基于TSLP-OX40L通路探讨麻黄附子细辛汤合肾四味汤对变应性鼻炎大鼠的影响

目的 观察麻黄附子细辛汤合肾四味汤对变应性鼻炎大鼠的保护作用及对胸腺基质淋巴细胞生成素-OX40配体(TSLP-OX40L)通路的影响。方法 将60只SD雄性大鼠随机分为正常组、模型组、麻黄附子细辛汤组、肾四味汤组、合方组和泼尼松龙组,每组10只。除正常组外,其余组大鼠均采用卵清蛋白+氢氧化铝腹腔注射结合卵清蛋白滴鼻方法建立变应性鼻炎模型。成模后,麻黄附子细辛汤组给予1.62 g/kg麻黄附子细辛汤灌胃,肾四味汤组给予10.80 g/kg肾四味汤灌胃,合方组给予12.42 g/kg麻黄附子细辛汤和肾四味汤灌胃,泼尼松龙组给予6.3 mg/kg醋酸泼尼松龙片悬液灌胃,正常组及模型组灌胃同等量的纯化水,均1次/d,连续灌胃14 d。观察大鼠一般情况,记录灌胃第7天和第14天大鼠鼻炎症状评分,HE染色观察鼻黏膜组织病理学形态,ELISA法检测血清白细胞介素-5(IL-5)、白细胞介素-4(IL-4)、白细胞介素-13(IL-13)水平,RT-PCR法和Western blot法分别检测鼻黏膜组织中TSLP、OX40L mRNA及蛋白表达情况。结果 灌胃第7天和第14天,模型组大鼠鼻炎症状评分均明显高于正常组(P均<0.05);病理观察显示鼻黏膜上皮细胞脱落,腺体和血管周围出现水肿和炎症;末次灌胃结束后,血清IL-5、IL-4、IL-13水平和鼻黏膜组织中TSLP、OX40L mRNA及蛋白相对表达量均明显高于正常组(P均<0.05)。灌胃第7天,合方组和泼尼松龙组大鼠鼻炎症状评分明显低于模型组、麻黄附子细辛汤组、肾四味汤组(P均<0.05);灌胃第14天,各药物组大鼠鼻炎症状评分均明显低于模型组(P均<0.05),且合方组、泼尼松龙组、麻黄附子细辛汤组均明显低于肾四味汤组(P均<0.05)。末次灌胃结束后,各药物组大鼠鼻黏膜组织病理变化均明显改善,血清IL-5、IL-4、IL-13水平和鼻黏膜组织中TSLP、OX40L mRNA及蛋白相对表达量均较模型组明显降低(P均<0.05),且合方组和泼尼松龙组血清IL-4、IL-5、IL-13水平及鼻黏膜组织中TSLP、OX40L mRNA和蛋白相对表达量均明显低于麻黄附子细辛汤组和肾四味汤组(P均<0.05)。麻黄附子细辛汤组TSLP mRNA和蛋白相对表达量均明显低于肾四味汤组(P均<0.05),OX40L mRNA和蛋白相对表达量均明显高于肾四味汤组(P均<0.05)。结论 麻黄附子细辛汤合肾四味汤可明显减轻变应性鼻炎大鼠的症状和鼻黏膜组织病变,其机制可能与调控TSLP-OX40L通路有关。

