Simultaneous Determination of Baicalin, Berberine and Rhein by HPLC in Traditional Chinese Patent Medicine Sanhuang Tablets

Aim To establish a reversed phase liquid chromatographic method forsimultaneous determination of three main medicinal constituents, baicalin, berberine and rhein, inSanhuang tablets. Methods The separation was performed on a Kromasil C_(18) column with TEA-adjusted0.02 mol·L^(-1) H_3PO_4 (pH 6.78)-acetonitrile-methanol (40 : 9 : 7) as mobile phase at aflow-rate of 1.0 mL·min^(-1), with detection at 254 ran. Considering interaction between acidic andalkaline compounds, three standard markers were added respectively and the volume of samplesolution was doubled in recovery experiments. Results Three regression equations revealed excellentlinear relationship between the peak areas and concentrations and the correlation coefficients allsurpassed 0.999 8. The average recovery was 96.1% (RSD = 2.1%) baicalin, 98.5% (RSD = 2.4%) forberberine, and 101.5% (RSD =1.3%) for rhein. Conclusion The method developed can be used to controlthe quality of Sanhuang tablets comprehensively.

鱼腥草芩蓝合剂HPLC指纹图谱及8种成分含量测定

目的:建立鱼腥草芩蓝合剂的HPLC指纹图谱,并同时测定其中黄芩苷、汉黄芩苷、汉黄芩素、连翘苷、连翘酯苷A、绿原酸、芦丁和槲皮苷的含量。方法:采用SHIMSEM Ankylo C_(18)色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相为甲醇-0.1%磷酸,梯度洗脱;检测波长210 nm;体积流量1.0 mL/min;柱温40℃;进样量10μL。以黄芩苷作为参照峰,建立17批鱼腥草芩蓝合剂的指纹图谱,综合应用相似度评价、聚类分析和主成分分析评价鱼腥草芩蓝合剂批间质量差异;并同时测定其中8种成分的含量。结果:17批样品中有27个共有峰,相似度均>0.990。聚类分析可将样品分为5类,筛选出3个主成分,累计贡献率75.804%。8种成分在各自范围内线性关系良好(r≥0.9995),平均加样回收率为96.17%~103.53%,RSD为0.50%~1.23%。结论:该试验方法稳定、可靠,可对鱼腥草芩蓝合剂进行质量控制。

HPLC-MS/MS法同时测定清开灵口服液中7种成分的含量

目的 建立高效液相色谱-质谱联用(HPLC-MS/MS)法同时测定清开灵口服液中7种成分含量。方法 采用Waters ACQUITY UPLC BEH C_(18)色谱柱(2.1 mm×10 mm,1.7μm);以含10 mmol·L^(-1)乙酸铵和0.1%甲酸的水溶液(A)及甲醇(B)为流动相,梯度洗脱;电喷雾离子源,正、负离子多反应监测(MRM)模式进行定量分析。结果 腺苷、绿原酸、咖啡酸、栀子苷、黄芩苷、猪去氧胆酸和胆酸质量浓度分别在0.100 4~3.213、0.784 5~8.982、0.998~3.194、0.622 5~19.92、25.05~300.6、2.513~30.15和7.775~93.30μg·m L^(-1)范围内与峰面积呈良好线性关系(r≥0.999 0);平均回收率(n=6)分别为100.9%、98.74%、101.2%、100.2%、100.8%、99.97%和98.94%,RSD分别为1.58%、0.59%、1.78%、1.25%、0.65%、1.69%和1.07%。15批样品中腺苷、绿原酸、咖啡酸、栀子苷、黄芩苷、猪去氧胆酸和胆酸的含量范围分别为0.12~0.18、0.19~0.24、0.06~0.09、0.34~0.37、4.54~4.85、0.49~0.67和1.82~2.19 mg·m L^(-1)。15批样品测定结果较为接近。结论 该方法具有良好的灵敏度、准确性和重复性,可为清开灵口服液的质量控制和后续研究提供参考及数据支持。

