外周组织胶质细胞发育与功能的研究进展

胶质细胞是中枢神经系统的重要组成单元,已有研究证实胶质细胞具有维持脑功能稳态,促进突触发育,维持血脑屏障结构功能完整等生理功能。此外,胶质细胞参与阿尔茨海默病、帕金森病等神经退行性疾病的发生与进展,并在中枢神经系统炎症性疾病中扮演不可或缺的角色。然而,外周组织中的胶质细胞长期未被关注,其发育分化谱系及生理功能仍有待阐明。文章针对外周组织中胶质细胞的发育起源、功能,及参与病理的细胞分子机制进行深入讨论,从而更全面地理解胶质细胞在外周组织中的功能。

PLP_(139-151)多肽诱导实验性自身免疫性脑脊髓炎大鼠的听觉和形态学改变

目的 制作实验性自身免疫性脑脊髓炎（experimntal autoimmune encephalomyelitis，EAE）动物模型，研究髓鞘蛋白脂质蛋白（proteolipid protein，PLP）139-151多肽诱导的EAE大鼠听觉和听觉传导径路组织学改变，探讨其对大鼠听力的影响。方法 动物分实验组和对照组，实验组大鼠用PLP139-151和含结核杆菌的完全福氏佐剂混合制成的抗原配剂行双侧后肢足垫下注射，制作EAE大鼠模型，对照组用生理盐水混合完全福氏佐剂注射。观察大鼠免疫前后体重变化和临床症状评分，检测EAE大鼠免疫前后听性脑干反应（auditory brajnstem response，ABR）、听神经复合动作电位（compound action potential，CAP）、中潜伏期反应（middle latency response，MLR）及畸变产物耳声发射（distortion products otoacoustic emissiom，DPOAE）的变化，并利用电镜、免疫组织化学染色和Western blot等方法观察EAE大鼠听神经及脑干组织学改变。结果 免疫后EAE大鼠体重降低，症状评分在免疫后第14～21天达最高峰；ABR反应阈升高，ABR的波Ⅱ、Ⅴ潜伏期，Ⅰ-Ⅴ、Ⅱ-Ⅴ波间期和CAP的N2波潜伏期延长、波幅降低；MLR的Na、Pa潜伏期明显延长；DPOAE可正常引出，于免疫早期可见低频幅值升高；对照组听力学检测无明显改变。电镜下可见EAE大鼠听神经中枢端髓鞘松散、局部变薄或融合，免疫组织化学染色可见脑干白质局灶性脱髓鞘改变，可累及耳蜗核；Western blot显示听神经PLP蛋白表达减少，髓鞘碱性蛋白（MBP）未见明显改变。结论 EAE大鼠的病理改变主要浸润白质，可引起听觉中枢和听神经中枢端少突胶质细胞脱髓鞘，导致听觉中枢传导径路的听力学改变。

少突胶质前体细胞体外增殖与分化的实验研究

目的探讨体外条件下少突胶质前体细胞的增殖与分化特性。方法新生Sprague-Dawley(SD)大鼠取大脑皮层细胞行原代培养,第9～10天时分离少突胶质前体细胞,继续在化学条件培养基内生长。通过光、电镜及免疫化学技术研究少突胶质前体细胞的生长、分化情况,采用MTT法检测少突胶质前体细胞的增殖能力。结果原代培养第9～10天时混合胶质细胞出现明显的细胞分层,少突胶质前体细胞散布于星形胶质细胞表面。分离的少突胶质前体细胞呈Oligo2、PDGFR-α阳性,能进一步分化为成熟少突胶质细胞且表达MBP。MTT法检测显示少突胶质前体细胞在体外保持良好的增殖能力。结论少突胶质前体细胞在体外条件下继续保持定向分化及增殖生长的能力。

