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督脉电针对慢性脑缺血大鼠OX2R及其配体表达的影响
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作者 刘瑜 陈洪琳 +2 位作者 罗正凯 王淑荣 刘丹 《中医药学报》 CAS 2017年第1期57-59,共3页
目的:研究督脉电针在慢性脑缺血时大鼠脑食欲素受体-2(OX2R)及其配体在不同时间点缺血后的变化。方法:实验中运用分次结扎双侧颈总动脉法建立慢性脑缺血模型,将Wistar大鼠分4组,造模成功后给予督脉电针干预,免疫组织化学法观察OX2R的表... 目的:研究督脉电针在慢性脑缺血时大鼠脑食欲素受体-2(OX2R)及其配体在不同时间点缺血后的变化。方法:实验中运用分次结扎双侧颈总动脉法建立慢性脑缺血模型,将Wistar大鼠分4组,造模成功后给予督脉电针干预,免疫组织化学法观察OX2R的表达,同时运用ELISA技术检测各组大鼠额叶皮质区Orexin-A和Orexin-B的总含量变化。结果:1个月、2个月时,模型组OX2R及其配体表达高于正常组,同时呈递增趋势;在相同时间进行组间比较,1个月时,模型组和针刺治疗组OX2R及其配体的表达无显著差别,立即针刺组OX2R及其配体的表达较模型组有升高;2个月时针刺治疗组OX2R及其配体表达较模型组有明显升高,而立即针刺组与针刺治疗组相比OX2R及其配体表达有升高。结论:实验观察到OX2R及其配体的表达在1个月和2个月时随着时间延长而升高,经过督脉电针干预后促进了OX2R及其配体表达,同时观察到早期干预对OX2R及其配体表达的影响优于针刺治疗组。 展开更多
关键词 督脉电针 慢性脑缺血 OREXIN ox2r
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慢性脑缺血大鼠脑OX_2R的表达 被引量:5
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作者 吕瑞娟 张博爱 贾延劼 《中国实用神经疾病杂志》 2007年第1期78-80,共3页
目的研究慢性脑缺血Orexin受体-2(OX2R)的表达。方法通过结扎双侧颈总动脉建立脑缺血模型;用水迷宫进行行为学评价;双标免疫荧光观察OX2R的表达。结果缺血15d时大鼠的学习记忆能力明显减退,1个月、2个月较缺血15d模型组学习记忆能力有... 目的研究慢性脑缺血Orexin受体-2(OX2R)的表达。方法通过结扎双侧颈总动脉建立脑缺血模型;用水迷宫进行行为学评价;双标免疫荧光观察OX2R的表达。结果缺血15d时大鼠的学习记忆能力明显减退,1个月、2个月较缺血15d模型组学习记忆能力有所好转。同时,缺血15d时OX2R在神经元的表达明显增高,1个月时OX2R的表达较15d时明显下降,2个月时OX2R的表达再次增高;此外,OX2R在神经纤维亦有表达其变化趋势同神经元。组织学示15d时部分细胞萎缩,1个月时大部分细胞变形萎缩,2月时部分细胞形态恢复正常。结论提示脑缺血的早期OX2R可能有诱导细胞凋亡的作用,而缺血的后期有神经保护作用。 展开更多
关键词 慢性脑缺血 OREXIN ox2r 大鼠
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Orexin系统与学习记忆 被引量:2
3
作者 池恒 黄伟伟 唐吉友 《国际神经病学神经外科学杂志》 北大核心 2016年第1期69-72,共4页
Orexin系统在学习记忆以及睡眠-觉醒中具有重要的作用。Orexin与其受体结合后通过多种途径,如Gq蛋白/PLC/PKC途径,乙酰胆碱能、谷氨酸能、GABA能途径,离子途径等影响海马的学习记忆功能。睡眠剥夺可影响脑内Orexin-A水平,而睡眠剥夺本... Orexin系统在学习记忆以及睡眠-觉醒中具有重要的作用。Orexin与其受体结合后通过多种途径,如Gq蛋白/PLC/PKC途径,乙酰胆碱能、谷氨酸能、GABA能途径,离子途径等影响海马的学习记忆功能。睡眠剥夺可影响脑内Orexin-A水平,而睡眠剥夺本身同时又可影响海马的学习记忆功能。因此,研究Orexin-A及其受体对睡眠-觉醒的调节并参与学习记忆的作用机制,对寻找新靶点防治睡眠障碍以及所造成的学习记忆功能损害具有重要的临床意义。 展开更多
关键词 OREXIN-A OX1R/ox2r 学习记忆 海马 皮质
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猪食欲肽2受体突变体真核表达载体的构建及其对cAMP信号通路的影响
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作者 刘敏 闵天奇 +3 位作者 张海洁 谢华杰 崔子鹤 王志强 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2018年第7期1768-1774,共7页
