Ochrobacterum intermedium DN2新型烟碱降解酶的分离纯化

中间苍白杆菌(OchrobacterumintermediumDN2)是一株新发现的可以降解烟碱的菌株。本研究对O.intermediumDN2烟碱降解酶的合成动态进行了分析,确定其酶的合成模式为同步合成型。另外,对它的烟碱降解酶进行了分离纯化。粗酶经硫酸铵沉淀、SephadexG-100分子筛层析、DEAE-SephadexA50离子交换层析等步骤后获得电泳纯的烟碱降解酶,纯化倍数35.24倍,酶活回收率6.4%。经SDS-PAGE电泳确定为电泳纯,测得该酶的分子量约为40.06kDa。由中间苍白杆菌产生的烟碱降解酶的分离纯化在国内外还是首次报道。

苍白杆菌B2对甲基对硫磷降解途径研究

采用薄层层析、紫外吸收光谱以及气谱-质谱联用的方法分析了苍白杆菌Ochrobacterumsp.B2降解甲基对硫磷的中间产物。结果表明,B2水解甲基对硫磷产生对硝基苯酚(PNP),PNP通过产生4-硝基邻苯二酚(4-nitrocatechol,4-NC)和1,2,4-苯三酚(1,2,4-benzenetriol)的途径进一步代谢。苍白杆菌B2可以以PNP和4-NC为碳源生长,在菌的初始OD600值为0.02时,B2可在48h内将50mg/L的PNP完全降解,在60h内,将30mg/L的4-NC完全降解。

苍白杆菌还原Cr(Ⅵ)的最适条件及其豆渣培养基的优化

利用本实验室筛选的一株苍白杆菌进行还原Cr(Ⅵ)的实验,在LB培养中它对Cr(Ⅵ)具有很强的还原能力,其最适还原条件为pH 8,温度30℃,证明它是一种专性好氧偏碱性细菌。通过在豆渣培养基中培养,并对豆渣进行优化处理,证实苍白杆菌在优化后的豆渣培养基中对Cr(Ⅵ)具有良好的还原能力。这为利用苍白杆菌处理含铬工业废渣、废液提供了廉价的培养基和为其实现工程化提供了实验依据。

硫丹降解菌的筛选及降解性能研究

从生产硫丹的农药厂的活性污泥中,分离到一株能以硫丹为唯一碳源生长的细菌C7,经鉴定为苍白杆菌属(O chrobacterumsp.)。构建系统发育树了解C7与其它菌株之间的亲缘关系。用高效液相色谱法对C7的降解性能分析表明,C7在8天内对50 mg/L硫丹的降解率达90.2%以上;菌株的培养条件为pH7,温度30℃,接种量25%时测定降解性能最好。

硫丹降解菌C7在土壤中的降解性能及其酶促降解试验

Ochrobactrum sp．C7是一株高效硫丹降解菌。本试验对C7在土壤中降解硫丹的效果以及C7产生的硫丹水解酶（粗酶液）的性质进行了研究。结果表明，该菌在30天内能很好地降解土壤中的硫丹；降解酶在30—45℃、pH5．5～7．5的条件下活性较高；在pH7和40℃时显示最大的硫丹水解酶活性。初步判断水解酶的表达可能是组成型的，此粗酶液可用于果蔬表面农药残留的快速解毒和清除，从而为高效降解菌株的应用与环境中的生物修复提供了理论依据。