Optisol中期保存液房水置换对角膜内皮细胞的保护作用

目的:研究Optisol中期保存液房水置换对角膜内皮细胞的保护作用。方法:采用4℃湿房保存方法保存离体兔眼球,设立房水对照组、Optisol中期保存液房水置换组,每组10只眼球。于低温保存开始前、保存后24,48及72h检测角膜厚度、角膜内皮细胞密度及形态,保存后72h取下角膜行胎盘蓝-茜素红染色,检测角膜内皮细胞存活率。结果:4℃湿房保存开始前两组平均角膜厚度、角膜内皮细胞密度及六角形细胞比率差异没有统计学意义(P>0.05)。保存后24h两组平均角膜厚度、角膜内皮细胞密度及六角形细胞比率差异没有统计学意义(P>0.05);保存后48h及72h两组平均角膜厚度、角膜内皮细胞密度及六角形细胞比率差异有统计学意义(P<0.05)。保存后72h房水对照组角膜内皮细胞存活率为(55±5.81)%,Optisol中期保存液房水置换组角膜内皮细胞存活率为(87.16±3.64)%,两组间比较有统计学意义(P<0.05)。结论:Optisol中期保存液房水置换对角膜内皮细胞活性有保护作用,可以提高湿房保存法的效率,延长有效保存时间至72h。

角膜中期保存液添加bFGF的质量浓度分析

目的研究角膜中期保存液中bFGF的不同质量浓度对保存角膜细胞活性的影响。方法配制角膜中期保存液，将其按所添加的bFGF的质量浓度分为0．1、1、10、20、50、100．g／ml 6个组；每组中期保存液随机保存6片新西兰大白兔角膜（4℃）；在保存3、5、7d分别取角膜片行30～34℃2h复温，台盼蓝-茜素红联合染色检测角膜内皮细胞活性；原位末端标记TUNEL法免疫荧光检测保存角膜细胞凋亡。结果保存角膜各组角膜内皮细胞活性率随保存时间延长而明显下降，TUNEL阳性细胞数明显增加（P〈0．01）；bFGF质量浓度为10、20、50ng／ml组角膜内皮细胞活性率较高，TUNEL阳性细胞数较少，3个组比较差异无统计学意义（P〉0．05），而与0．1、1、100ng／ml 3个组比较差异有统计学意义（P〈0．01）。结论免角膜中期保存液中添加bFGF的质量浓度以20～50ng／ml为宜。

角膜中期保存液成分的研究进展

自ＭＫ液问世以来，角膜中期保存法一直为美国眼库最常用的角膜活性保存方法。随着保存液成分的改进，对角膜内皮细胞活性的保存效果逐渐提高。对有关角膜保存液的组成成分的研究进行综述，重点介绍基础液、高分子物质、抗生素、抗氧化剂等在保存液中的意义和研究进展。

改良Optisol角膜保存液保存兔角膜内皮细胞超微结构的观察

为提高角膜移植供体质量,我院自1996年起对Optisol保存液进行研究,对其成分进行改良称改良Optisol保存液,并对其保存兔角膜内皮细胞的超微结构进行观察.现总结如下.

远程投送对中期保存兔角膜内皮细胞的影响

目的:探讨模拟运输状态下机械振动对中期保存角膜内皮细胞(CEC)活性的影响。方法:DX中期保存液保存兔角膜片7d,实验室用摇床模拟远程运输环境,按作用不同时间、不同振动强度进行分组,分别进行CEC活性染色和CEC酶组织化学染色,对比不同组间模拟运输对角膜内皮的影响。结果:实验条件下观察指标并不随振动强度和时间变化,组间各项指标差异无显著性。结论:实验室模拟远程投送对中期保存兔CEC无明显影响。

碱性成纤维细胞生长因子联合透明质酸钠对角膜保存液中内皮细胞的作用

背景:作者前期将透明质酸钠和碱性成纤维细胞生长因子分别加入基础培养基,制成改良角膜保存液并证实其对角膜内皮细胞活性的保存作用。目的:探讨碱性成纤维细胞生长因子及透明质酸钠在角膜中期保存液中的作用及其有效浓度,评价该两种物质联合对角膜内皮细胞的保护作用。方法:在以基础培养基MEM、M-199为主要成分,添加6%葡聚糖、HEPES缓冲系、抗生素等制成角膜保存液的基础上,加入不同浓度的透明质酸钠和碱性成纤维细胞生长因子,并设立未加透明质酸钠及碱性成纤维细胞生长因子的对照组。各组于4℃下保存新西兰大白兔角膜片,于3,5,7,10,14d,行裂隙灯检查、锥虫蓝-茜素红染色、角膜组织病理切片及扫描电镜观察检测角膜内皮细胞活性,评价保存质量。结果与结论:加入碱性成纤维细胞生长因子及透明质酸钠的中期角膜保存液保存的角膜片其透明度、内皮细胞活性、显微结构、超微结构均明显优于未加组,各实验组同期比较,浓度较高组效果优于浓度较低组。碱性成纤维细胞生长因子及透明质酸钠同时加入基础保存液中能够对角膜内皮细胞进行有效的保护,其效果与浓度有关。

