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Plant as Bioreactor for Producing Heterologous Proteins
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作者 YANG Jing XIONG Li-dong +3 位作者 LI Tian-hang GUO Yong-xin LI Hai-yan LI Xiao-kun 《Chinese Journal of Biomedical Engineering(English Edition)》 2010年第4期156-173,共18页
Using plants to produce heterologous proteins makes it very attractive due to the potentially low costs. Using this procedure it is possible to produce medicinal protein for clinical applications with the plants biore... Using plants to produce heterologous proteins makes it very attractive due to the potentially low costs. Using this procedure it is possible to produce medicinal protein for clinical applications with the plants bioreactors increasing gradually. The paper proposes the five major systems of the plant bioreactor as well as their advantage and disadvantage and the development of each system. Focuses on the five major systems of the plant bioreactor to produce vaccines, antibodies and medical protein and the research achievement at the present stage and the research on my laboratory. The key technology research of plant bioreactor such as new genes, new biological components, new technologies and new research methods related with plant bioreactor offer a work foundation for a long-term development in future. 展开更多
关键词 bioreactor in planta oil body CHLOROPLAST suspension system plantvirus heterologous protein
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Localization of Seed Oil Body Proteins in Tobacco Protoplasts Reveals Specific Mechanisms of Protein Targeting to Leaf Lipid Droplets 被引量:1
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作者 Stefania De Domenico Stefania Bonsegna +3 位作者 Marcello Salvatore Lenucci Palmiro Poltronieri Gian Pietro Di Sansebastiano Angelo Santino 《Journal of Integrative Plant Biology》 SCIE CAS CSCD 2011年第11期858-868,共11页
Oleosin, caleosin and steroleosin are normally expressed in developing seed cells and are targeted to oil bodies. In the present work, the cDNA of each gene tagged with fluorescent proteins was transiently expressed i... Oleosin, caleosin and steroleosin are normally expressed in developing seed cells and are targeted to oil bodies. In the present work, the cDNA of each gene tagged with fluorescent proteins was transiently expressed into tobacco protoplasts and the fluorescent patterns observed by confocal laser scanning microscopy. Our results indicated clear differences in the endocellular localization of the three proteins. Oleosin and caleosin both share a common structure consisting of a central hydrophobic domain flanked by two hydrophilic domains and were correctly targeted to lipid droplets (LD), whereas steroleosin, characterized by an N-terminal oil body anchoring domain, was mainly retained in the endoplasmic reticulum (ER). Protoplast fractionation on sucrose gradients indicated that both oleosin and caleosin- green fluorescent protein (GFP) peaked at different fractions than where steroleosin-GFP or the ER marker binding immunoglobulin protein (BiP), were recovered. Chemical analysis confirmed the presence of triacylglycerols in one of the fractions where oleosin-GFP was recovered. Finally, only oleosin- and caleosin-GFP were able to reconstitute artificial oil bodies in the presence of triacylglycerols and phospholipids. Taken together, our results pointed out for the first time that leaf LDs can be separated by the ER and both oleosin or caleosin are selectively targeted due to the existence of selective mechanisms controlling protein association with these organelles. 展开更多
关键词 artificial oil bodies caleosin endoplasmic reticulum lipid droplets oleosin protein sorting steroleosin.
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以油体作为生物反应器的研究进展 被引量:13