紫草素对特应性皮炎小鼠TSLP/OX40L通路及Th1/Th2平衡的影响

目的探究紫草素对特应性皮炎(AD)小鼠胸腺基质淋巴细胞生成素(TSLP)/OX40配体(OX40L)通路及辅助性T细胞(Th)1/Th2平衡的影响。方法采用局部外涂2,4-二硝基氟苯(DNFB)法制备AD小鼠模型。采用随机数字表法将模型小鼠分为模型组,紫草素低(20 mg/kg)、中(30 mg/kg)、高(40 mg/kg)剂量组和阳性对照组(泼尼松龙,10 mg/kg),每组15只;另取15只作为正常对照组。各给药组大鼠按10 mL/kg灌胃相应药物,模型组和正常对照组灌胃等体积溶剂,每日1次,连续15 d。分别于给药后第5、10和15天观察小鼠搔抓行为;于给药后第7、15天评价小鼠皮损状况;末次给药结束后,HE染色观察小鼠皮损组织病理学变化;流式细胞术检测小鼠外周血中Th1/Th2比例;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测小鼠血清中TSLP、肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-4和干扰素(IFN)-γ水平;Western blot法检测小鼠皮损组织TSLP和OX40L蛋白表达水平。结果与正常对照组相比,模型组小鼠搔抓行为增加,皮肤炎性损伤加重;皮损组织中表皮和真皮区域均有密集的炎性细胞浸润,表皮增厚;外周血Th2细胞、TSLP、TNF-α和IL-4水平以及皮损组织TSLP和OX40L蛋白表达水平显著升高(P<0.05),外周血Th1细胞、Th1/Th2比例和IFN-γ水平显著下降(P<0.05)。与模型组相比,紫草素低、中、高剂量组小鼠第5、10、15天的搔抓行为减少,第7、15天皮肤炎性损伤依次减轻(P<0.05);小鼠表皮和真皮区域炎性细胞浸润和表皮增厚依次减轻,外周血Th2细胞、TSLP、TNF-α和IL-4水平以及皮损组织TSLP和OX40L蛋白表达水平依次降低(P<0.05),Th1细胞、Th1/Th2比例和IFN-γ水平依次升高(P<0.05)。结论紫草素可能通过抑制TSLP/OX40L通路维持AD小鼠外周血中Th1/Th2平衡,改善皮肤炎性损伤。

血清OX40L水平与冠状动脉病变程度的相关性研究

目的探讨血清OX40配体蛋白(OX40L)水平与冠状动脉病变程度的相关性。方法选取冠脉造影检查者共458例作为研究对象,根据冠脉病变支数,分为1支病变组、2支病变组、3支病变组和冠脉造影正常的对照组(0支病变组),冠状动脉病变程度由冠状动脉病变支数和Gensini积分表示,对OX40L水平与冠脉病变程度进行单因素和多因素分析。结果①冠状动脉病变各组OX40L水平显著高于正常对照组(P<0.05或P<0.01),血清OX40L水平与冠状动脉病变程度和Gensini积分呈正相关(P<0.01)。②多元逐步回归分析结果显示在校正了年龄、高血压病史和高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)后,血清OX40L水平与冠状动脉病变总积分(r=4.763,P<O.01)仍然独立相关,随着血清OX40L水平的升高,冠脉病变支数增加。结论冠心病(CAD)患者的血浆OX40L水平与冠脉病变程度密切相关,可能对冠心病有预测和诊断意义。

血清OX40L、Occludin与急性缺血性脑卒中患者病情程度及预后的相关性

目的探讨急性缺血性脑卒中患者血清OX40配体(OX40L)、闭合蛋白(Occludin)的水平,分析其与患者病情严重程度及预后的关系。方法选取2016年1月至2020年1月在该院接受治疗的135例急性缺血性脑卒中患者为观察组。另选取同期该院体检健康者100例为对照组。采用酶联免疫吸附试验检测血清OX40L、Occludin水平差异。患者出院后6个月采用改良Rankin量表(mRS)评估预后状况,并分为预后良好组93例(mRS评分≤2分)和预后不良组42例(mRS评分>2分)。采用多因素Logistic回归分析影响急性缺血性脑卒中患者预后不良的危险因素。结果观察组血清OX40L、Occludin水平与对照组相比,差异有统计学意义(P<0.05)。急性缺血性脑卒中重度组血清OX40L、Occludin水平高于中度组、轻度组,中度组血清OX40L、Occludin水平高于轻度组,差异有统计学意义(P<0.05)。预后不良组血清OX40L、Occludin水平明显高于预后良好组,差异有统计学意义(P<0.05)。多因素Logistic回归分析结果显示,美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分及血清OX40L、Occludin水平升高是影响急性缺血性脑卒中患者不良预后的独立危险因素(P<0.05)。受试者工作特征(ROC)曲线结果示,血清OX40L、Occludin及二者联合检测预测急性缺血性脑卒中患者不良预后的AUC分别为0.834、0.800、0.912。结论急性缺血性脑卒中患者血清OX40L、Occludin水平明显升高,与患者神经功能缺损程度及预后情况密切相关,联合检测血清OX40L、Occludin可作为急性缺血性脑卒中患者预后状况辅助生物学指标。

