药物筛选微流控芯片的构建及其在花蕊石抗肝癌研究中的应用

目的构建一种集成有微阀结构的双层PDMS-玻璃复合芯片,考察其适用性并研究花蕊石生品、制品水煎液对肝肿瘤细胞Hep G2凋亡坏死的影响。方法制作双层微流控芯片并考察微阀的性能,同时进行了Hep G2细胞的培养,死活试剂盒检测细胞活力。将预制备的不同浓度花蕊石生品、制品水煎液通入微流控芯片,分别作用于Hep G2细胞24、48和72 h,凋亡坏死试剂盒检测Hep G2细胞凋亡坏死率。结果芯片微阀性能良好,可灵活控制液阀的开关且未表现出明显的延迟现象。细胞在芯片中生长状态良好,培养72 h期间细胞存活率≥97%。药物作用细胞后,发生凋亡坏死的细胞数量随给药浓度的升高、给药时间的延长而增加,呈现出一定的时间与浓度依赖性,且制品水煎液的效果好于生品。结论实验证明了花蕊石生品、制品水煎液对肝肿瘤细胞Hep G2具有促凋亡作用,也进一步验证了本实验室设计的芯片在细胞研究和药物筛选方面的可行性,为微流控芯片在中药抗肿瘤新药开发领域中的推广与应用提供理论依据。

花蕊石煅制后结构变化与元素溶出量差异研究

目的考察花蕊石煅制前后矿质结构及无机元素溶出量变化情况,为研究花蕊石功效物质基础及炮制机制提供依据。方法采用红外光谱法、电感耦合等离子体质谱法对花蕊石煅制前后矿质结构及无机元素溶出量进行分析;以元素溶出总量、氧化钙(CaO)含量及煅品性状为指标,考察煅制温度对煅品花蕊石质量的影响。结果不同煅制温度下花蕊石红外光谱图差异显著,其中碳酸钙(CaCO3)逐渐分解,而蛇纹石转变为镁橄榄石;镁(Mg)、钙(Ca)、铝(A l)、铁(Fe)、钠(Na)溶出量较高;煅制后Ca溶出量显著增高,而Mg溶出量显著降低,砷(As)溶出量降低;实验确定最佳煅制温度为1 000℃。结论花蕊石炮制前后矿质结构变化与其无机元素溶出量相关。该实验为研究花蕊石化瘀止血的药效物质基础、增效减毒的炮制作用机制提供了依据。

中药花蕊石的X射线指纹图谱研究

目的建立花蕊石的X射线衍射指纹图谱,评价该方法对花蕊石及其它含钙矿物药进行区分鉴别的应用价值。方法应用X射线衍射法对10批花蕊石药材进行定性分析,并用Origin6.0软件比较其共有峰的夹角余弦和相关系数的相似度。结果不同来源花蕊石样品X衍射图共有峰相似度均各达到95%以上,与其它矿物药区别明显。结论花蕊石的X衍射分析方法专属性强,准确可行,可作为与其它矿物药进行区分鉴别的手段。

花蕊石及其炮制品的粉晶X射线衍射分析

目的建立花蕊石及其炮制品的粉晶X-射线衍射分析方法,评价该方法区分花蕊石及其他含钙矿物药的应用价值。方法应用粉晶X-射线衍射法对11批生花蕊石和8批煅花蕊石药材进行定性分析,并用MDIJade5.0软件比较其共有峰的夹角余弦和相关系数的相似度。结果不同来源的花蕊石样品粉晶X-衍射图谱共有峰相似度,生花蕊石:74%～99%,煅花蕊石:99%以上,与其他矿物药区别明显。结论煅花蕊石的粉晶X-衍射分析方法专属性强,准确,可作为与其他矿物药进行区分鉴别的手段。

花蕊石炮制前后红外光谱分析

目的比较花蕊石炮制前后红外光谱特征,寻求红外光谱是否对花蕊石有鉴别意义。方法运用红外光谱技术,对不同产地生花蕊石及煅花蕊石进行分析。结果炮制前后的花蕊石红外光谱图有明显差异。结论红外光谱技术可以对花蕊石进行直接、快速、有效分析,为炮制前后的花蕊石鉴别和质量控制提供可靠依据。