单纯疱疹病毒1型感染神经胶质细胞的代谢组学研究

目的研究单纯疱疹病毒1型(HSV-1)对人类少突胶质细胞(OL细胞)代谢的影响,从而探讨HSV-1感染的分子机制。方法将OL细胞随机分为两组,一组为感染组,感染HSV-1,一组为正常对照组,不感染HSV-1,运用核磁共振氢谱(~1H NMR)检测二组细胞培养液水相代谢产物,最后由偏最小二乘法-判别分析(PLS-DA)对数据进行分析。结果感染组与正常对照组细胞培养液水相代谢物的组成有显著差异:被HSV-1感染的OL细胞的培养液中,亮氨酸、谷氨酸、谷氨酰胺增多,丙氨酸、甘氨酸、组氨酸、异亮氨酸、乳酸减少。结论 HSV-1感染改变OL细胞的氨基酸代谢,HSV-1可能通过扰乱宿主细胞的代谢路径,促进自己的繁殖,并影响神经系统的功能活动。

1,25(OH)_2D_3在少突胶质细胞慢性缺氧中的作用

目的观察1,25(OH)_2D_3在少突胶质细胞慢性缺氧模型中的作用,为血管性痴呆的治疗提供理论基础。方法提取新生SD鼠皮质混合胶质细胞进行原代细胞培养,震荡分离后通过增殖及诱导分化得到成熟的少突胶质细胞。并且应用荧光免疫标记进行鉴定。随后在其中加入非致死量的氯化钴制造少突胶质细胞慢性缺氧模型。随后将其分为3组:空白对照组A、实验组B、给药对照组C。B、C两组分别给予1,25(OH)_2D_3以及孕激素。并分别设定3个时间点。分别观察三组少突胶质细胞的形态,应用MTT确定细胞存活率,应用Westen blot确定Akt相关抗凋亡蛋白的表达。结果给予1,25(OH)_2D_3的实验组B的细胞形态以及细胞存活率明显高于空白对照组A以及孕激素对照组C。并且与对照组A、C相比,实验组B抗凋亡蛋白的表达上调。结论 1,25(OH)_2D_3能够在少突胶质细胞慢性缺氧模型中起到保护作用,并且上调抗凋亡蛋白的表达。

参枝苓口服液对App/Ps1双转基因小鼠早期海马突触和髓鞘改变的影响

目的通过观察3月龄App/Ps1双转基因小鼠早期海马CA1区髓鞘和突触超微结构以及髓鞘特殊染色变化,判断参枝苓口服液对AD小鼠早期神经保护作用。方法由PrP-hAppk595N/M596L单转基因痴呆模型小鼠及PrP-hPs1dE9单转基因痴呆症模型小鼠杂交培育形成的App/Ps1双转基因小鼠模型是研究阿尔茨海默病的常用疾病模型。将3月龄App/Ps1双转基因小鼠随机分成模型组、多奈哌齐组[0.92mg/(kg·d)],参枝苓高剂量组[50g/(kg·d)]、参枝苓中剂量组[25g/(kg·d)]、参枝苓低剂量组[12.5g/(kg·d)],每组9只;另将9只同月龄同背景C57BL/6J小鼠为对照组。连续灌胃3个月,实验结束后取小鼠海马CA1区组织进行电镜切片并观察此区域髓鞘以及突触相关的超微结构,运用神经髓鞘固蓝染色法对髓鞘进行染色分析。结果电镜下观察显示,模型组与对照组相比,小鼠海马CA1区突触数量减少(P<0.01),神经元结构出现退行性改变、少突胶质细胞形态学呈凋亡前状态以及髓鞘板层结构出现显著崩解;与模型组相比,各药物干预组小鼠海马CA1区突触数量增多(P<0.01),神经元和少突胶质细胞形态结构较完整、染色质均匀,髓鞘板层结构明显好转。特殊染色法显示模型组较于对照组髓鞘纤维明显减少、染色变浅,各干预组髓鞘纤维分布均呈不同程度增加且染色加深。结论参枝苓口服液可能通过增加App/Ps1双转基因小鼠海马CA1区突触数量以及改善髓鞘、少突胶质细胞和神经元相关结构形态来发挥AD早期神经保护作用。

