桂花色泽关键基因OfCCD4互作转录因子的鉴定分析

【目的】明确调控桂花类胡萝卜素代谢关键基因OfCCD4的转录因子,探究转录因子与OfCCD4结合并调控其表达的分子机制,为解析桂花类胡萝卜素代谢的分子机制及桂花花色的基因工程育种提供理论依据。【方法】选取杭州临安太湖源区桂花花瓣为研究材料,对前期筛选的类胡萝卜素代谢关键基因OfCCD4进行转录因子预测,并利用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)、酵母单杂交等分子生物学试验初步鉴定OfCCD4的转录因子。【结果】转录组分析发现,有10个转录因子与OfCCD4表达水平呈现高相关性;Y1H酵母转录激活活性结果显示,其中有8个转录因子具有一定的转录自激活能力;酵母单杂交结果表明,3个转录因子与OfCCD4启动子有强相互作用,3个转录因子与OfCCD4启动子存在弱相互作用。【结论】筛选到3个具有自激活活性,且与OfCCD4存在强互作关系的转录因子,推测其可能通过调控桂花OfCCD4基因表达影响花色差异。