OX40L/OX40基因组变异与早发冠心病风险之间的关系

目的:研究OX40L/OX40基因组变异与早发冠心病风险之间的关系。方法:用序列特异性引物—聚合酶链反应技术对243例年龄<55岁早发急性冠状动脉(冠脉)综合征(PACS)的患者为PACS组、209例早发稳定性心绞痛(PSAP)为PSAP组和138例对照组检测OX40L基因rs3850641 A/G变异位点和OX40基因rs2298212 G/A位点变异的基因型、等位基因及其单倍型;用冠脉造影测量病变血管支数和狭窄程度积分;用酶链免疫吸附法(ELISA)测试血浆可溶性OX40L(sOX40L)、血管细胞黏附分子1(VCAM-1);用散射比浊法测试血浆C反应蛋白(CRP)水平;分析OX40L/OX40基因变异与冠心病风险、冠脉病变程度和血浆3个细胞因子之间的关系。结果:OX40L GG基因型和G等位基因发生PACS风险比AA基因型和A等位基因显著增高(OR=1.99,1.83;P=0.021,P=0.0001);而OX40 A等位基因比G等位基因发生PACS风险显著降低(OR=0.49,P=0.002);单倍型GGGG比AAGG(野生型)的PACS风险显著增加(OR=2.11,P=0.033);在4种高危因素(高血压、高脂血症、糖尿病和吸烟)被校正后OX40L G等位基因和GG基因型及单倍型GGGG与PACS风险仍具有独立关联性(OR=1.97、1.78、2.01,P=0.026、0.001、0.038),OX40 A等位基因和AA基因型对PACS风险仍有独立的关联性(OR=0.31、0.45;P=0.043、0.0001);OX40L基因型GG+AG比AA型血管病变支数≥3支的百分率和狭窄程度积分均显著增加;OX40基因型AA+GA比GG型血管病变支数≥3支的百分率和狭窄程度积分显著减低;差异均有统计学意义(P<0.05)。基因型变异与炎性细胞因子表达:OX40L基因型GG+AG比AA型血浆可溶性OX40L、C反应蛋白、血管细胞黏附分子1水平均显著增高;OX40基因型AA+GA比GG型三指标显著降低。差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:OX40L/OX40基因组变异可能与PACS风险、冠脉病变程度及炎性因子的表达的正反调节有关。

急性冠脉综合征患者OX40配体表达的变化

目的:探讨急性冠脉综合征(ACS)患者外周血单核细胞表达OX40配体(OX40L)及血清可溶性OX40L(sOX40L)水平变化的临床意义。方法:应用流式细胞术和双抗夹心酶联免疫测定法(ELISA)分别对正常对照组30例、稳定心绞痛(SA)40例(包括20例PTCA)、不稳定心绞痛(UA)50例、急性心肌梗死(AMI)30例患者血单核细胞表达OX40L及血清可溶性sOX40L水平进行检测。结果:UA组[(67.1±12.3)MFI]及AMI组[(70.2±18.3)MFI]血单核细胞表达OX40L,血清sOX40L水平[(35.7±8.4)ng/L,(38.1±10.5)ng/L]明显高于SA组[(23.1±6.7)MFI,(13.6±4.1)ng/L]和对照组[(20.8±8.1)MFI,(12.8±3.6)ng/L]。AMI患者血清sOX40L水平与UA组无明显差异,但AMI发病后24hsOX40L有一升高峰值。PTCA后血清sOX40L明显高于PTCA前,但血单核细胞表达OX40L无差异。结论:OX40L表达可能参与ACS的发生机制,且可能是冠脉斑块不稳定的活动性标志物。

OX40L基因变异与早发急性冠状动脉综合征风险关系的临床分析

目的探讨OX40L基因变异与早发急性冠状动脉综合征风险之间的关系。方法采用聚合酶链反应-序列特异性扩增(PCR-SSP)技术检测187例年龄≤55岁、早发急性冠状动脉综合征(ACS)患者和138例冠状动脉造影正常者rs3850641位点A/G变异的基因型、等位基因及其分布频率;采用冠状动脉造影测量病变血管支数(DVN)和狭窄程度积分(SSI);应用ELISA法测试血浆sOX40L、血管细胞黏附分子(VCAM-1);应用散射比浊法测试血浆C反应蛋白(CRP)水平;分析OX40L基因变异与ACS风险、冠状动脉病变程度和血浆3个细胞因子之间的关系。结果OX40L基因A/G变异与早发ACS风险显著关联,G等位基因比野生型早发ACS风险增高2.031倍(OR=2.03),变异型比野生型DVN、SSI、血浆OX40L、VCAM-1和CRP显著增高。结论OX40L基因变异可能与早发ACS风险和冠状动脉病变程度有关;OX40L过度表达、细胞黏附和炎症反应可能是ACS发病的分子生物学基础。