花蕊石现代研究概况

花蕊石用药历史悠久,本文从炮制工艺、化学成分、药理作用和临床疗效等方面对花蕊石现代研究进行综述分析,为花蕊石的进一步研究和临床应用提供借鉴。

矿物中药花蕊石组成与热稳定性研究

目的:确定花蕊石主要物相、含量及热稳定性,提供合适的炮制处理温度及常见微量元素含量。方法:应用X射线衍射(XRD)、热重-差示扫描(TG-DSC)、等离子发射光谱(ICP)分析测试技术和JADE定量分析应用软件。结果:花蕊石的主要物相为CaCO3,随产地不同还含有滑石、透辉石、白云母等次要物相;除主要元素Ca、Fe、Al、Mg、K外,还含有Cu、Ni、Na、Pb、Cr、Mn等微量元素,花蕊石在599℃之前是稳定的,而从599时开始分解失重直到900℃。结论:不同来源花蕊石的主成分相同,次成分有一定差别。花蕊石的热稳定性较好,599-900℃温度区间实际上是其中的CaCO3分解失重,但是还应控制花蕊石煅烧的温度。实验结果为该矿物的鉴定和评价提供了科学数据。

蜂花合剂治疗62例阴道出血

用自拟蜂花合剂治疗６２例阴道出血，近期总有效率为９３．１５％。认为蜂花合剂有塞流止血、益气养肝、固肾培本的功效。

花蕊石、煅花蕊石重金属及砷盐含量限度标准制定

目的:制定花蕊石和煅花蕊石中重金属及砷盐等有害元素的含量限度,有效控制该药的质量。方法:采用比色法和古蔡氏法分别测定花蕊石和煅花蕊石中重金属、砷盐含量。结果:测得不同产地的10批样品花蕊石和煅花蕊石含重金属少于2μg·g-1,含砷量少于0.5μg·g-1。结论:该测定方法简便、快速、准确,能有效控制花蕊石和煅花蕊石的质量。

花蕊石的药学研究概况

在大量文献检索的基础上,综述了花蕊石的形态、成分、养生保健价值以及注意事项,以期为全民保健提供参考资料。

基于现代技术对花蕊石的甄别及质量评价

利用X射线衍射和偏光显微镜对不同产地花蕊石矿物成分、含量差异做分析。通过XRD分析表明河南、陕西、河北和广西的方解石矿物含量相对较高,偏光显微镜分析发现河南产花蕊石中方解石分布最为均匀,其次是陕西和和广西,而陕西汉中花蕊石中方解石分布不均匀,其余6产地未见方解石,与滴定法测定花蕊石主要药用成分CaCO_(3)含量均具有一致性,从矿物成分及结构上对不同产地花蕊石进行产地甄别及质量评价,为临床用药选择提供参考。

花蕊石的本草考证、品质评价及物相分析

通过查阅历代本草、医书及现代文献,笔者对花蕊石的名称、基原、产地、品质、功效主治、炮制加工进行系统整理与本草考证。考证结果表明,清代前的本草多以“花乳石”之名记载,现以“花蕊石”为正名,另有混异品名“白云石”;本草所述“淡白点”与大理岩具闪星状光泽特征一致,结合“色如硫黄”“色皆青绿”“黑点”等蛇纹石特征,推断其为蛇纹大理岩,与今用花蕊石一致,且宋代花蕊石的蛇纹石含量较高;产地以河南、陕西、山西、四川为主,江苏,浙江,河北等地亦有;历代本草对花蕊石品质评价较少,现代以整齐质坚、夹有黄绿色斑纹者为佳。花蕊石味酸、涩,性平,归肝经,具“治金疮血流,内漏目翳,下死胎,落胞衣”等功效,现以“化瘀止血”描述其功效。古代炮制方法最早为“火烧”,随后有“硫黄煅”“煅”“童便制”“醋淬”“水飞”“研”等方法,现代将其简化为明煅、醋制并新增水淬等方法。通过重量法与乙二胺四乙酸滴定法分别检测花蕊石中CO_(3)^(2-)和CaCO_(3)的含量,结果发现市售花蕊石中CaCO_(3)含量差异较大,且样品S13与样品S18的CaCO_(3)含量相同,但其组成不同,根据CO_(3)^(2-)与CaCO_(3)含量可计算其中白云石[CaMg(CO_(3))2]与方解石(CaCO_(3))含量,其中方解石含量越高其外观闪星状光泽越明显。采用拉曼光谱与X射线衍射(XRD)检测花蕊石样品粉末的物相组成,并对条纹部分进行拉曼光谱快速无损检测,结果表明花蕊石主要由白云石、方解石、蛇纹石、橄榄石、辉石等组成,条纹部分以蛇纹石为主。综上分析,2020年版《中华人民共和国药典》规定花蕊石CaCO_(3)质量分数不小于40%,较难控制其质量,建议增加CO_(3)^(2-)含量检测。该研究可为花蕊石的溯本清源提供科学依据,并更好地指导临床用药和资源合理利用。

