UPLC指纹图谱结合化学计量学的白花蛇舌草真伪鉴别研究

目的:建立白花蛇舌草及其伪品水线草的UPLC指纹图谱,结合化学计量学,进行真伪鉴别。方法:建立白花蛇舌草和水线草的UPLC指纹图谱,对主要色谱峰进行化学指认及快速检识,利用两者化学成分差异结合化学计量学分析,开展真伪鉴别。结果:分别建立了两者UPLC指纹图谱方法并评价了多批次的相似度;白花蛇舌草22个共有峰中的10个、水线草16个共有峰中的5个及4个非共有峰得到了指认或检识;主成分分析(PCA)可将真品、伪品分为两组;而偏最小二乘法分析(OPLS-DA)显示车叶草酸甲酯等5个色谱峰是分组的主要原因;白花蛇舌草中的(E)-6-O-阿魏酰鸡屎藤次苷甲酯、(Z)-6-O-香豆酰鸡屎藤次苷甲酯,水线草中的槲皮素-3-O-桑布双糖苷可作为两者的3个特征差异峰用于白花蛇舌草真伪鉴别。结论:将UPLC指纹图谱与化学计量学方法相结合,可用于白花蛇舌草真伪鉴别,从而为提高白花蛇舌草整体质量控制方法提供参考。

白花蛇舌草药材的HPLC指纹图谱研究

目的:建立白花蛇舌草药材HPLC指纹图谱,结合化学计量学手段,对多批次药材进行质量控制。方法:采用C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈-水(各含0.1‰乙酸)为流动相梯度洗脱,流速0.8 mL/min,检测波长238 nm,柱温30℃;建立白花蛇舌草药材HPLC指纹图谱,通过比对化学分离对照品的保留时间,对主要特征峰进行化学指认;对22批药材进行相似度评价,并进行主成分分析和聚类分析。结果:建立了专属性、精密度、重现性和稳定性均较好的白花蛇舌草药材HPLC指纹图谱;11个特征峰得到明确化学指认;17批白花蛇舌草指纹图谱相似度值明显高于5批伪品;主成分分析结果显示,17批白花蛇舌草密集分布在一个区域,而5批伪品离散分布在此区域外;对22批药材进行聚类分析,17批白花蛇舌草聚为一类,5批伪品均未与其聚为一类;进一步运用聚类分析对17批白花蛇舌草进行质量评价,总共可聚为4类。结论:将HPLC指纹图谱与化学计量学手段相结合,可对白花蛇舌草进行真伪鉴别和质量评价,可为提高其整体质量控制方法提供参考。

白花蛇舌草化学成分研究

目的：研究白花蛇舌草水提取部位的化学成分。方法：药材水提取液用大孔吸附树脂、硅胶、MCI、Sephadex LH-20柱色谱、ODS中压液相色谱及半制备HPLC进行分离,并通过理化性质和波谱数据鉴定化合物结构。结果：从白花蛇舌草中分离得16个化合物,分别鉴定为：车叶草苷（1）、去乙酰车叶草苷（2）、京尼平苷（3）、10-去氢京尼平苷（4）、交让木苷（5）、diffusoside A（6）、diffusoside B（7）、松柏苷（8）、鸡屎藤次苷甲酯（9）、乙酰鸡屎藤次苷甲酯（10）、去乙酰车叶草酸苷甲酯（11）、羟异栀子苷（12）、水晶兰苷甲酯（13）、galioside 10-acetate（14）、地芰普内酯（15）、（＋）-neo-olivil（16）。结论：其中,化合物3、8、14~16均为首次从该植物中分离得到。

白花蛇舌草中齐墩果酸和熊果酸的HPLC测定

建立了HPLC法测定白花蛇舌草中齐墩果酸和熊果酸的含量。采用C_(18)柱,流动相为甲醇-水-冰乙酸(85：15：0．3),检测波长为210nm。两者分别在22～440、42～840μg/ml范围内线性关系良好,平均同收率分别为97．8%和97．1%。