不同剂量瑞舒伐他汀对急性冠脉综合征患者血清sOX40L、MMP-9的影响

目的探讨不同剂量瑞舒伐他汀对急性冠脉综合征(ACS)患者血清可溶性OX40配体(sOX40L)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)的影响。方法选择ACS患者60例,健康对照组20例。随机将ACS患者分为20 mg瑞舒伐他汀治疗组(20 mg组)30例和10 mg瑞舒伐他汀治疗组(10 mg组)30例,比较治疗前后各组间血清sOX40L、MMP-9的水平变化。结果治疗前2个治疗组血清sOX40L、MMP-9水平高于对照组(P<0.01)。瑞舒伐他汀治疗2周后,2个治疗组患者血清sOX40L、MMP-9水平均较治疗前明显降低(P<0.01),其中20 mg组较10 mg组降低更为明显(P<0.05),但2组仍高于对照组(P<0.01)。结论 ACS患者早期使用较大剂量瑞舒伐他汀可明显减少冠状动脉粥样斑块基质成分的降解和炎症反应,从而起到稳定动脉粥样硬化斑块,改善ACS患者预后的作用。

可溶性OX40配体与颈动脉内膜中膜厚度的关系

目的观察冠心病稳定型心绞痛患者及高危因素患者血浆中可溶性OX40配体水平,同时测定颈动脉内膜中膜厚度,分析两者的相关性,进一步探讨可溶性OX40配体与冠心病的关系。方法采用酶联免疫吸附法测定35例稳定型心绞痛患者、30例高危因素者及20例正常对照者血浆中可溶性OX40配体浓度,同时利用彩色超声仪测量颈动脉内膜中膜厚度。结果稳定型心绞痛患者血浆可溶性OX40配体水平(24.95±15.60 ng/L)高于正常对照者(16.44±11.31 ng/L;P<0.05);稳定型心绞痛患者和高危因素者的颈动脉内膜中膜厚度高于正常对照者(P<0.05),且与血浆可溶性OX40配体显著正相关(r=0.376,P=0.001)。多因素回归分析显示,在控制年龄、血脂及血压影响后,可溶性OX40配体水平对内膜中膜厚度有独立的贡献(P=0.019)。结论冠心病患者可溶性OX40配体水平显著增高,且与颈动脉内膜中膜厚度独立相关,提示可溶性OX40配体可作为判断冠心病及动脉粥样硬化新的炎症指标。

血浆可溶性OX40配体对冠状动脉介入治疗后心血管事件的预测价值

目的探讨检测血浆可溶性OX40配体对冠状动脉介入治疗后患者主要不良心血管事件的预测价值。方法连续入选2014年3月至2015年3月于锦州市中心医院成功施行冠状动脉介入治疗并自愿随访的患者116例,检测两组患者血浆可溶性OX40配体、血生化及超声心动图等指标。术后随访1年,根据是否发生主要不良心血管事件分为不良事件组及无不良事件组,比较两组患者的一般临床指标、超声心动图、血生化、可溶性OX40配体等指标,并运用受试者工作特征曲线评价可溶性OX40配体对主要不良心血管事件的预测价值。结果不良事件组患者血浆可溶性OX40配体水平显著高于无不良事件组[(27.82±6.47)ng/m L vs.(20.96±5.62)ng/m L,P=0.000],差异有统计学意义;Logistic多因素回归分析显示,可溶性OX40配体升高是冠状动脉介入治疗后主要不良心血管事件发生的独立危险因素(优势比=5.056,P=0.003);在可溶性OX40配体预测主要不良心血管事件能力的受试者工作曲线中,其曲线下面积为0.782(P<0.001);当血浆可溶性OX40配体取25.79 ng/m L时,其阳性预测值为71.4%,阴性预测值为96.8%。结论冠心病患者血浆可溶性OX40配体升高对冠状动脉介入治疗后主要不良心血管事件的发生具有一定的预测价值,血浆可溶性OX40配体水平超过25.79ng/m L时患者术后发生主要不良心血管事件的风险较大。