大鼠皮质少突胶质细胞培养条件的优化

背景:由于少突胶质细胞主要来自少突前体细胞,实验通过提取少突胶质前体细胞获取少突胶质细胞的过程中,选择合适的培养基和细胞接种密度对生长及形态学观察具有重要影响。目的:对比优化少突胶质细胞的培养条件。方法:取48 h内的SD新生鼠大脑皮质前体少突胶质细胞。分别用DMEM/高糖、DMEM/F12培养基培养少突胶质前体细胞,每组接种密度分别2×104/cm2,4×104/cm2,8×104/cm2,16×104/cm2,32×104/cm2,64×104/cm2;分别于少突胶质前体细胞贴壁72 h后,进行诱导分化,分化7 d后的少突胶质前体细胞在光镜下观察细胞形态变化并通过免疫荧光技术对细胞进行鉴定。结果与结论:DMEM/高糖、DMEM/F12培养基以2×104/cm2,4×104/cm2,8×104/cm2接种密度时,可辨识完整少突胶质前体细胞形态。诱导分化7 d后,免疫荧光鉴定提示3组少突胶质前体细胞均可呈现髓鞘碱性蛋白阳性,F12组中2×104/cm2,4×104/cm2,8×104/cm2接种密度条件下细胞均数分别为16.40±3.30,49.95±2.33,76.95±4.86,高于相应条件下的高糖组12.65±2.53,32.10±1.17,54.05±1.56(P<0.05)。结果表明,DMEM/F12较DMEM/高糖培养基适于少突胶质细胞培养,在一定范围内,少突胶质前体细胞分化为少突胶质细胞随接种密度成梯度增多,接种密度在4×104/cm2-8×104/cm2范围对观察细胞形态观察较为适合。

实验性变态反应性脑脊髓炎AQP-4、CD4^+CD25^+调节性T细胞研究

目的:以髓鞘少突胶质细胞糖蛋白细胞外免疫球蛋白样结构域(MOGIgd)为抗原免疫C57BL/6小鼠,建立EAE模型,并检测AQP-4、CD4+CD25+T细胞的表达水平。方法:①采用分子克隆技术诱导表达MOGIgd-TrxA融合蛋白,纯化后以此融合蛋白为抗原于侧腹壁皮下多点注射免疫C57BL/6小鼠作为实验组(MOG组);同时以硫氧还蛋白(TrxA)、豚鼠脊髓匀浆(GPSCH)免疫小鼠分别作为阴性、阳性组。评估动物的临床神经功能、组织病理情况,评价模型的质量。②免疫组化法、荧光定量PCR技术测定AQP-4表达水平;经流式细胞仪(FACS)检测小鼠脾脏中CD4+CD25+调节性T细胞。结果:①MOG组及GP-SCH组小鼠均呈慢性非缓解型病程,两组在发病时间、达峰时间、临床神经功能评分等方面差异无统计学意义(P>0.05)。TrxA组无一动物发病。模型组(包括MOG组和GPSCH组)动物HE染色可见血管周围炎性细胞浸润,胶质结节形成,髓鞘染色可见斑片状髓鞘脱失,大脑、小脑、脑干和脊髓均有不同程度受累。免疫组化定性和半定量分析显示MOG组和GPSCH组病灶周围炎症浸润处AQP-4表达与TrxA组相比明显增高(P<0.05);②MOG组CD4+CD25+T细胞占CD4+T细胞比例为(4.71±1.61)%,GPSCH组为(1.44±0.65)%,均明显低于TrxA组(P<0.01),且MOG组和GPSCH组之间的差异亦具有统计学意义(P<0.01)。结论:用MOGIgd免疫C57BL/6小鼠诱导EAE模型稳定,发病率高,为今后进一步研究MS的免疫发病机制和采取有效治疗措施打下基础。EAE模型动物AQP-4的表达量与炎症浸润的严重程度相关。