试验旨在构建猪食欲肽2受体(porcine orexin 2receptor,pOX2R)突变体的真核表达载体,探究其野生型与突变体的基础药理学活性差异。以pcDNA3.1(+)-myc/pOX2R野生型质粒为模板,设计特异性引物单点突变构建4种突变体:pcDNA3.1(+)-myc/pOX2R... 试验旨在构建猪食欲肽2受体(porcine orexin 2receptor,pOX2R)突变体的真核表达载体,探究其野生型与突变体的基础药理学活性差异。以pcDNA3.1(+)-myc/pOX2R野生型质粒为模板,设计特异性引物单点突变构建4种突变体:pcDNA3.1(+)-myc/pOX2R-P10S、pcDNA3.1(+)-myc/pOX2R-P11T、pcDNA3.1(+)-myc/pOX2R-V308I和pcDNA3.1(+)-myc/pOX2R-T401I,将pcDNA3.1(+)-myc/pOX2R野生型和4种突变体分别瞬时转染HEK293T细胞,利用双荧光素酶报告基因检测法测定pOX2R野生型及突变体的基础活性,并检测不同浓度激动剂作用下细胞内cAMP水平,随后用内源性激动剂食欲肽A(OXA)及食欲肽B(OXB)分别对野生型及突变体进行刺激。结果显示,4个突变体构建成功,pOX2R的第10、11、308和401位氨基酸分别突变为丝氨酸、苏氨酸、异亮氨酸和缬氨酸。将pOX2R的野生型及4个突变体瞬时转染HEK293T细胞后,野生型与突变体的基础活性值无显著差异(P>0.05),表明这4个位点的氨基酸突变对其受体的基础表达信号无显著影响。与野生型受体相比,突变型受体对激动剂OXB的响应无显著差异(P>0.05),而突变体P10S、P11T和T401I对激动剂OXA的响应EC50显著降低(P<0.05),其Rmax无显著差异(P>0.05)。推测第10、11和401位点的氨基酸突变可能影响了激动剂OXA与受体的结合,降低了激动剂的激动效应。本研究结果为进一步体外研究pOX2R的功能奠定了基础。 展开更多
关键词 食欲肽2受体(ox2r)基因 突变体 CAMP
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食欲素2型受体点突变体表达载体的构建
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作者 刘明慧 王春梅 陈京 《济宁医学院学报》 2017年第6期389-392,共4页
目的构建带有黄色荧光蛋白突变体Venus标签的食欲素2型受体(Orexin type 2 receptor,OX2R)点突变的真核表达载体,拟用于后续明确突变位点在OX2R介导的信号通路中的作用。方法先根据OX2R的基因序列设计带有点突变及酶切位点(Hind Ⅲ和Bam... 目的构建带有黄色荧光蛋白突变体Venus标签的食欲素2型受体(Orexin type 2 receptor,OX2R)点突变的真核表达载体,拟用于后续明确突变位点在OX2R介导的信号通路中的作用。方法先根据OX2R的基因序列设计带有点突变及酶切位点(Hind Ⅲ和Bam HI)的特异性引物,然后利用聚合酶链式反应(PCR)技术,以Human OX2R为模板,构建OX2R的突变体。用Hind Ⅲ和Bam HI对产物及质粒pVenus-N1进行双酶切,然后回收,连接,转化,获得重组的突变体质粒。并对重组质粒进行酶切与测序鉴定。最后将突变质粒转染HEK293T细胞,利用超高分分辨率显微镜观察突变质粒的表达及定位。结果 PCR扩增到预期的目的基因片段,酶切与测序结果显示OX2R的突变载体构建成功。超高分分辨率显微镜观察到突变质粒与野生质粒均可在HEK293T细胞膜上表达。结论成功构建了OX2R点突变的表达载体,为进一步研究OX2R的关键位点及针对OX2R新药的开发奠定了基础。 展开更多
关键词 ox2r 点突变 表达载体 HEK293T细胞
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食欲素受体拮抗剂用于失眠症治疗的研究进展 被引量:3
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作者 潘英 倪海华 《中国基层医药》 CAS 2020年第9期1149-1152,共4页
近年来失眠的药物治疗已成为全球研究人员面临的挑战。用于治疗失眠症的常规治疗药物是苯二氮类(BZD)(和非BZD(也称为z-药物)、三环抗抑郁药(TCA)多塞平以及褪黑素激动剂,但由于这些药物的重大副作用(如:宿醉反应、依赖性、耐受性、反... 近年来失眠的药物治疗已成为全球研究人员面临的挑战。用于治疗失眠症的常规治疗药物是苯二氮类(BZD)(和非BZD(也称为z-药物)、三环抗抑郁药(TCA)多塞平以及褪黑素激动剂,但由于这些药物的重大副作用(如:宿醉反应、依赖性、耐受性、反弹失眠、肌肉酸痛、呼吸系统抑制、认知功能障碍和焦虑增加等),使得他们解决睡眠问题的潜力受到限制。最近研究发现,食欲素神经肽是调节觉醒与睡眠之间的转变的一种因子,可帮助从过渡状态转为觉醒状态,作为治疗睡眠障碍的可能治疗靶标,与常规治疗相比具有较小副作用的优点。笔者对食欲素受体拮抗剂用于失眠症治疗的研究进展进行综述。 展开更多