急性冠脉综合征患者循环血中OX40L高表达的临床价值

目的探讨急性冠脉综合征(ACS)患者外周血淋巴细胞OX40配体(OX40L)表达及血清可溶性OX40L(sOX40L)水平变化的临床意义。方法应用间接免疫荧光流式细胞术和ELISA分别对正常对照组20例、稳定型心绞痛(SA)组20例、ACS组40例的外周血淋巴细胞OX40L表达及血清sOX40L水平进行检测,免疫透射比浊法检测血清C-反应蛋白(CRP)。结果ACS组外周血淋巴细胞OX40L表达明显高于SA组和对照组(P<0.01),SA组与对照组相比差异无统计学意义(P>0.05);ACS组血清sOX40L水平明显高于SA组和对照组(P<0.01),SA组与对照组相比差异无统计学意义(P>0.05);ACS组血清CRP水平明显高于SA组和对照组(P<0.01),SA组与对照组相比差异无统计学意义(P>0.05)。血清sOX40L水平与CRP呈正相关(r=0.79,P<0.001),血清sOX40L水平与冠脉病变复杂狭窄数呈正相关(r=0.72,P<0.001)。结论ACS患者外周血淋巴细胞OX40L表达及血清sOX40L水平均明显升高,提示sOX40L在ACS的发生和发展中具有重要作用,可作为预测ACS的新指标。

冠心病患者可溶性OX40配体与白细胞介素10的相关性分析

目的观察冠心病稳定型心绞痛患者及高危因素患者和健康人血浆可溶性OX40配体(sOX40L)和白细胞介素10(IL-10)水平及两者之间的相关性,探讨sOX40L在冠心病中的作用及其相关因素。方法采用酶联免疫吸附法测定35例稳定型心绞痛患者、30例高危因素患者以及20名健康人血浆中sOX40L及IL-10的水平。结果稳定型心绞痛患者血浆OX40L水平[(24.95±15.60)ng/L]高于健康对照组[(16.44±11.31)ng/L],差异有统计学意义(P<0.05),略高于高危因素组[(19.99±9.35)ng/L],但差异无统计学意义(P>0.05)。与健康对照组相比,稳定型心绞痛组IL-10水平显著降低[(27.3±9.9)ng/L比(20.5±8.9)ng/L,P<0.05]。血浆sOX40L与IL-10呈显著负相关(r=-0.394,P=0.000)。结论本研究首次观察到血浆可溶性OX40L水平与抗炎细胞因子IL-10的水平呈显著负相关,提示sOX40L可能通过影响IL-10的水平而影响冠心病的危险程度。

不同剂量阿托伐他汀对急性冠脉综合征患者血浆可溶性OX40配体水平的影响

目的探讨不同剂量阿托伐他汀对急性冠脉综合征(ACS)炎症指标可溶性OX40配体(sOX40L)及高敏C反应蛋白(hs-CRP)的影响。方法收集47例因ACS住院的患者,随机分为小剂量组(阿托伐他汀10 mg/d)25例和大剂量组(阿托伐他汀20 mg/d)22例,治疗4周,测定治疗前后血浆sOX40L及hs-CRP的浓度。结果小剂量组和大剂量组的sOX40L及hs-CRP的血浆基线水平分别为:(27.69±10.52)ng/L和(28.24±10.01)ng/L,(11.69±7.09)mg/L和(11.91±6.36)mg/L,均显著高于以往报道的正常人群。治疗4周后,小剂量组和大剂量组sOX40L均显著下降,分别为(21.99±8.12)ng/L(t=10.732,P<0.01)和(17.51±4.84)ng/L(t=9.052,P<0.01),下降幅度分别为20.6%和38.0%,差异有统计学意义(t=2.252,P<0.05)。两组hs-CRP也显著下降,下降幅度分别为32.3%(t=5.496,P<0.01)和55.8%(t=8.006,P<0.01),两组间比较差异有统计学意义(t=2.702,P=0.01)。治疗前后sOX40L与hs-CRP均呈正相关性(R=0.765,P=0.00;R=0.742,P=0.00)。结论 ACS患者血浆sOX40L水平明显高于正常人群。他汀类药物治疗ACS患者可显著降低sOX40L,并且sOX40L降低与hs-CRP降低同步,呈剂量依赖性。sOX40L可能同hs-CRP一样,可作为他汀类药物抗炎作用的指标之一。