氯倍他索干预鼻黏膜来源外胚层间充质干细胞向少突胶质样细胞分化及机制

背景:氯倍他索是临床工作中常用的糖皮质激素类药物,鼻黏膜来源外胚层间充质干细胞在体外具有向少突胶质样细胞分化的潜能,氯倍他索能否促进其向少突胶质样细胞分化及其潜在的机制尚不得知。目的:观察氯倍他索对鼻黏膜来源外胚层间充质干细胞向少突胶质样细胞分化的影响,探讨其可能的机制。方法:贴壁筛选法分离培养获取SD大鼠鼻黏膜来源外胚层间充质干细胞,免疫荧光法鉴定其特性和纯度。MTT法检测0-10μmol/L氯倍他索对鼻黏膜来源外胚层间充质干细胞增殖能力的影响。取生长良好的第3代鼻黏膜来源外胚层间充质干细胞,用含氯倍他索的无血清诱导分化培养液使其向少突胶质样细胞分化,氯倍他索浓度为0,2.5和5μmol/L。倒置显微镜观察细胞形态的变化,免疫荧光和免疫印迹方法检测少突胶质细胞相关蛋白MBP和OLIG2的表达,免疫印迹法检测SHH信号通路相关蛋白SHH表达水平。结果与结论:(1)体外培养的鼻黏膜来源外胚层间充质干细胞高表达vimentin和nestin;(2)低浓度的氯倍他索可促进细胞增殖;高浓度的氯倍他索则抑制细胞增殖,其中5μmol/L可能为最适增殖浓度;(3)鼻黏膜来源外胚层间充质干细胞成少突胶质样细胞诱导3 d后,氯倍他索组出现多极化形态,少突胶质细胞相关蛋白MBP、OLIG2以及SHH信号通路相关蛋白SHH的表达明显高于对照组;(4)结果表明,氯倍他索可能通过SHH信号通路促进鼻黏膜来源外胚层间充质干细胞向少突胶质样细胞分化。

脊髓损伤新生小鼠脑源性神经营养因子前体对少突胶质细胞存活及生长的影响

目的 研究脊髓损伤新生小鼠脑源性神经营养因子前体对少突胶质细胞存活及生长的影响.方法 分离新生小鼠大脑皮层少突胶质细胞前体细胞,进行体外原代培养;采用WB法观察脑源性神经营养因子前体及其受体分拣蛋白与神经营养素受体的表达水平.将浓度为1 μg·L-1脑源性神经营养因子前体设置为A组,10 μg·L-1脑源性神经营养因子前体设置为B组,100 μg·L-1脑源性神经营养因子前体设置为C组,空白对照组为100 μg·L-1牛血清白蛋白;每组设置6个平行副孔.采用β-tublin和结晶紫进行染色,观察少突胶质细胞前体细胞的细胞形态,评估不同浓度的脑源性神经营养因子前体对少突胶质细胞前体细胞的生产情况的影响.结果 脑源性神经营养因子前体及其受体分拣蛋白与神经营养素受体在少突胶质细胞前体细胞中的表达均呈现阳性;A组、B组、C组中的少突胶质细胞前体细胞的数量显著低于对照组,且随着浓度的增加,少突胶质细胞前体细胞数量逐渐下降,各组间比较差异均有统计学意义（P〈0.05）;与对照组比较,A组、B组、C组少突胶质细胞前体细胞突起显著减少,且面积显著缩小,各组间比较差异有统计学意义（P〈0.05）.结论 少突胶质细胞前体细胞可以内源性的表达脑源性神经营养因子前体F以及其受体,而脑源性神经营养因子前体的浓度对少突胶质细胞前体细胞的生长和存活具有显著的抑制作用,且这一作用机制可能与神经营养素受体-分拣蛋白通路相关.

胚胎发育不良性神经上皮瘤的临床病理特征(附1例报告)

目的探讨胚胎发育不良性神经上皮瘤(DNT)的临床病理特征。方法回顾性分析1例DNT患者的临床资料。结果本例为青年男性,首发症状为发作性肢体抽搐伴意识障碍。MRI显示颞叶T1WI低信号,T2WI高信号,无水肿及占位效应。病变由多结节特异性胶质神经元和微囊细纤维黏液性基质等成分组成,肿瘤细胞主要有神经元、少突胶质样细胞(OLC)和星形细胞3种成分,伴有皮质发育不良。免疫组织化学结果为神经元及部分OLC呈神经核抗原、神经突触素、神经元特异性烯醇化酶阳性表达;OLC呈S-100蛋白阳性表达;星形细胞呈胶质纤维酸性蛋白阳性表达;瘤细胞Ki-67阳性率为1%。结论 DNT好发于儿童和年轻人,部分患者有慢性癫痫病史。DNT的组织学特征是神经胶质及神经元成分。