角膜中期保存液的研制和临床应用

目的 研制一种适合我国眼库使用的保持角膜活性的中期保存液。方法 配制新的角膜活性中期保存液 (DX液 ) ,按不同天数保存兔角膜植片 ,分别进行角膜内皮细胞活性率、酶组织化学联合染色及超微结构观察 ,并将在DX液中保存 2～ 11d的 37只人眼角膜植片应用于临床穿透性角膜移植手术中。结果 兔实验结果显示 ,DX液与Optisol液差异无显著性 (P >0 0 5 )。 37只人眼角膜植片术后 1周内全部透明 ,内皮细胞密度均值为 (2 2 0 4 5 6± 6 89 5 6 )个 /mm2 。结论 DX液作为我国眼库角膜活性中期保存液安全可靠。

角膜中期保存液的基础研究及初步临床应用

目的研制一种配方简单、适合我国国情的角膜中期保存液。方法人角膜27片、23片分别保存于角膜中期保存液与Optisol GS液,保存结束取周边角膜行苔盼兰和茜素红联合染色,计算角膜内皮细胞密度及角膜内皮细胞活性率,比较两组数据,保存7d和14d各取2片角膜进行扫描电镜检查。取8片角膜保存于中期保存液,所保存角膜用于临床角膜移植,对患者定期进行裂隙灯检查,角膜内皮照相。结果角膜中期保存液组平均保存时间（8.39±0.72）d,角膜内皮细胞平均密度为（2743.48±366.54）个/mm^2;Optisol GS液组平均保存时间（7.58±0.34）d,角膜内皮细胞密度为（2568.95±245.47）/mm^2,两组比较,差异无统计学意义;角膜中期保存液组的内皮细胞平均活性率（96.65±2.59）%高于Optisol GS液组（93.47±3.81）%,差异具有统计学意义。角膜中期保存液所保存角膜用于临床,4例病人术后随访4d～11m,角膜平均内皮细胞计数（2285.75±534.05）个/mm^2。结论角膜中期保存液可活性保存人角膜片长达2w,其保存效果与Optisol GS液相似,初步临床使用显示了较好的效果。

Optisol角膜保存法

Ｏｐｔｉｓｏｌ系一种新型的角膜保存液，其保存效果优于Ｍ－Ｋ液、Ｋ液、ＣＳＭ及Ｄｅｘｓｏｌ液。应用Ｏｐｔｉｓｏｌ液保存的供体角膜水肿明显低于Ｄｅｘｓｏｌ液。应用Ｏｐｔｉｓｏｌ保存１－８天之供体角膜行穿透角膜移植术，术后３月至半年植片透明率为７９．１％，１０例患者术后行角膜内皮镜检查，植片中央内皮细胞密度为１０３０－２４６０个／ｍｍ２。

新鲜与甘油冷冻保存角膜供体应用于深板层角膜移植治疗化脓性角膜炎

目的 对比新鲜与甘油冷冻保存角膜供体对深板层角膜移植治疗化脓性角膜炎术后临床恢复的影响.方法 回顾性病例研究.2011年1月至2012年8月,在山东省眼科医院成功施行深板层角膜移植术（DALK）的化脓性角膜炎患者32例（32眼）.根据供体保存方式,分为新鲜供体组（FCT）13例与甘油供体组（GCCT）19例.采集供体资料,记录术后并发症、植片情况及屈光状态等.采用独立样本t检验对数据进行分析.结果 术后角膜上皮愈合完整时间,新鲜供体组为（3.8±2.1）d,甘油供体组为（7.3±2.7）d,差异有统计学意义（t=-3.764,P＜0.05）.植片水肿消退时间,新鲜供体组为（5.7±2.6）d,甘油供体组为（10.4±3.0）d,差异有统计学意义（t=-4.348,P＜0.01）.随访期内甘油供体组有3例发生植片上皮缺损,对症治疗后植片上皮缺损愈合.23例（23眼,除外白内障及先天性弱视）术后最佳矫正视力均恢复至20/63～20/25,新鲜供体组和甘油供体组的平均视力分别为（0.25±0.12）logMAR、（0.28±0.17）logMAR,2组差异无统计学意义（t=-1.428,P＞0.05）.结论 甘油保存供体用于DALK术治疗化脓性角膜炎,角膜上皮愈合及角膜水肿消退时间较新鲜供体慢.及时合理处理并发症,可以获得与新鲜供体相似的屈光愈后.