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黄鳝卵原细胞移植研究
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作者 何坤 吴华东 +4 位作者 张士林 刘铮铮 阮记明 孙艺文 李福贵 《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期315-324,共10页
【目的】明确黄鳝卵原细胞是否能迁移、整合到斑马鱼生殖嵴上,为建立黄鳝异体生殖途径打下研究基础。【方法】通过酶消化法制备黄鳝卵原细胞悬液,经PKH26标记卵原细胞后显微注射到受体斑马鱼胚胎中,在荧光显微镜下追踪受体斑马鱼胚胎中... 【目的】明确黄鳝卵原细胞是否能迁移、整合到斑马鱼生殖嵴上,为建立黄鳝异体生殖途径打下研究基础。【方法】通过酶消化法制备黄鳝卵原细胞悬液,经PKH26标记卵原细胞后显微注射到受体斑马鱼胚胎中,在荧光显微镜下追踪受体斑马鱼胚胎中供体黄鳝卵原细胞的迁移、整合及增殖情况;采用组织形态学方法检测移植受体斑马鱼胚胎的发育情况,并以半定量PCR和荧光原位杂交检测受体斑马鱼胚胎中供体黄鳝卵原细胞标记基因nanos3的表达情况。【结果】黄鳝卵巢经蛋白酶消化后,分离得到的卵原细胞悬液浓度为2.4×10^(6)个/mL,以PKH26染色后在红色荧光下呈橙黄色。荧光追踪观察结果显示,在移植后0、12、24和48 hpt的受体斑马鱼胚胎中均能检测到供体黄鳝卵原细胞,且黄鳝卵原细胞迁移至受体斑马鱼胚胎的生殖嵴上进行整合及增殖,但72 hpt受体斑马鱼出膜后荧光信号丢失。组织形态学观察结果表明,黄鳝卵原细胞注入受体斑马鱼胚胎中48 hpt后其细胞质结构松散,生殖细胞由动物极向两端迁移而分化形成组织,72 hpt和30 dpt的移植受体斑马鱼与对照组斑马鱼无明显差别。半定量PCR检测结果显示,在48 hpt受体斑马鱼胚胎中能检测黄鳝nanos3基因表达,而在72 hpt和30 hpt受体斑马鱼中表达微弱。荧光原位杂交检测结果显示,48 hpt、72 hpt和30 dpt的移植受体斑马鱼均有黄鳝nanos3基因表达。【结论】黄鳝卵原细胞在48 hpt后仍存在于受体斑马鱼胚胎内,但72 hpt后在受体斑马鱼胚胎未检测到黄鳝卵原细胞,即黄鳝卵原细胞在斑马鱼受体中迁移并最终整合到生殖嵴上,但在斑马鱼出膜后无法继续存活。因此,为了提高黄鳝生殖细胞移植成功率应选择亲缘关系近的鱼种或构建性腺不育种质作为受体。 展开更多
关键词 黄鳝卵原细胞 斑马鱼胚胎 移植 nanos3基因 荧光追踪 荧光原位杂交 半定量PCR
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猪胎儿卵母细胞发生早期的细胞凋亡变化 被引量:3
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作者 霍道坦 陶勇 +4 位作者 王勇 权青 田宁宁 成志军 章孝荣 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期71-74,共4页
为研究猪卵母细胞发生早期卵巢上细胞的凋亡情况,制作妊娠33、40、46、54、61 d母猪胎儿卵巢的石蜡切片,并进行荧光染色。结果发现,母猪妊娠到33 d时,胎猪卵巢上即可见原始生殖细胞和卵原细胞的凋亡,随着妊娠时间的延长,凋亡也逐渐增加... 为研究猪卵母细胞发生早期卵巢上细胞的凋亡情况,制作妊娠33、40、46、54、61 d母猪胎儿卵巢的石蜡切片,并进行荧光染色。结果发现,母猪妊娠到33 d时,胎猪卵巢上即可见原始生殖细胞和卵原细胞的凋亡,随着妊娠时间的延长,凋亡也逐渐增加,妊娠33、40、46、54和61 d母猪胎儿卵巢上卵原细胞的凋亡率分别为3.13%、4.32%、5.50%、9.43%和11.10%,同时,颗粒细胞的凋亡率则分别为8.89%、12.45%、14.74%、17.96%和22.81%。结果说明,在猪胎儿卵母细胞发生早期,即开始发生了卵原细胞和颗粒细胞的凋亡,且有逐渐增加的趋势。 展开更多
关键词 胎儿 卵巢 卵原细胞 凋亡
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波纹龙虾卵巢的解剖学与组织学研究 被引量:3
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作者 刘慧玲 李长玲 +1 位作者 黄翔鹄 曹伏君 《水产科学》 CAS 北大核心 2009年第7期387-390,共4页
试验结果表明,波纹龙虾卵巢呈H状,位于消化道的背面,随着卵巢的发育颜色依次为乳白色、淡橙色、橙色和橙红色。卵子发生分为4个时期(8个亚期):增殖期(卵原细胞期)、卵黄合成前期(束状期、染色质核仁期)、卵黄合成期(油球期、卵黄板形成... 试验结果表明,波纹龙虾卵巢呈H状,位于消化道的背面,随着卵巢的发育颜色依次为乳白色、淡橙色、橙色和橙红色。卵子发生分为4个时期(8个亚期):增殖期(卵原细胞期)、卵黄合成前期(束状期、染色质核仁期)、卵黄合成期(油球期、卵黄板形成前期、卵黄板形成期、成熟前期)和成熟期;卵巢发育分为6个时期:增殖期、发育期、成熟前期、成熟期、排卵期和恢复期。 展开更多
关键词 波纹龙虾 卵巢 发育 卵原细胞 卵母细胞
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栉孔扇贝卵发生的超微结构和细胞化学 被引量:3
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作者 刘卫东 《应用与环境生物学报》 CAS CSCD 1999年第6期593-597,共5页