非受体酪氨酸激酶对糖氧剥夺诱导的少突胶质细胞凋亡的影响及其机制

目的探讨非受体酪氨酸激酶(c-Abl)对糖氧剥夺(OGD)诱导的少突胶质细胞(OLs)凋亡的影响及其机制。方法体外培养少突胶质细胞系(oli-neu),分别经OGD处理第0、3、6、9小时时采用CELL TITER-GLO(CTG)法检测oli-neu的活力,使用Anexin V-FITC/PI试剂盒检测oli-neu的凋亡率,采用蛋白质免疫印迹实验(Western blot)检测oli-neu中酪氨酸245位点磷酸化的c-Abl(Y245-c-Abl)和酪氨酸182位点磷酸化的p38(p-p38)蛋白相对表达水平。从C 57 BL/6 J小鼠脑组织中分离并培养原代OLs,分别检测经OGD处理第0、3、6、9小时时OLs中Y245-c-Abl、p-p38蛋白相对表达水平;检测oli-neu经100 nmol/L ABL001预处理后再经OGD处理第6小时时的细胞活力、细胞凋亡率,以及oli-neu内Y245-c-Abl、p-p38的相对表达水平和活化的半胱氨酸蛋白酶-3(cleaved-caspased-3)和前体半胱氨酸蛋白酶-3(pro-caspased-3)蛋白比值;检测经100 nmol/L ABL001预处理后再经OGD处理第6小时时OLs中Y245-c-Abl、p-p38蛋白的相对表达水平。结果oli-neu经OGD处理第0、3、6、9小时后细胞活力逐渐下降、细胞凋亡率逐渐升高(F=249.10、68.18,P<0.05);Western blot结果显示,oli-neu和OLs经OGD处理第0、3、6、9小时时,各时间点细胞内Y245-c-Abl、p-p38蛋白的相对表达水平差异均有显著性(F=4.68~15.93,P<0.05);oli-neu经ABL001预处理再经OGD处理6 h后细胞活力明显升高、细胞凋亡率明显降低,oli-neu中Y245-c-Abl和p-p38蛋白的相对表达水平及cleaved-caspase-3/pro-caspase-3比值明显降低(t=2.80~4.23,P<0.05)。OLs经ABL001预处理再经OGD处理6 h后,OLs中Y245-c-Abl和p-p38蛋白的相对表达水平明显下降(t=3.06、3.79,P<0.05)。结论c-Abl参与了OGD诱导的oli-neu和OLs凋亡过程,而c-Abl抑制剂可以减轻细胞的凋亡,c-Abl促进细胞凋亡的机制可能是通过c-Abl-p38通路介导的。

人脐带间充质干细胞对新生大鼠脑白质损伤后神经胶质细胞及神经行为学的作用

目的 探讨人脐带间充质干细胞（human umbilical cord mesenchymal stem cells,HUcMSCs）移植对脑白质损伤（white matter damage,WMD）新生大鼠脑内少突胶质细胞及活化小胶质细胞的影响,以及新生大鼠远期神经行为学的改变. 方法 72只3日龄Sprague-Dawley大鼠行左侧颈总动脉结扎,并吸入6％O2和94％N2的混合气体4h,制成WMD模型.死亡12只,剩余60只随机分为实验组和对照组各30只.大鼠出生后0～24 h计为第1天,实验组大鼠于第3、4和5天每天腹腔注射HUcMSCs 1×106个（0.05 ml）,对照组大鼠于同时间点腹腔注射磷酸盐缓冲液0.05 ml.2组均于第10和21天分别取8只大鼠,免疫组织化学方法检测左侧脑组织中髓鞘碱性蛋白（myelin basic protein,MBP）和单核巨噬细胞抗原（ectodermal dysplasia,ED）-1染色阳性细胞.2组均于第10和21天分别取3只大鼠,Western印迹技术检测MBP和ED-1蛋白表达.2组分别取8只大鼠测量体重,并于第28天行神经行为学评估.两样本均数比较采用t检验. 结果 实验组第10和21天MBP染色阳性细胞数[（11.8±4.1）和（23.8±8.1）个]均高于对照组[（6.7±3.1）和（11.5±5.8）个,t值分别为2.81和3.49,P值均＜0.05],ED-1染色阳性细胞数[（20.8±3.4）和（19.1±2.8）个]均低于对照组[（32.8±4.2）和（29.5±5.2）个,t值分别为6.23和4.94,P值均＜0.01].实验组第10和21天MBP的表达量（1.3±0.1和1.1±0.1）均高于对照组（0.8±0.0和0.6±0.1,t值分别为7.53和6.68,P值均＜0.01）,ED-1的表达量（0.6±0.1和0.4±0.1）均低于对照组（1.0±0.1和0.8±0.1,t值分别为3.90和4.90,P值均＜0.01）.实验组第7、10、14、21和28天体重分别为（15.0±1.2）、（16.6±0.9）、（27.0±1.6）、（44.2±2.3）和（68.1±4.2）g,均高于对照组[分别为（12.7±1.6）、（13.5±2.0）、（23.6±1.9）、（38.4±0.9）和（60.0±4.2）g,t值分别为-3.11、-3.97、-3.67、-6.52和-3.72,P值均＜0.05）.第28天神经行为学测试：实验组旷场实验评分高于对照组[（36.5±2.9）与（24.3±3.6）分,t=7.36,P＜0.01],悬吊实验评分也高于对照组[（3.6±1.0）与（2.0±0.7）分,t=3.53,P＜0.01].实验组Cylinder实验左、右前足/双前足的比值[（49.8±13.3）％与（41.4±5.9）％]差异无统计学意义（t=0.86,P＞0.05）;对照组左前足/双前足的比值高于右前足/双前足[（49.5±11.3）％与（31.2±3.2）％,t=4.38,P＜0.01].结论 HUcMSCs可提高新生大鼠WMD模型病变区域内少突胶质细胞的数量,减少小胶质细胞的活化,对体格发育有良好促进作用,并且对神经行为有改善作用.