OX40-OX40L轴对动脉粥样硬化小鼠淋巴细胞活性氧和亲环素A表达的调控作用

目的探讨OX40-OX40L相互作用对C57BL/6J小鼠活性氧(ROS)水平及亲环素A(CyPA)表达的影响。方法采用C57BL/6J小鼠颈动脉硅胶圈置入法快速建立动脉粥样硬化斑块模型,免疫组织化学法检测颈动脉粥样硬化(As)斑块内CyPA的表达;小鼠淋巴细胞表达CyPA采用Western Blot检测;采用流式细胞术检测CD4、OX40及细胞内ROS水平。结果 C57BL/6J小鼠形成As斑块后,淋巴细胞表达OX40较非As小鼠明显增加,同时发现As小鼠淋巴细胞内ROS水平和CyPA表达水平显著增加;体外应用anti-OX40特异性刺激OX40-OX40L轴后,淋巴细胞表达OX40及ROS水平显著上调,anti-OX40L特异性阻断OX40-OX40L后,淋巴细胞OX40表达减少,细胞分泌ROS水平较刺激组降低(P<0.05);体外培养淋巴细胞6 h,刺激组分泌的CyPA水平明显高于抑制组(P<0.001)。结论 OX40-OX40L相互作用能调控动脉粥样硬化小鼠活性氧水平及亲环素A表达。

OX40配体及基质金属蛋白酶-9共同高表达在急性冠脉综合征中的临床意义

目的:探讨急性冠脉综合征(ACS)患者外周血淋巴细胞高表达OX40L及血清可溶性OX40配体(sOX40L)和基质金属蛋白酶9(MMP-9)共同高表达的临床意义。方法:应用间接免疫荧光流式细胞术和酶联免疫吸附法(ELISA)分别对正常对照组40例、稳定型心绞痛(SA)40例、不稳定型心绞痛(UA)47例、急性心肌梗死(AMI)33例的外周血淋巴细胞表达OX40L及血清sOX40L水平进行检测,应用ELISA法检测各组血清MMP-9(MMP-9)。结果:(1)UA组及AMI组外周血淋巴细胞表达OX40L明显较SA组和对照组高(P<0.01),SA组与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。(2)UA组及AMI组血清sOX40L水平明显较SA组和对照组高(P<0.01),而SA组与对照组比较差异亦无统计学意义(P>0.05)。(3)UA组及AMI组血清MMP-9水平明显较SA组和对照组高(P<0.01),SA组与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05),而且血清sOX40L水平与MMP-9呈显著正相关(r=0.62,P<0.001)。结论:ACS患者外周血淋巴细胞表达OX40L及血清sOX40L和MMP-9水平均明显升高;血清sOX40L水平与MMP-9呈正相关;二者共同高表达提示冠状动脉斑块不稳定,可能是ACS活动性标志物。

OX40配体高表达在慢性心力衰竭患者中的临床意义

目的:探讨慢性心力衰竭患者血清可溶性OX40配体(sOX40L)高表达的临床意义。方法:应用酶联免疫吸附法(ELISA)分别对正常对照组30例、慢性心力衰竭组50例的血清sOX40L水平进行检测;应用脑钠肽(BNP)试剂盒放射免疫法检测两组血清BNP;采用多普勒心脏超声检测两组左室射血分数(LVEF)。结果:(1)慢性心力衰竭组血清sOX40L水平明显较对照组高,差异有统计学意义(P<0.01);(2)慢性心力衰竭组BNP水平明显较对照组高,差异有统计学意义(P<0.01);(3)慢性心力衰竭组LVEF水平明显较对照组低,差异有统计学意义(P<0.01);而且血清sOX40L水平与BNP呈显著正相关(r=0.69,P<0.001),与LVEF呈显著负相关(r=0.53,P<0.001)。结论:慢性心力衰竭患者血清sOX40L和BNP水平均明显升高;血清sOX40L水平与BNP呈正相关,提示sOX40L高表达在慢性心力衰竭患者早期诊断中有良好的预警作用。

