot)检测细胞中OTUB2 mRNA及蛋白的表达水平。采用CCK-8法检测细胞增殖能力,Transwell小室检测细胞迁移和侵袭能力,Western blot检测增殖细胞核抗原(PCNA)、E-钙黏蛋白(E-cadherin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)、AKT、磷酸化蛋白激酶B(p-AKT)蛋白表达水平。结果与空白对照组和si-NC组比较,si-OTUB2组细胞中OTUB2 mRNA及蛋白表达水平降低(P<0.05),细胞增殖能力减弱(P<0.05),细胞迁移数和侵袭数减少(P<0.05),细胞中PCNA、N-cadherin和p-AKT蛋白表达水平降低(P<0.05),E-cadherin蛋白表达水平升高(P<0.05)。结论下调OTUB2可以抑制胃癌细胞的增殖、迁移、侵袭,其作用机制可能与抑制PI3K/AKT信号通路有关。