少突胶质前体细胞的培养及细胞缺氧缺糖模型的建立

目的获取高纯度的大鼠少突胶质前体细胞系并建立细胞缺氧缺糖模型。方法采用振荡分离纯化法和化学限定无血清培养基在体外获取纯化的大鼠少突胶质前体细胞,免疫荧光法对各分化阶段特异的表面抗原A2B5、O4、O1进行细胞鉴定。利用无糖培养基和连二亚硫酸钠造成O4阳性的少突胶质前体细胞的缺氧缺糖损伤,观察细胞的形态学改变,MTT法测细胞存活率。结果获得纯度95%以上的大鼠少突胶质前体细胞,O4阳性少突胶质前体细胞出现缺氧缺糖损伤的形态学改变,并随缺氧缺糖时间延长而加剧;细胞存活率随缺氧缺糖时间的延长逐渐下降,30、60min和90min细胞存活率均低于正常对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论振荡分离纯化法是体外培养大鼠少突胶质前体细胞的可靠方法,利用无糖培养基和连二亚硫酸钠可以建立细胞缺氧缺糖模型。

C57BL／6小鼠EAE模型的建立及Foxp3、CD4＋CD25＋调节性T细胞检测

目的以髓鞘少突胶质细胞糖蛋白细胞外免疫球蛋白样结构域（MOG驯）为抗原免疫C57BL／6小鼠，建立实验性自身免疫性脑脊髓炎（EAE）模型，并检测CIM＋CD25＋T细胞、Foxp3mRNA等指标的表达。方法采用分子克隆技术诱导表达MOGlgd-TrxA融合蛋白，纯化后以此融合蛋白为抗原于侧腹壁皮下多点注射免疫C57BL／6小鼠作为实验组（MOG组）；同时以硫氧还蛋白（TrxA）、豚鼠脊髓匀浆（GPSCH）、生理盐水免疫小鼠分别作为阴性、阳性及正常对照组。双盲法连续早晚观察30d，通过评估动物的临床神经功能、组织病理（HE染色和Kltiver．Barrera法髓鞘染色、免疫组化法）情况，评价模型的质量。流式细胞仪（FACS）检测小鼠脾脏中CD4＋CD25＋调节性T细胞；real—timePCR检测Foxp3mRNA的相对表达水平，并分析两者相关性。结果MOG组及GPSCH组小鼠均呈慢性非缓解型病程，两组在发病时问、达峰时间、临床神经功能评分等方面差异均无统计学意义（P〉0．05）。TrxA组及正常对照组无一动物发病。模型组（包括MOG组和GPSCH组）动物HE染色可见血管周围炎性细胞浸润，胶质结节形成，髓鞘染色可见斑片状髓鞘脱失，大脑、小脑、脑干和脊髓均有不同程度受累。免疫组化定性和半定量分析显示MOG组和GPSCH组病灶周围炎症浸润处AQP-4表达与TrxA组相比明显增高（P〈0．05）；MOG组CIM＋CD25＋T细胞占CIM＋T细胞比例为（4．71±1．61）％，GPSCH组为（1．44±0．65）％，均明显低于TrxA组和正常对照组（P〈0．01），且MOG组和GPSCH组之间的差异亦具有统计学意义（P〈0．01）。MOG组标准化Foxp3mRNA的表达量为2．26±1．97，GPSCH组为1．44±1．20，均低于TrxA组的8．58±3．34（P〈0．01）；但MOG组和GPSCH组间的差异无统计学意义（P〉0．05）。相关性分析显示，模型组小鼠CIM＋CD25＋调节性T细胞与roxp3mRNA表达水平间存在相关性（r=0．849，P〈0．05）。结论用MOGlgd免疫C57BL／6小鼠诱导EAE模型稳定，发病率高，为今后进一步研究多发性硬化的免疫发病机制和采取有效治疗措施打下基础。