血清可溶性OX40L在原发性高血压合并颈动脉斑块患者中的表达及临床意义

目的探讨原发性高血压合并颈动脉粥样硬化斑块患者血清可溶性OX40L(sOX40L)的表达及临床意义。方法选取110例中老年原发性高血压患者进行颈动脉超声检查,根据超声结果以及颈动脉斑块性质分为无斑块组30例、稳定斑块组40例、易损斑块组40例;并应用酶联免疫吸附法(ELISA)法检测各组血清sOX40L、MMP-9水平。结果原发性高血压合并颈动脉斑块组患者血清sOX40L、MMP-9水平显著高于无斑块组(P<0.01)。易损斑块组(C组)血清sOX40L、MMP-9水平也明显高于较稳定斑块组(P<0.01)。三组血清sOX40L水平与MMP-9呈显著正相关(r=0.70,P<0.001)。结论原发性高血压合并颈动脉粥样硬化斑块患者血清sOX40L与MMP-9水平明显升高,且在易损斑块组两者升高更加明显,提示sOX40L水平与颈动脉斑块的稳定性密切相关,sOX40L升高对于高血压合并颈动脉斑块的稳定性有良好的预测作用。

OX40/OX40L逆向信号对小鼠主动脉内皮细胞MMP-9表达及机制的研究

目的:探讨OX40配体(OX40 ligand,OX40L)逆向通路激活对培养的小鼠主动脉内皮细胞基质金属蛋白酶-9(matrixmetalloproteinase-9,MMP-9)表达及活性的作用。方法:分离与培养8～10周龄C57BL/6J小鼠主动脉内皮细胞,传代至第2代,用可溶性OX40(sOX40)、OX40L单克隆抗体(anti-OX40L)和钙离子螯合剂bapta-AM刺激内皮细胞,RT-PCR和Western blot方法检测内皮细胞MMP-9的mRNA和蛋白表达水平,明胶酶谱法检测内皮细胞培养上清MMP-9活性,应用钙离子成像方法观察内皮细胞胞浆游离钙离子浓度([Ca2+]i)的改变。结果:与对照组相比,可溶性OX40(0.1 mg/L)刺激后内皮细胞MMP-9的mRNA及蛋白表达水平均显著增高,内皮细胞培养上清MMP-9活性明显增高,内皮细胞胞浆[Ca2+]i也明显增高。分别应用可溶性OX40L单克隆抗体(0.1 mg/L)和Bapta-AM(20μmol/L)预处理培养内皮细胞后,由可溶性OX40引起的内皮细胞基因和蛋白表达水平明显降低,内皮细胞培养上清MMP-9活性明显下降。结论:内皮细胞OX40L逆向信号的激活可以通过调节胞内的游离钙离子水平参与内皮细胞中MMP-9表达的调控,这可能是OX40/OX40L逆向信号通路参与动脉粥样硬化的发生、发展的机制之一。

OX40/OX40L与慢性肝炎免疫发病机制的研究进展

慢性肝炎的发生发展与人体的免疫功能强弱密切相关,其中T淋巴细胞发挥着重要作用。共刺激分子OX40/OX40L参与T淋巴细胞的活化,综述了OX40/OX40L的分子特性、参与免疫调控的机制以及与慢性肝病的关系。

OX40-OX40L相互作用对小鼠平滑肌细胞亲环素A表达的影响

目的观察OX40-OX40配体(OX40L)相互作用对小鼠主动脉血管平滑肌细胞(VSMC)亲环素A(CyPA)表达的影响。方法小鼠VSMC采用组织块贴壁法原代培养;应用实时荧光定量PCR和流式细胞术检测OX40L mRNA和蛋白表达水平;细胞内、外CyPA水平分别采用实时荧光定量PCR及Western blot方法检测。结果肿瘤坏死因子α+脂多糖联合处理小鼠VSMC,细胞OX40L mRNA和蛋白表达呈时间依赖性,mRNA表达在24 h(5.967±0.252比1.000±0.000,P<0.05)达到高峰,蛋白表达在36 h(61.900±2.551比20.967±0.451,P<0.05)增加最显著;可溶性OX40处理VSMC后,CyPA mRNA表达呈时间依赖性并在90 min达到高峰(1.799±0.098比1.000±0.000,P<0.05),2 h后细胞培养上清中可检测到高水平的CyPA(1.119±0.059比0.281±0.038,P<0.05),而细胞内CyPA表达较对照组无明显差异;抗OX40L预处理细胞可显著抑制可溶性OX40诱导的CyPA mRNA(1.105±0.091比1.799±0.098,P<0.05)及蛋白(0.635±0.040比1.119±0.059,P<0.05)表达。结论 OX40-OX40L相互作用可影响VSMC CyPA的分泌。