基于PTEN/PI3K/AKT信号通路花蕊石抗肝癌细胞增殖作用机制研究

目的探讨花蕊石对人肝癌SMMC-7721细胞增殖抑制作用及其初步作用机制。方法采用CCK-8法检测花蕊石含药血清对肝癌细胞SMMC-7721的增殖抑制作用;Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡;Western blotting法检测PTEN/PI3K/AKT信号通路中第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源的基因(PTEN)、磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)和磷酸蛋白激酶B(p-Akt)相关蛋白的表达水平;RT-PCR检测肿瘤坏死因子α(TNF-α)及核因子活化B细胞κ轻链增强子(NF-κB)相关基因mRNA的表达水平。结果花蕊石具有明显的抑制肝癌SMMC-7721细胞增殖及诱导细胞凋亡的作用。花蕊石含药血清可明显上调PTEN/PI3K/AKT信号通路中PTEN蛋白的表达水平,降低PI3K及p-Akt蛋白的表达,同时下调NF-κB mRNA的表达。结论花蕊石能够抑制肝癌SMMC-7721细胞增殖,并促进肝癌细胞凋亡,其作用机制可能与激活PTEN表达水平从而抑制PI3K/AKT信号通路及其下游基因NF-κB的异常活化有关。

花蕊石中9种无机元素初级形态研究

目的:测定中药花蕊石及水煎液中无机元素含量,对花蕊石无机元素的初级形态进行分析。方法:采用微波消解-电感耦合等离子体质谱法(ICP-MS)测定花蕊石中9种无机元素的含量,并进行了初级形态分析。结果:各元素在残渣中的含量均远远超过其在溶液中的含量。元素在原药中含量特征如下Mg>Ca>Fe>K>Zn>Mn>Cu,其中Se,Cu,Mo,K的提取率较高。结论:矿物药元素水煎液提取率和浸留比与植物药相比相对较小,花蕊石中Se,Cu可以认为是该药中作用最大的元素或最特征的元素。

花蕊石主成分碳酸钙含量测定方法

目的:建立中药花蕊石中碳酸钙含量测定方法。方法:采用EDTA容量法进行含量测定。结果:全国不同来源的花蕊石含量相差较大36.65%～98.88%。平均回收率为98.85%(RSD1.03%,n=5)。结论:该方法操作简单,结果准确,可作为花蕊石中碳酸钙的含量测定方法。

红外光谱法与电感耦合等离子体-质谱法联用鉴别花蕊石真伪

鉴别不同产地花蕊石的真伪,测定真、伪花蕊石中Mg、Ca、Al、Fe金属元素的含量,建立花蕊石的鉴别方法。运用傅里叶红外光谱法及电感耦合等离子体-质谱法,通过红外特征峰的归属,测定Mg、Ca、Al、Fe金属元素含量及Ca/Mg差异,对不同产地的花蕊石进行真伪的鉴别及元素含量测定。10个产地的样品中,其中1、3、4、5、6、7、8号样品为真品,2、9、10号样品为伪品。红外光谱法与电感耦合等离子体-质谱法联用可以更准确的鉴别花蕊石真伪,并通过金属元素的含量来判断真品的质量,为花蕊石的鉴别和质量控制提供可靠的依据。