白花蛇舌草总黄酮的抗炎及抗菌作用

目的观察白花蛇舌草总黄酮抗炎及抗菌作用。方法采用二甲苯诱导小鼠耳肿胀模型、大鼠松节油气囊肉芽增生模型、新鲜蛋清诱导大鼠足爪肿胀模型、醋酸所致小鼠毛细血管通透性增高试验和体外抗菌试验,观察白花蛇舌草总黄酮的抗炎及抗菌作用。结果白花蛇舌草总黄酮(15、30、60mg·kg-1)对二甲苯诱导的小鼠耳肿胀和醋酸所致小鼠毛细血管通透性增高有一定的抑制作用;白花蛇舌草总黄酮(12、24、48mg·kg-1)对大鼠松节油气囊肉芽增生和新鲜蛋清诱导大鼠足爪肿胀亦有明显的抑制作用;在体外,白花蛇舌草总黄酮对球菌和杆菌均具有不同程度的抑菌和杀菌作用,且对球菌的作用优于杆菌。结论白花蛇舌草总黄酮具有抗炎及抗菌作用。

白花蛇舌草提取物抗氧化作用的研究

研究了白花蛇舌草的水、乙醇、丙酮、氯仿、乙醚、石油醚提取物的抗氧化活性及其有效成分。结果表明 :在花生油中 ,这 6种溶剂的提取物均有抗氧化作用 ,以丙酮提取物的抗氧化作用最强 ,其最适使用质量分数为 0 .12 %。质量分数 0 .12 %的丙酮提取物的抗氧化活性低于质量分数 0 .0 2 %的茶多酚 ,但高于质量分数 0 .0 2 %的BHT、BHA、VC、VE。白花蛇舌草提取物的抗氧化成分以黄酮、萜类、羟基蒽醌。

白花蛇舌草总黄酮的免疫调节作用

目的 研究白花蛇舌草总黄酮(FOD)的免疫调节作用。方法 通过测定小鼠脾细胞IgM抗体形成,脾淋巴细胞的增殖反应,小鼠血清IL- 2和IFN -γ含量以及观察对小鼠白细胞数量的影响,研究白花蛇舌草总黄酮的免疫调节作用。结果 白花蛇舌草总黄酮(15、30、60mg·kg-1 )促进免疫功能低下小鼠由ConA或LPS诱导的脾淋巴细胞的增殖反应,并提高小鼠血清IL 2和IFN -γ的含量;白花蛇舌草总黄酮(60mg·kg-1 )促进免疫功能低下小鼠脾脏IgM抗体形成,并升高抗肿瘤药物(环磷酰胺或阿糖胞苷)所致的小鼠白细胞减少。结论 白花蛇舌草总黄酮具有增强机体特异性免疫功能和非特异性免疫功能的作用。

白花蛇舌草化学成分的研究

采用聚酰胺、Sepphadex LH-20、硅胶等多种色谱柱对白花蛇舌草的化学成分进行分离纯化，并根据化合物的理化性质和光谱数据鉴定其结构为：去乙酰车叶草甙（1）、车叶草甙（2）、鸡屎藤甙甲酯（3）、车叶草酸（4）、去乙酰车叶草酸甲酯（5）和dapbylloside（6）。其中化合物6为首次从该属植物中分离得到，化合物1,5、6为首次从该种植物中得到。

白花蛇舌草化学成分研究进展

介绍了白花蛇舌草（Oldenlandia diffusa willd）的研究概况及其发展前景．通过查阅国内外资料，对该植物的化学成分研究进展进行了综述．白花蛇舌草含有蒽醌类、萜类、甾类、有机酸类、多糖类等化学成分．药理研究表明，该植物具有抗菌、抗炎、抗肿瘤等作用．

白花蛇舌草化学成分的研究

从茜草科植物白花蛇舌草(Oldenlandia diffusa (Willd)Roxb.)的水提取物中分离得到三个化合物,1,2,3。经理化常数测定及UV,IR,NMR,MS分析以及衍生物制备等方法,鉴定化合物1为熊果酸,化合物2为齐墩果酸,化合物3为4,4′-二羟基-α-古柯间二酸,其中化合物3为首次从天然界分得。