对栉孔扇贝Chlamysfarreri 的卵原细胞和卵母细胞发育过程的超微结构和细胞化学研究结果表明:卵原细胞的胞质中含大量的游离核糖体,细胞器不发达,蛋白质和RNA丰富而糖元贫乏;卵黄生成之前,卵母细胞中的核质膨大... 对栉孔扇贝Chlamysfarreri 的卵原细胞和卵母细胞发育过程的超微结构和细胞化学研究结果表明:卵原细胞的胞质中含大量的游离核糖体,细胞器不发达,蛋白质和RNA丰富而糖元贫乏;卵黄生成之前,卵母细胞中的核质膨大为生发泡;核仁发达,胞质中线粒体大为增多;卵黄体和皮层颗粒首先出现于核周,接近线粒体聚集处;卵黄生成盛期,卵母细胞的胞质内具平行片层粗面内质网和同心圆状粗面内质网,它们是生成卵黄体和皮层颗粒的主要细胞器,线粒体和高尔基器也参与了这两种内含物的生成;微胞饮作用也为细胞的发育提供某些物质;卵黄体含蛋白质和糖元,皮层颗粒富含多糖类;卵黄膜形成始于卵黄生成初期,先是细胞游离端的胞质出现一个富含多糖的突起,突起部的质膜微绒毛化,微绒毛分泌产生由中性多糖构成的卵黄膜,继而向四周扩展,并于卵母细胞成熟时覆盖整个细胞;RNA 合成贯穿于卵母细胞的整个发育期,延续至卵黄生成结束之后,成熟分裂临近之时. 展开更多
关键词 扇贝 栉孔扇贝 卵原细胞 母细胞 超微结构 细胞化学
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浮动弯角藻有性生殖和生殖生态 被引量:1
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作者 林均民 傅建卿 《厦门大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 1991年第3期307-311,共5页
在浮动弯角藻卵配生殖中发现两种特殊的形态发生;糖原孢囊里形成一个长椭圆形薄膜和原初细胞由复大孢子变形产生。在有性细胞大小范内常发生分段生殖和由此产生两次细胞复大现象。在低温(12℃)低光(1000 1x)和22.5‰盐度条件下,该藻呈... 在浮动弯角藻卵配生殖中发现两种特殊的形态发生;糖原孢囊里形成一个长椭圆形薄膜和原初细胞由复大孢子变形产生。在有性细胞大小范内常发生分段生殖和由此产生两次细胞复大现象。在低温(12℃)低光(1000 1x)和22.5‰盐度条件下,该藻呈最适的性化效应。 展开更多
关键词 浮动弯角藻 有性生殖 精原孢囊
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布氏轮藻(Chara braunii)生殖器官环境扫描电镜的观察
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作者 李树美 沈显生 张文锐 《微体古生物学报》 CSCD 北大核心 2004年第3期342-345,共4页
本文采用环境扫描电镜和光学显微镜 ,对布氏轮藻 (Chara braunii)的藏卵器和藏精器进行了仔细观察。结果表明 :藏卵器外的管细胞 (包围细胞或螺旋细胞 )在卵细胞受精以后 ,不但没有钙的沉淀、加厚 ,而且还呈现出逐渐萎缩 ,最终消失。因... 本文采用环境扫描电镜和光学显微镜 ,对布氏轮藻 (Chara braunii)的藏卵器和藏精器进行了仔细观察。结果表明 :藏卵器外的管细胞 (包围细胞或螺旋细胞 )在卵细胞受精以后 ,不但没有钙的沉淀、加厚 ,而且还呈现出逐渐萎缩 ,最终消失。因此 ,在古轮藻的研究上 ,常提到的包围细胞或螺旋细胞 ,实际上并非是细胞结构 ,而是受精卵的外壁。 展开更多
关键词 布氏轮藻 藏卵器 管细胞 包围细胞 受精卵 环境扫描电镜 生殖器官
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Understanding the Mechanism of Gamete Release in <i>Sargassum vulgare</i>C. Agardh
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作者 Inderdeep Kaur Reeta Kumari 《American Journal of Plant Sciences》 2012年第9期1266-1271,共6页
Sargassum vulgare C. Agardh shows androgynous receptacles, each bearing on an average 12 unisexual conceptacles which open outside by ostiole, and wherein gametangia (antheridia or oogonia) lie interspersed with parap... Sargassum vulgare C. Agardh shows androgynous receptacles, each bearing on an average 12 unisexual conceptacles which open outside by ostiole, and wherein gametangia (antheridia or oogonia) lie interspersed with paraphyses. Since out-put of eggs is extremely low, 4 - 6 per female conceptacle, Sargassum sp. ensures