高密度Oligo基因芯片筛选小鼠嗅球发育相关基因的研究

目的 研究小鼠嗅球发育相关基因表达谱,探讨嗅球(olfactorybulb ,OB)在室管膜前下区(anteriorsubventricularzone ,SVZa)神经干细胞的迁移及分化中的作用。方法 采用165 0 0点的小鼠高密度Oligo基因芯片对胚胎16d(embryonicday16,E16)、生后1d(postnatalday 1,P1)、7d(P7)、2 1d(P2 1)OB的基因表达情况进行检测,以4个时相点全脑等量混合样品作为对照。结果 通过筛选基因表达谱,得到5 2 77条在E16、P1、P7及P2 1OB中均有表达的基因,然后采用两两对比组合,得到6组数据,从中筛选出了5 81个差异在3倍以上的基因,分层聚类分析将其分为6大类,进一步分析了与SVZa区神经干细胞的迁移相关基因Slit2聚类同组的2 8个基因及与多巴胺神经元分化相关基因TH聚类同组的17个基因。结论 在小鼠嗅球发育中发现了5 81条表达差异≥3倍的基因,进一步通过对与Slit2相关的2 8个基因及与TH相关的17个基因的分析有助于揭示SVZa神经干细胞迁移及向多巴胺神经元分化的作用机制。

Oligo基因芯片分析黄芪多糖对脑缺血再灌注大鼠DND的保护作用

目的:用基因芯片分析黄芪多糖(APs)对脑缺血再灌注损伤大鼠海马组织迟发性神经元死亡(DND)相关基因表达的影响,探讨其保护作用机制。方法:以博奥公司定制的包含5 705条大鼠的Oligo基因表达谱芯片,研究脑缺血再灌注4 d的大鼠海马组织基因表达谱,观察黄芪多糖对大鼠脑缺血再灌注损伤基因表达的影响。结果:脑缺血再灌注4 d的大鼠海马组织共筛选出差异表达基因9条,而这9条基因全部表达下调。结论:黄芪多糖可引起9条基因下调,其中cyp21、Ifi27、S100a9、Hipk3是参与自由基、钙超载、免疫炎症反应和凋亡的基因。Slc2a13参与葡萄糖代谢,Irp94、Fgf21、Akap5、Admr的功能还不明确。黄芪多糖通过减轻免疫介导炎症反应,来保护CA1区锥体细胞的迟发性死亡。

大鼠慢性高眼压视网膜损害相关基因表达谱的研究

目的研究大鼠激光慢性高眼压视网膜损害相关基因表达谱的改变。方法采用5705点的大鼠高密度Oligo基因芯片,对运用532-二极管激光建立大鼠高眼压模型视网膜的基因表达情况进行检测,以对侧眼作为对照。结果通过筛选基因表达谱,得到5 277条在大鼠视网膜中有表达的基因,然后采用两两对比组合,从中筛选出了11条差异在2倍以上的基因,其中3条上调,8条下调。结论在大鼠高眼压模型视网膜中筛选到了11条表达差异>2倍的基因,可望为青光眼的神经损伤机制及治疗提供新的思路。

槲皮素对缺血缺氧损伤星形胶质细胞基因表达的影响

目的应用高密度寡核苷酸（Oligo）基因芯片技术研究槲皮素对缺血缺氧损伤的星形胶质细胞基因表达的影响。方法体外原代培养星形胶质细胞分为缺血缺氧组和缺血缺氧＋槲皮素处理组。2组细胞厌氧培养4h后缺血缺氧＋槲皮素处理组加入含50μmol／L槲皮素的培养液，缺血缺氧组加入等量培养液，培养24h后应用基因表达谱芯片筛选2组细胞表达差异的基因并用实时荧光定量PCR检测进行验证。结果基因表达谱芯片分析显示缺血缺氧＋槲皮素处理组与缺血缺氧组比较表达差异的基因共180个，其中上调基因49个，下调基因131个：实时荧光定量PCR结果显示缺血缺氧＋槲皮素处理组细胞与缺血缺氧组比较148个基因的表达发生变化．差异均有统计学意义（P〈0．05），其中上调基因34个，下调基因114个。实时荧光定量PCR与基因表达谱芯片结果的符合率为82．2％（148／180）。结论基因表达谱芯片分析有助于从分子水平全面了解槲皮素对缺血缺氧的星形胶质细胞的作用机制，也为进一步研究槲皮素和星形胶质细胞在缺血缺氧脑损伤中的作用奠定了基础。