HPLC和原子吸收光谱法测定黄芩苷锌含量的比较研究

为了比较黄芩苷锌含量测定的不同方法,建立更加简单、快速的含量测定方法,分别采用高效液相色谱法法和原子吸收光谱法对黄芩苷锌原料药的含量测定进行研究。结果表明,HPLC测定黄芩苷锌线性范围为10.0~200.0μg/mL,相关系数r=0.9999,精密度(RSD=0.08%)良好;原子吸收光谱法线性范围为0~2.0μg/mL,相关系数r=0.9983,精密度(RSD=0.13%)良好,但前处理过程过于复杂,耗时太长。因此更推荐HPLC法。

黄芩苷铝HPLC检测方法的建立

为了探究测定黄芩苷铝含量的有效方法,试验先摸索了供试品前处理方法,将黄芩苷铝完全转化成黄芩苷后以黄芩苷为对照品,建立测定黄芩苷含量的高效液相色谱(HPLC)检测方法,绘制标准曲线,并考察该方法的系统适用性、准确度、精密度、重复性、耐用性和稳定性,最后利用该方法对样品含量进行检测。结果表明:供试品前处理条件为向黄芩苷铝中加入乙腈-0.05%磷酸溶液(40∶60)并超声30 min;液相色谱条件,色谱柱为Hypersil ODS色谱柱(150 mm×4.6 mm, 5μm),流动相为乙腈-0.05%磷酸水溶液(30∶70),检测波长为278 nm,流速为1.00 mL/min,柱温为30℃,进样量为10μL。在该条件下,黄芩苷在20~320μg/mL内线性关系良好(R^(2)=0.999 9),精密度高、重复性好,平均回收率为101.24%,供试品溶液在36 h内稳定。在测试范围内,柱温、流速和色谱柱对样品中黄芩苷的含量测定无影响。说明建立的黄芩苷铝HPLC检测方法操作简单,可靠性高,可以用作黄芩苷铝含量的测定。

HPLC法测定黄芩及其不同炮制品中黄芩苷的含量

目的 :测定黄芩及其不同炮制品中黄芩苷的含量。方法 :采用高效液相色谱法 ,反相C18柱 ,以甲醇 0 .0 4 %磷酸水溶液 (46∶5 4 )为流动相 ,检测波长为 2 80nm。结果 :生黄芩、酒炒黄芩、酒润麸炒法炮制的黄芩饮片中 ,黄芩苷平均含量分别为 6 .8% ,6 .0 % ,6 .7%。结论

RP—HPLC法测定7种药用黄芩中黄芩苷和汉黄芩苷的含量

目的:建立测定7种药用黄芩中黄芩苷和汉黄芩苷的反相高效液相色谱法,7种药用黄芩为黄芩,粘毛黄芩,甘肃黄芩,滇黄芩,韧黄芩,川黄芩和丽江黄芩。方法:采用Wakosil;C_(18)柱(150mm×4.6mm,5μm),以甲醇-水-冰乙酸(41:59:0.2)和(36:64:0.2)为流动相,流速为1.0mL·min^(-1),检测波长为280nm。应用二极管阵列检测器对峰的纯度进行鉴定。结果:样品中黄芩苷和汉黄芩苷平均回收率分别为98.3％和96.8％,RSD分别为0.48％和1.3％,n=5;黄芩苷在0.08～0.4μg内,r=0.9998,汉黄芩苷在0.04～0.2 μg内,r=0.9995;峰面积与浓度线性关系良好。结论:黄芩苷、汉黄芩苷与其他成分能得到很好的分离,不同品种间2种苷含量差别比较大。