液质联用法测定白花蛇舌草齐墩果酸与熊果酸含量

目的建立白花蛇舌草中齐墩果酸和熊果酸含量测定方法。方法采用液质联用(LC-MS)法,色谱柱Hypersil ODS C18(150mm×4.6mm,5μm),流动相甲醇-0.05%冰醋酸(75:25),二极管阵列检测器,流速0.2mL·min-1,柱温45℃,质谱采用大气压化学离子化探头,选择性离子流模式(正离子)。结果两种有机酸的平均加样回收率分别为98.87%(RSD=3.09%)和100.78%(RSD=1.68%)。结论该方法快速简便,灵敏度高,重现性好,可用于白花蛇舌草的质量控制。

白花蛇舌草抑菌作用研究

目的考察白花蛇舌草提取物对G+和G-的抑菌效果。方法采用打孔法和滴注法测定了白花蛇舌草95%乙醇提取物对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌、镰刀菌的抑菌作用。结果20%白花蛇舌草提取物对绿脓杆菌的抑菌环直径为(18.86±0.56)mm,大肠杆菌的为(12.78±0.44)mm;对4种供试菌的最低抑菌浓度(MIC)分别为2.0%,0.5%,0.25%,0.05%。结论白花蛇舌草提取物对革兰氏阴性菌的抑菌作用较革兰氏阳性菌明显。

白花蛇舌草总黄酮对TGF-β1诱导的肝癌MHCC97-H细胞EMT的逆转作用及其机制

目的探讨白花蛇舌草总黄酮(FOD)对TGF-β1诱导肝癌细胞MHCC97-H上皮细胞间质转化(EMT)的逆转作用及其相关机制。方法用TGF-β1诱导MHCC97-H细胞建立EMT模型,再将其分为5组:正常对照组、TGF-β1组、TGF-β1+FOD组、TGF-β1+5-FU组及TGF-β1+FOD+5-FU组,分别干预48h,Transwell侵袭小室法检测细胞体外侵袭能力,Western blot法检测各组细胞中E-cadherin、vimentin蛋白的表达。结果与正常细胞形态相比,TGF-β1诱导后细胞呈现明显的长梭形,且侵袭能力增强(P=0.02);给予药物处理后,TGF-β1+FOD组、TGF-β1+5-FU组细胞的穿透能力较TGF-β1组减弱(P=0.03、P=0.02),且联合用药组减弱程度更加明显(P=0.01);Western blot结果显示,TGF-β1组细胞中E-cadherin蛋白表达显著降低(P=0.01),vimentin蛋白的表达显著增加(P=0.01),TGF-β1+FOD组、TGF-β1+5-FU组E-cadherin蛋白表达有所上调(P=0.03、P=0.02),vimentin蛋白的表达有所下调(P=0.04、P=0.03),且联合组变化更为显著(P=0.01)。结论 FOD能够逆转TGF-β1诱导的肝癌MHCC97-H细胞的上皮间质转化,其机制可能与其抑制TGF-β1诱导的E-cadherin蛋白下调及上皮细胞间质转化相关。

白花蛇舌草罗汉果保健饮料的研究

以白花蛇舌草为主要原料,加入10倍重量的水,在pH5、85～95℃条件下10～15min。冷却至30℃,加入0.5%果胶酶水解20min,过滤,调节pH6.5～6.7,过滤。按照白花蛇舌草提取液:罗汉果提取液:柠檬酸:维生素C为100ml∶15ml∶0.1g∶0.2g的比例进行调配,得到入口清香、回味甘甜纯厚、具有白花蛇舌草和罗汉果独特风味的天然中药材保健饮料。