关键词 失眠症 OX1R ox2r 受体拮抗剂 食欲素
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氯丙咪嗪对大鼠增食素系统mRNA表达的影响
7
作者 樊红琨 李德恒 +2 位作者 张桂红 王书春 乔鹏 《医药论坛杂志》 2010年第12期17-19,22,共4页
目的观察皮下注射氯丙咪嗪(CLI)对成年大鼠增食素(orexin)系统各成分mRNA表达的影响。方法 16只大鼠被随机分为两组,注射等量的CLI(20 mg/kg)和生理盐水3次。第3次注射后2h将大鼠断头处死,收集脑组织行半定量RT-PCR测定额叶皮层、海马... 目的观察皮下注射氯丙咪嗪(CLI)对成年大鼠增食素(orexin)系统各成分mRNA表达的影响。方法 16只大鼠被随机分为两组,注射等量的CLI(20 mg/kg)和生理盐水3次。第3次注射后2h将大鼠断头处死,收集脑组织行半定量RT-PCR测定额叶皮层、海马、下丘脑orexin前体和orexin受体的mRNA。结果与生理盐水对照组相比,在额叶皮层、海马和下丘脑,CLI组的orexin前体和orexin2型受体(OX2R)mRNA表达显著减少;但orexin 1型受体(OX1R)mRNA在3个脑区的变化均不显著。结论 CLI抑制了大鼠脑内orexin前体和OX2RmRNA的表达。 展开更多
关键词 氯丙咪嗪 OREXIN OX1R ox2r
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左归丸对去卵巢大鼠下丘脑Orexin及其受体mRNA表达的影响 被引量:13
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作者 叶素敏 谭峰 +4 位作者 刘飞祥 徐道明 柴毅 张明玥 樊巧玲 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第18期9-15,共7页
目的:观察去卵巢骨质疏松症大鼠下丘脑食欲素(Orexin)及其受体mRNA水平,探讨绝经后骨质疏松症(PMOP)的发病机制以及左归丸的作用机制。方法:去势法建立骨质疏松症模型,32只雌性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、雌二醇组和左归丸组,每组... 目的:观察去卵巢骨质疏松症大鼠下丘脑食欲素(Orexin)及其受体mRNA水平,探讨绝经后骨质疏松症(PMOP)的发病机制以及左归丸的作用机制。方法:去势法建立骨质疏松症模型,32只雌性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、雌二醇组和左归丸组,每组8只。灌胃给药12周后,通过显微CT(μ-CT)检测股骨骨密度(BMD)和骨小梁微观三维形态结构,苏木精-伊红(HE)染色观察大鼠骨组织形态学变化,酶联免疫吸附测定(ELISA)检测大鼠血清骨转换标志物骨钙素(OCN),I型前胶原氨基端前肽(PINP),抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)含量,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测大鼠下丘脑Orexin,食欲素受体1(OX1R)和食欲素受体2(OX2R) mRNA表达水平。结果:与假手术组比较,μ-CT示模型组大鼠BMD,骨体积分数(BV/TV),骨小梁厚度(Tb. Th)和骨小梁数量(Tb. N)显著下降(P <0. 01)而骨小梁间隙(Tb. Sp)升高(P <0. 01),骨小梁明显稀疏,间距加宽,结构出现较大的空白区域;HE染色示骨小梁明显稀少,结构不完整,排列疏松,间距变宽;ELISA示血清OCN,PINP含量降低,TRAP含量升高(P <0. 01);下丘脑Orexin,OX1R,OX2R mRNA表达下调(P <0. 01)。经左归丸治疗后,大鼠BMD,BV/TV,Tb. Th,Tb. N升高(P <0. 05,P <0. 01),Tb. Sp降低(P <0. 01),骨小梁变密,空隙率下降,分布均匀,排列尚可,微观结构明显改善;血清OCN,PINP含量增加(P <0. 05,P <0. 01)而TRAP含量降低(P <0. 01);下丘脑Orexin,OX1R,OX2R mRNA表达明显上调(P <0. 05,P <0. 01)。结论:下丘脑Orexin及其受体mRNA水平降低可能是PMOP发病的机制之一。左归丸可通过上调下丘脑Orexin及其受体mRNA表达,从而纠正骨代谢失衡,改善骨小梁微结构,提高骨密度,发挥治疗PMOP的作用。 展开更多
关键词 左归丸 绝经后骨质疏松症 食欲素 食欲素受体1 食欲素受体2
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