HPLC法同时测定灌胃黄芩水煎剂后大鼠血浆中黄芩苷和汉黄芩苷的质量浓度及药动学研究

目的建立大鼠ig黄芩水煎剂后血浆中黄芩苷和汉黄芩苷的HPLC测定方法及药动学研究.方法大鼠ig黄芩水煎剂后,不同时间眼底静脉丛取血,制备血浆.血浆样品经甲醇沉淀蛋白,HPLC-UV测定血药浓度.色谱柱为Shim-pack ODS(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相采用梯度洗脱,体积流量:1.5 mL/min;检测波长:276nm.结果黄芩苷的线性范围为0.156～10μg/mL,汉黄芩苷的线性范围为0.109～7 μg/mL,定量下限(LLOQ)分别为0.156和0.109μg/mL,日内和日间精密度(RSD)均小于15%,准确度(RE)为-6.82%～3.26%.大鼠ig黄芩水煎剂后,血浆中黄芩苷和汉黄芩苷血药浓度-时间曲线均存在双峰:黄芩苷的tmax1和tmax2分别为(12.0±4.5)min和(7.2±1.79)h;Cmax1和Cmax2分别为(5.29±1.96)和(4.49±2.12)μg/mL,汉黄芩苷的tmax1和tmax2分别为(14.0±9.0)min和(6.8±1.1)h;Cmax1和Cmax2分别为(1.38±0.16)和(1.62±0.71)μg/mL;黄芩苷的CL/F为(4.72±1.68)L/h,汉黄芩苷的CL/F为(3.04±0.98)L/h.结论该方法经考察符合生物样品的测定要求,可应用于大鼠体内黄芩苷和汉黄芩苷血药浓度的测定和药动学研究.大鼠ig黄芩水煎剂后血浆中黄芩苷和汉黄芩苷质量浓度存在双峰现象,黄芩苷的口服清除率大于汉黄芩苷.

HPLC测定御感袋泡茶中葛根素和黄芩苷的含量

目的：采用高效液相色谱法测定黄芩、葛根及其制剂御感袋泡茶中黄芩苷和葛根素的含量，评价该制剂的质量。方法与结果：黄芩苷测定以ＫＹＷＧ－Ｃ１８为固定相，０．５％磷酸－甲醇－Ｎ，Ｎ－二甲基甲酰胺（１３∶１０∶１）为流动相，ＵＶ检测波长为２７６ｎｍ，黄芩苷在０．１～０．０１ｍｇ／ｍｌ浓度范围与峰面积呈直线关系，回归方程为Ｙ＝０．００１８＋９．９５×１０－８Ｘ，ｒ＝０．９９９６，平均回收率为１０２．８％，ＲＳＤ为１．８６％（ｎ＝５）。葛根素测定以ＫＹＷＧ－Ｃ１８为固定相，水－甲醇－Ｎ，Ｎ－二甲基甲酰胺（４０∶１０∶３）为流动相，ＵＶ检测波长为２５０ｎｍ，葛根素在０．２～０．０２０ｍｇ／ｍｌ浓度范围与峰面积呈直线关系，回归方程为Ｙ＝１．５×１０－４＋１．０９×１０－７Ｘ，ｒ＝０．９９９９，平均回收率为１０１．７％，ＲＳＤ为１．６２％（ｎ＝５）。结论：本法简便、快速。

HPLC法测定清肝散结颗粒中黄芩苷、汉黄芩苷、野黄芩苷、黄芩素及汉黄芩素

目的对清肝散结颗粒（猫人参、石见穿、白花蛇舌草、半枝莲及黄芩等）中所含的黄酮类化学成分黄芩苷、汉黄芩苷、野黄芩苷、黄芩素及汉黄芩素同时进行测定，建立制剂质量控制方法。方法采用高效液相色谱法，Wa—tersXterraRp．C，。色谱柱（3．0mm×100mm，3．5Ixm），流动相为乙腈（A）与0．1％甲酸水溶液（B），梯度洗脱，体积流量0．4mL／min，柱温20℃，紫外检测波长为275nm，进样量5txL，运行时间60min。结果5个待测化合物与周围干扰峰达到基线分离，线性范围分别为黄芩苷4．604—460．4wg／mL（r=0．9999）；汉黄芩苷0．7704—77．04斗g／mL（r=0．9996）；野黄芩苷0．4157—41．57斗g／mL（r=0．9998）；黄芩素0．8456～84．56斗∥mL（r=0．9999）；汉黄芩素0．7992～79．92斗g／mL（r=0．9997），Et内／日间精密度均小于3％（n=3），平均回收率在97％～102％之间（n=6）。清肝散结颗粒中黄芩苷、汉黄芩苷、野黄芩苷、黄芩素及汉黄芩素的含有量分别为3．798、0．8299、0．1805、0．1589、0．0726mg／g。结论该法简便、快捷、结果准确、重复性好、实用性强，可用于清肝散结颗粒中的质量控制。