白花蛇舌草对抗体形成细胞的作用研究

目的 :观察中药白花蛇舌草对小鼠抗体形成细胞的作用。方法 :用 10 0 %白花蛇舌草水浸出液定期给小鼠灌胃 ,然后进行小鼠抗体产生能力、血清 Ig G检测。结果 :用药组小鼠两项免疫学指标均显著升高 ,与对照组相比有非常显著性差异 (P<0 .0 1)。未见有副作用。结论 :白花蛇舌草有明显促进抗体形成细胞的作用。

白花蛇舌草化学成分研究

目的:研究白花蛇舌草的化学成分。方法:采用硅胶柱色谱、Sephadex LH-20柱色谱、重结晶等方法进行分离纯化,并通过理化性质和波谱数据鉴定化合物结构。结果:从白花蛇舌草中分离得到9个化合物,分别鉴定为:槲皮素(1)、山柰酚(2)、东莨菪素(3)、2-羟基-3-甲基蒽醌(4)、2-羟基-1-甲氧基蒽醌(5)、α-亚麻酸(6)、香草酸(7)、对羟基苯乙醇(8)、β-谷甾醇(9)。结论:其中,化合物6为首次从该属植物中分离得到,化合物7、8为首次从该种植物中分离得到。

薄层扫描法测定白花蛇舌草中β-谷甾醇含量方法的考察

目的 建立白花蛇舌草中 β-谷甾醇的含量测定方法。方法 薄层扫描法。结果 方法灵敏度高 ,重现性好 ,6个不同批次白花蛇舌草中 β-谷甾醇的含量为 0 .0 9%～ 0 .2 1 % ;平均加样回收率为 97.1 % ,RSD为 1 .2 8%。

福建产白花蛇舌草活性成分提取与含量测定

目的 研究福建产白花蛇舌草多糖和总黄酮的提取与含量测定。方法 采用苯酚 -硫酸法测定多糖含量 ,采用亚硝酸钠 -三氯化铝法测定总黄酮含量。结果 测得多糖含量为 9.2 6%,总黄酮含量为 10 .3 3 %。结论 与其它产地白花蛇舌草比较 ,福建产白花蛇舌草多糖和总黄酮的含量较高 ,适用于工业化制备。

白花蛇舌草总黄酮对肝癌MHCC97-H细胞增殖的抑制作用

目的:观察白花蛇舌草总黄酮(FOD)对肝癌MHCC97-H细胞增殖和凋亡的影响。方法:将生长良好的细胞分为空白组、FOD组、5-FU组及联合组四组,分别干预48小时,观察细胞的形态,MTT法检测其对肿瘤细胞增殖的抑制作用;流式细胞仪检测FOD对MHCC97-H肝癌细胞凋亡的影响。结果:FOD对肝癌MHCC97-H细胞有显著的抑制作用,并且具有剂量和时间依赖性,不但能使细胞密度减少,细胞变小,核固缩,而且能显著抑制人肝癌MHCC97-H细胞的增殖并诱导该细胞的凋亡(P<0.05)。结论:白花蛇舌草总黄酮能够通过抑制肿瘤细胞生长、促进肿瘤细胞凋亡,明显抑制肝癌MHCC97-H细胞的增殖。

白花蛇舌草总黄酮对鼻咽癌细胞株CNE1增殖和凋亡的影响

目的:探讨白花蛇舌草总黄酮(FOD)对鼻咽癌细胞株CNE1的增殖和凋亡的影响。方法:体外培养鼻咽癌细胞株CNE1,使用不同质量浓度的FOD作用24、48 h,分别使用CCK-8测定法检测细胞存活率,Annexin V-FITC凋亡检测试剂盒检测细胞凋亡的情况。结果:FOD对鼻咽癌细胞株CNE1具有抑制增殖作用,24 h的半数抑制量(IC50)为(27.0±2.5)mg/L,48 h的IC50为(12.1±1.3)mg/L,在一定质量浓度范围内,呈剂量-效应关系和时间-效应关系。FOD可诱导CNE1细胞凋亡,存在剂量-效应关系和时间-效应关系。结论:FOD对鼻咽癌细胞株CNE1有显著的抑制增殖作用,作用机制可能与诱导细胞凋亡有关。