小剂量干扰素-γ通过P27kip1影响少突胶质细胞前体分化的机制

目的 探讨小剂量干扰素-γ（interferon-γ,INF-γ）调节少突胶质细胞前体P27kip1表达的有关信号通路.方法 新生1 d的SD大鼠无菌条件下取出大脑皮层制成混合胶质单细胞悬液,用完全培养基培养7～10 d,采用振荡结合差速贴壁方法并用无血清化学条件培养基培养获取少突胶质细胞前体.少突胶质细胞前体培养同时向各组培养细胞中分别添加IFN-γ、AG490、Fludarabine,采用逆转录-聚合酶链反应技术、Western印迹和流式细胞技术检测P27kip1 mRNA及蛋白的表达和对细胞分化的影响.结果 （1）IFN-γ组较对照组细胞P27kip1 mRNA和蛋白表达量减少（t=85.535,P〈0.05;t=12.481,P〈0.05）,IFN-γ＋AG490组和IFN-γ＋Fludarabine组较IFN-γ组细胞P27kip1 mRNA和蛋白表达量增加（P〈0.05）.（2）IFN-γ组的JAK2/STAT1磷酸化程度高于其他3组（P〈0.05）.（3）IFN-γ组髓鞘碱性蛋白阳性细胞百分比为（68.42±2.53）%,相对于对照组[（88.21±1.97）%]明显减少（t=10.682,P〈0.05）,IFN-γ＋AG490组髓鞘碱性蛋白阳性细胞百分比为（57.63±2.75）%,相对IFN-γ组进一步下降（t=5.002,P〈0.05）,而IFN-γ＋Fludarabine组髓鞘碱性蛋白阳性细胞百分比[（79.53±4.15）%]相对IFN-γ组却有所增加（t=3.957,P〈0.05）.结论小剂量INF-γ通过JAK2/STAT1信号通路调节少突胶质细胞前体P27kip1的表达.Fludarabine能有效减弱小剂量INF-γ对少突胶质细胞前体分化成熟的抑制作用.

髓鞘形成与损伤相关疾病的研究进展及其与创伤后应激障碍的关联

少突胶质细胞是形成中枢神经系统髓鞘的细胞,有研究表明,少突胶质细胞的细胞骨架在髓鞘的形成过程中发挥了重要作用.少突胶质细胞的独特易损性所导致的髓鞘脱失在某些疾病中具有核心地位.与髓鞘损伤相关的指标有髓鞘碱性蛋白(MBP)、髓鞘相关糖蛋白(MAG)、少突胶质细胞转录因子(OLIG2)等蛋白.与髓鞘损伤所相关的疾病有视神经脊髓炎、多发性硬化、阿尔茨海默病等一些神经退行性病变以及抑郁症.创伤后应激障碍(PTSD)作为神经精神类疾病的一种,近年来其发病机制、治疗及预后受到广大学者的关注,但与之相关的因素仍有待于进一步深入探索与研究.现将从髓鞘形成、髓鞘损伤相关疾病的机制、各个指标在髓鞘损伤所对应的疾病中的具体变化等方面来看髓鞘的形成与损伤对PTSD的发展、恢复的影响.