多波长RP-HPLC法测定双黄连口服液中黄芩苷、绿原酸和连翘苷

目的:建立同时测定双黄连口服液(黄芩、金银花、连翘)中黄芩苷、绿原酸和连翘苷的分析方法。方法:采用多波长RP-HPLC法,色谱柱为Agilent Zorbax SB C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相:(A)0.3%的甲酸水溶液、(B)乙腈;线性梯度洗脱依次为14%～20%/0～12 min,20%～30%/12～13 min,30%～65%/13～25 min和65%/25～35 min;柱温:30℃;流速:1.0 mL/min。结果:黄芩苷、绿原酸和连翘苷分别在0.225～3.60μg,0.032 4～0.518 4μg,0.135～2.16μg的范围内线性关系良好,平均回收率分别为100.5%,102.0%,99.62%,RSD分别为0.75%,3.9%,1.1%。结论:本法简便、准确、重现性好,可用于双黄连口服液中黄芩苷、绿原酸和连翘苷的同时测定。

RP-HPLC法测定兔血浆中黄芩苷含量

目的采用RP HPLC法测定家兔血浆中黄芩苷的浓度。方法用乙腈沉淀血浆蛋白 ,上清液直接进样测定。色谱柱为DiamonsilTMC18柱 ;流动相为甲醇 水 磷酸 ( 5 0∶5 0∶0 2 ,V∶V∶V) ,流速1 0mL/min ;检测波长为 2 77nm ,以对硝基苯甲酸为内标物。结果在黄芩苷浓度为 0 1～5 0mg/L内线性关系良好 (r =0 9975 ,日内、日间RSD分别≤ 5 4 %和≤ 7 2 % ,平均回收率为1 0 0 1 %。结论方法简便快速 ,适用于黄芩苷的血药浓度测定及药代动力学研究。

HPLC法测定不同规格并头黄芩的黄芩苷和汉黄芩苷含量

目的考察4种不同规格并头黄芩的药用价值和黄芩苷提取条件。方法采用HPLC法测定不同规格并头黄芩的黄芩苷和汉黄芩苷含量。结果4种不同规格并头黄芩中黄芩苷含量依次为12.89%、13.82%、11.75%和10.85%,汉黄芩苷含量依次为0.28%、0.22%、0.24%和0.27%;随提取溶剂中醇浓度的增加,黄芩苷提取率先增高后降低,碱性条件降低黄芩苷提取率。结论4种不同规格并头黄芩的黄芩苷和汉黄芩苷含量差异不大,且黄芩苷含量均高于《中华人民共和国药典》要求;提取条件为50%中性乙醇提取最佳。

HPLC法同时测定银翘柴桂颗粒中绿原酸、芍药苷和黄芩苷

目的为有效控制银翘柴桂颗粒(金银花,白芍,黄芩,重楼等)的质量,建立制剂中绿原酸、芍药苷和黄芩苷的HPLC定量测定方法。方法色谱柱Kromasil C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相甲醇-0.1%磷酸梯度洗脱;检测波长绿原酸和黄芩苷327 nm、芍药苷230 nm;体积流量1.0 mL/min。结果绿原酸、芍药苷和黄芩苷分别在0.068 88～0.688 8μg、0.066 96～0.669 6μg和0.121 6～1.216μg的范围内呈良好的线性关系,加样回收实验平均回收率103.70%、103.31%、97.92%。RSD为1.07%、2.07%和1.32%。结论此法操作简捷,结果准确可靠,精密度好,可用于银翘柴桂颗粒中绿原酸、芍药苷和黄芩苷的定量测定。

三黄泻心汤HPLC指纹图谱研究

目的建立三黄泻心汤的HPLC指纹图谱分析方法,为研究三黄泻心汤的药效物质基础和不同配伍的有效成分变化提供可行手段。方法采用HPLC法建立指纹图谱,选用Shimadzu ODS色谱柱(150 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-0.1%磷酸水溶液(含0.01 mol/L磷酸二氢钾,pH 2.8)梯度洗脱,体积流量为1.0 mL/min,检测波长260 nm。通过对全方与各组成药味的阳性和阴性对照组指纹图谱中各峰相对保留时间的比较分析。进行主要色谱峰的组成药味归属;利用色谱峰保留时间的对比及向全方样品中加入对照品的方法,鉴定相关色谱峰。结果建立了三黄泻心汤的HPLC指纹图谱,10批样品相似度均大于0.92。以黄芩苷为参照峰,标示出32个共有峰,确认了其中11个活性成分峰,并说明了其药材归属。结论该实验方法简便、准确,重复性好.具有良好的精密度和较好的分离效果,为三黄泻心汤及相关制剂的质量控制提供科学依据。