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作者 赵传志 卢金东 +2 位作者 苏磊 毕玉平 王兴军 《生物技术通报》 CAS CSCD 2008年第2期73-76,79,共5页
获得安全、经济、稳定具有生物活性的重组蛋白,应用于基础研究及临床应用是一个重大的战略课题,现在可以利用酵母、细菌和动物细胞生产多种药物蛋白,但这些蛋白的生产过程还存在许多问题。利用植物作为生物反应器生产药用蛋白和疫苗是... 获得安全、经济、稳定具有生物活性的重组蛋白,应用于基础研究及临床应用是一个重大的战略课题,现在可以利用酵母、细菌和动物细胞生产多种药物蛋白,但这些蛋白的生产过程还存在许多问题。利用植物作为生物反应器生产药用蛋白和疫苗是目前生物反应器研究的热点。油体蛋白在油料作物种子中高水平表达且易于分离,经过改造后是生产目的蛋白的一种理想载体。介绍了油体、油体蛋白的结构以及利用植物油体蛋白表达体系这一新型植物生物反应器生产目的蛋白的研究进展和前景。 展开更多
关键词 油体 油体蛋白 生物反应器 重组蛋白
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热处理对大豆油体表面的油体蛋白和外源性蛋白影响 被引量:8
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作者 陈业明 赵路苹 +3 位作者 熊小辉 阮奇珺 张彩猛 华欲飞 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2014年第22期106-109,113,共5页
研究了热处理不同p H生豆浆和吸胀大豆种子对大豆油体上油体蛋白和外源性蛋白的影响,并通过SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳表征油体蛋白和外源性蛋白的变化。研究表明:热处理生豆浆和吸胀的大豆种子时,随着温度和时间的增加,都可以抑制内切蛋... 研究了热处理不同p H生豆浆和吸胀大豆种子对大豆油体上油体蛋白和外源性蛋白的影响,并通过SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳表征油体蛋白和外源性蛋白的变化。研究表明:热处理生豆浆和吸胀的大豆种子时,随着温度和时间的增加,都可以抑制内切蛋白酶P34的活性,有利于油体蛋白保留在油体上;而且热处理对吸胀的大豆种子效果更显著。热处理不同p H的生豆浆时,随着热处理强度和生豆浆p H的增加,外源性蛋白(主要是大豆球蛋白、伴大豆球蛋白和过敏性蛋白Bd 30K)会从油体上逐渐解离下来。在80℃、p H8.5下处理生豆浆5-30min时,油体纯度高达97%,且含有的过敏性蛋白Bd 30K低于1%。 展开更多
关键词 大豆油体 油体蛋白 外源性蛋白 热处理 过敏性蛋白
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利用油体表达系统生产外源重组蛋白 被引量:7
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作者 曲勍 李校堃 于雅琴 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第8期111-115,共5页
植物生产外源蛋白日益受到重视,是一个安全廉价的生产系统。植物油体表达系统利用油素蛋白的高表达性和易分离特性改进了植物生物反应器下游加工技术、降低了高纯度药用蛋白的生产成本。介绍了油体和油素蛋白的组成结构等特征,重点阐述... 植物生产外源蛋白日益受到重视,是一个安全廉价的生产系统。植物油体表达系统利用油素蛋白的高表达性和易分离特性改进了植物生物反应器下游加工技术、降低了高纯度药用蛋白的生产成本。介绍了油体和油素蛋白的组成结构等特征,重点阐述了国内外各领域用植物油体表达系统生产外源蛋白的研究进展,探讨了油体系统的优势和存在的问题。利用油体系统开发酸性成纤维细胞生长因子(haFGF)医类新药,生物活性检测正在进行中。油体表达系统作为药用蛋白的新来源,将得到逐步的完善及更广泛的应用。 展开更多
关键词 油体 油素蛋白 植物生物反应器 重组蛋白
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提取条件对大豆油体表面蛋白质去除效果的研究 被引量:15
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作者 赵路苹 陈业明 +1 位作者 张彩猛 华欲飞 《大豆科学》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期835-839,共5页
在确定生豆浆一次超速离心提取大豆油体的适宜蔗糖浓度为10%的基础上,研究了氯化钠、尿素、EDTA-2Na、SDS和温度等提取条件对大豆油体表面蛋白质的影响,并通过SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳表征油体表面蛋白质的变化。结果表明:大于6mol&#... 在确定生豆浆一次超速离心提取大豆油体的适宜蔗糖浓度为10%的基础上,研究了氯化钠、尿素、EDTA-2Na、SDS和温度等提取条件对大豆油体表面蛋白质的影响,并通过SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳表征油体表面蛋白质的变化。结果表明:大于6mol·L^-1尿素和80—100℃加热处理15min都有利于去除油体表面结合的大豆蛋白质,得到高纯度的油体;氯化钠和EDTA-2Na对去除表面结合的大豆蛋白质没有作用;SDS可以取代油体蛋白,破坏油体天然结构,不利于油体的提取。 展开更多
关键词 大豆油体 油体蛋白 大豆蛋白质 提取条件 SDS—PAGE
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大豆发芽过程中油体和蛋白质贮存液泡的形态变化 被引量:2
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作者 郭金燕 赵路苹 +1 位作者 陈业明 华欲飞 《大豆科学》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期833-836,842,共5页
利用透射电子显微镜观察了大豆发芽过程中蛋白贮存液泡和油体的形态变化过程。结果显示:干燥大豆细胞中密集地填充着蛋白质贮存液泡和油体,随着发芽天数的延长,液泡会渐渐聚合增大,当天数达到4d时,会聚合形成一个占据细胞大部分空... 利用透射电子显微镜观察了大豆发芽过程中蛋白贮存液泡和油体的形态变化过程。结果显示:干燥大豆细胞中密集地填充着蛋白质贮存液泡和油体,随着发芽天数的延长,液泡会渐渐聚合增大,当天数达到4d时,会聚合形成一个占据细胞大部分空间的大液泡,并且液泡中的蛋白质不断发生减少;发芽1~2d的豆芽,油体显示出聚集于液泡表面的趋势,并且比远离液泡的油体小;发芽≥14d时,油体数目不断发生减少;发芽过程中,大部分油体被消化利用渐渐变小或者消失,而有少部分油体发生聚合增大,这应该跟油体表面的油体蛋白被水解相关:一方面,油体蛋白被水解会使甘油三酯暴露,利于它们的消化利用,另一方面,油体蛋白水解去除了油体聚合增大的空间障碍。最后,绿豆芽的蛋白质和脂质消化利用的速度要比黄豆芽快,这跟光照条件下,绿豆芽的生理活动更加活跃有关。 展开更多
关键词 大豆发芽 油体 蛋白质贮存液泡 油体蛋白水解
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利用植物生物反应器生产药用蛋白质 被引量:1
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作者 李文荣 郑克勤 《生命的化学》 CAS CSCD 2012年第2期151-154,共4页
植物生物反应器是一种安全、环保、廉价的生产系统。它已成为生产药用蛋白质的理想载体并受到广泛的关注。目前,生物反应器通过靶向表达来提高外源蛋白质产量取得了一定的效果。本文简要介绍了生物反应器的选择,并着重阐述了通过在空间... 植物生物反应器是一种安全、环保、廉价的生产系统。它已成为生产药用蛋白质的理想载体并受到广泛的关注。目前,生物反应器通过靶向表达来提高外源蛋白质产量取得了一定的效果。本文简要介绍了生物反应器的选择,并着重阐述了通过在空间上的定位表达和时间上的诱导表达来提高药用蛋白质产量方面的最新研究进展,同时展望了未来的发展前景。 展开更多
关键词 植物生物反应器 药用蛋白 叶绿体 油体 内质网
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