its survival under all eco-physiological conditions. The released oogonium is “wrapped” in sulphated polysaccharide-rich wall layer known to provide protection against desiccation. Oogonia after being “extruded” out of ostiole, are “incubated” on receptacle, where they grow into eggs that are easily contacted by spermatozoids. Gamete release is synchronous and almost simultaneous ensuring high rates of fertilization. The release occurs on days falling near a full moon or new moon, during low tides when conceptacles lie exposed. Gamete release occurs first from upper conceptacles, which “house” mature gametangia while lower ones are still developing. This results in gamete release over an extended period of time. The zygote dispersal and propagule recruitment also show adaptations selectively advantageous for the alga. 展开更多
关键词 GAMETE Release Mesochiton STALK oogonium Incubation PROPAGULE Dispersal SARGASSUM vulgare
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三倍体虹鳟卵巢发育中细胞凋亡与发育相关基因的表达 被引量:6
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作者 柳广昊 郝其睿 +4 位作者 黄天晴 苗畅奇 孙慧智 王雪薇 韩英 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2016年第9期15-18,287,共5页
为了研究三倍体雌性虹鳟在生长过程中出现的性腺发育停滞、卵原细胞发育异常的原因,试验采集180-300dpf时期二倍体和三倍体虹鳟的性腺组织,利用光镜、电镜切片和TUNEL染色进行组织与细胞学对比研究,利用实时荧光定量PCR分析对卵巢发... 为了研究三倍体雌性虹鳟在生长过程中出现的性腺发育停滞、卵原细胞发育异常的原因,试验采集180-300dpf时期二倍体和三倍体虹鳟的性腺组织,利用光镜、电镜切片和TUNEL染色进行组织与细胞学对比研究,利用实时荧光定量PCR分析对卵巢发育和配子发生过程发育具有调节作用的生长分化因子9(GDF9)、骨形态发生蛋白4(BMP4)和骨形态发生蛋白7(BMP7)在二、三倍体相同时期的表达差异。结果表明:180-300dpf虹鳟三倍体卵巢中的卵原细胞发生凋亡,除240dpf三倍体虹鳟BMP4表达量显著高于二倍体外,三倍体虹鳟中GDF9、BMP4和BMP7表达量显著低于同时期二倍体。说明三倍体虹鳟卵原细胞发育异常,最终发生凋亡,可能与GDF9、BMP4和BMP7的低表达有关。BMP4在调节卵母细胞发育的同时可能有抑制细胞凋亡的作用。 展开更多
关键词 虹鳟三倍体 卵原细胞 细胞凋亡 GDF9 BMP4 BMP7
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分离自蔬菜地的腐霉一新种及其rDNAITS序列分析(英文) 被引量:3
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作者 龙艳艳 韦继光 +4 位作者 黄翠流 何月秋 袁高庆 石雨 熊英 《菌物学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期795-800,共6页
从广西南宁收集的蔬菜地土壤样本中,分离得到一个新的腐霉种,命名为广西腐霉Pythium guangxiense。不同于其近似种,广西腐霉的孢子囊球形或亚球形;藏卵器球形、亚球形、椭圆形或囊形;雄器同丝生或异丝生,柄常分枝且缠绕藏卵器。对构成... 从广西南宁收集的蔬菜地土壤样本中,分离得到一个新的腐霉种,命名为广西腐霉Pythium guangxiense。不同于其近似种,广西腐霉的孢子囊球形或亚球形;藏卵器球形、亚球形、椭圆形或囊形;雄器同丝生或异丝生,柄常分枝且缠绕藏卵器。对构成广西腐霉rDNAITS区段的772个碱基进行扩增和测序。在根据ITS序列建立的分子系统发育树中,广西腐霉与禾生腐霉Pythium graminicola、周雄腐霉P.periilum和肿囊腐霉P.inflatum等产生瓣状孢子囊的腐霉种关系密切。对广西腐霉进行了分类描述和其与近似种的比较。 展开更多
关键词 腐霉属 新种 藏卵器 雄器 卵孢子 分子系统发育树