HPLC法测定苦参软膏中苦参碱、槐定碱和氧化苦参碱

目的建立苦参软膏(苦参总碱等)中苦参碱、槐定碱和氧化苦参碱的定量测定方法。方法采用RP-HPLC法,以Inertsil ODS-3的色谱柱(5μm0,.46 cm×15 cm)分离,乙腈-0.1%磷酸溶液(18∶82v,/v)(三乙胺调节pH值至8.0)为流动相洗脱,体积流量1.0 mL/min,检测波长220 nm。结果苦参碱、槐定碱和氧化苦参碱分别在0.078 08～7.808μg、0.099 6～9.96μg和0.020 04～2.004μg范围内进样量与峰面积呈良好的线性关系,相关系数均为1.000 0,平均回收率分别为97.7%(RSD为1.8%,n=9)、99.9%(RSD为1.8%,n=9)、97.8%(RSD为2.2%,n=9)。结论本法重复性好、灵敏度高、定量准确,可作为苦参软膏质量控制方法之一。

HPLC测定黄芩正气胶囊中橙皮苷、黄芩苷、和厚朴酚、厚朴酚的含量

目的:建立复方制剂黄芩正气胶囊(黄芩、陈皮、厚朴等)中多种有效成分的含量测定方法。方法:采用Phenomenexluna C18(2)柱,甲醇-0.2磷酸溶液梯度洗脱;检测波长:294nm;柱温:35°C。结果:采用HPLC法检测制剂中橙皮苷、黄芩苷、和厚朴酚、厚朴酚,其分离度和线性关系良好,回收率分别为橙皮苷99.25,RSD为1.034;黄芩苷98.70,RSD为3.05;和厚朴酚99.32,RSD为2.44;厚朴酚100.07,RSD为2.67。结论:本测定方法简便可行、重复性好,可用于本制剂的质量控制。

HPLC法同时测定芩连片中黄芩苷﹑黄芩素和汉黄芩素的含量

目的建立同时测定芩连片中黄芩苷、黄芩素和汉黄芩素含量的HPLC方法。方法采用Dia-monsil C18柱(200 mm×4.6 mm,5μm)分离,以甲醇-体积分数为0.4%的磷酸溶液为流动相梯度洗脱,流速为1.0 mL.min-1,检测波长为277 nm,柱温为35℃。结果黄芩苷、黄芩素及汉黄芩素的线性范围分别为36.8～368.0 mg.L-1(r=0.999 7)、1.75～17.5 mg.L-1(r=0.999 8)、1.50～15.0mg.L-1(r=0.999 9),黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素的平均回收率分别为97.3%(RSD=1.8%)、101.1%(RSD=1.8%)、99.0%(RSD=2.0%)。结论 HPLC法可用于芩连片的质量控制。

HPLC测定12种中药制剂中黄芩甙含量

本文用ＨＰＬＣ方法测定了１２种中药制剂中黄芩甙含量，所建立的色谱方法使１２种中药制剂及生药中黄芩甙与其它成分均达较好的分离。本文还对生药中黄芩甙的提取条件进行了考察，结果表明以４５％甲醇超声提取方法较佳。该法简便、快速、精密度好。适合制剂生产中多批量样品的质量控制。

抗敏胶囊主要成分的HPLC法分析

目的 采用高效液相色谱法分析抗敏胶囊中主要成分（黄芩苷和淫羊霍苷）。方法 测定黄芩苷,以Diamosil C18柱（250mm×4.6mm）为色谱柱;0.05mol/L磷酸水溶液-乙腈（70:30）为流动相;流速1ml/min;检测波长277nm;测定淫羊霍苷,以Spherisorb C18（250mm×4.6mm）为色谱柱;乙腈-水-冰醋酸（22:78:0.1）为流动相;流速1ml/min;检测波长270nm。结果 黄芩苷的平均回收率为99.2％,淫羊霍苷的平均回收率为100.4％,符合分析要求,重复性试验的RSD分别为:黄芩苷0.84％,淫羊霍苷1.6％。结论 重复性试验结果良好。另外还对样品的提取条件和测定条件进行了优选,为评价含黄芩苷和淫羊霍苷类药材及其制剂的质量提供了一个灵敏、准确和快速的测定方法。