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Antagonistic interaction between Trichoderma asperellum and Phytophthora capsici in vitro 被引量:6
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作者 Heng JIANG Liang ZHANG +2 位作者 Jing-ze ZHANG Mohammad Reza OJAGHIAN Kevin D.HYDE 《Journal of Zhejiang University-Science B(Biomedicine & Biotechnology)》 SCIE CAS CSCD 2016年第4期271-281,共11页
Phytophthora capsici is a phytopathogen that causes a destructive pepper blight that is extremely difficult to control. Using a fungicide application against the disease is costly and relatively ineffective and there ... Phytophthora capsici is a phytopathogen that causes a destructive pepper blight that is extremely difficult to control. Using a fungicide application against the disease is costly and relatively ineffective and there is also a huge environmental concern about the use of such chemicals. The genus Trichoderma has been known to have a potential biocontrol issue. In this paper we investigate the mechanism for causing the infection of T. asperellum against P. capsici. Tnchoderma sp. (isolate CGMCC 6422) was developed to have a strong antagonistic action against hyphae of P. capsici through screening tests. The strain was identified as T. asperellum through using a combination of morphological characteristics and molecular data. T. asperellum was able to collapse the mycelium of the colonies of the pathogen through dual culture tests by breaking down the pathogenic hyphae into fragments. The scanning electron microscope showed that the hyphae of T. aspere/lum surrounded and penetrated the pathogens hyphae, resulting in hyphal collapse. The results show that seven days after inoculation, the hyphae of the pathogen were completely degraded in a dual culture. T. asperel/um was also able to enter the P. capsici oospores through using oogonia and then developed hyphae and produced conidia, leading to the disintegration of the oogonia and oospores. Seven days after inoculation, an average 10.8% of the oospores were infected, but at this stage, the structures of oospores were still intact. Subsequently, the number of infected oospores increased and the oospores started to collapse. Forty-two days after inoculation, almost all the oospores were infected, with 9.3% of the structures of the oospores being intact and 90.7% of the oospores having collapsed. 展开更多
关键词 ANTAGONISM Electron microscopy oogonium OOSPORE PEPPER
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