Lessons from Vibrio Pathogen and the Comparative Study of Vaccines Developed

Cholera continues to be one of the most common causes of morbidity and mortality among children and adults in developing countries. Vaccine against cholera is an approach in the control of this epidemic and pandemic disease. From the development of very early oral cholera vaccine, advances in vaccine development documented due to a good illustration of the epidemiology, outbreak strategy, and pathophysiology of the disease causing pathogen. The newer-generation oral cholera vaccines are safe and guarantee a high level of protection during outbreak settings for several years. Yet infants and young children in developing countries are hyporesponsive to vaccines and show poor protection against cholera. In this review, we survey and analyse our current knowledge on the etiology of cholera, its clinical manifestation, global epidemiology and elaborate the vaccine candidates, which are effective against the pathogen and the corresponding immune responses to the available vaccines. These reviews comprehensively cover the salient features of recent discoveries related to Vibrio cholerae virulence, past and present vaccine candidates and their advantages and disadvantages with their development strategies. We believe that the advances that have been included in this review will give a comprehensive insight to the prevention and control of cholera outbreaks and development of effective cholera vaccines.

口服轮状病毒减毒活疫苗发生肠套叠1例分析

轮状病毒感染是引起严重胃肠炎、儿童腹泻的主要原因,接种轮状病毒疫苗是预防婴幼儿轮状病毒腹泻的有效手段,但需考虑肠套叠发生风险。该文作者收治1名口服轮状病毒减毒活疫苗发生肠套叠患儿,分析患儿的临床资料,根据患儿临床表现进行针对性治疗,并分析发生肠套叠的可能机制。

口服轮状病毒活疫苗LLR-85-37株反应及血清学效果初步观察

应用轮状病毒活疫苗LLR-85株第37代毒种，即LLR－85－37株，接种成人10人，3～6岁小儿21人，6月龄～2岁婴幼儿15人，口服一次，剂量为3×106.0TCIDEA50／ml。所有服苗者均反应轻微，未见发热、腹泻和呕吐等症状。轮状病毒1，2，3，4各型血清中和抗体4倍增长阳性率：3～6岁小儿组（20人）分别为55.0％，50.0％，63．6％和40．0％，对照组13人为0％；6月龄～2岁婴幼儿组（13人）分别为38．5％，69．2％，3％和53.8％，对照组15人为0％。初步观察结果表明LLR－85－37株口服轮状病毒活疫苗是安全、有效的。

口服轮状病毒减毒活疫苗与麻疹-风疹联合减毒活疫苗联合接种的免疫原性和安全性研究

目的:探讨口服轮状病毒减毒活疫苗(oral live attenuated rotavirus vaccine,ORV)与麻疹-风疹联合减毒活疫苗(measles and rubella combined attenuated live vaccine,MR)联合接种的可行性,为制定免疫规划程序提供可靠的科学依据。方法:设两种疫苗同时接种组和单苗接种组,观察疑似预防接种异常反应(AEFI)发生情况,接种前后、联合接种与单独接种组之间抗体几何平均滴度/浓度(GMT/GMC)、抗体阳性率和阳转率的差异。结果:各接种组临床反应都轻微,实验组与各对照组免前免后同种抗体GMT/GMC、阳性率,以及免后抗体阳转率,其差异均无显著意义(P>0.05)。结论:ORV与MR同时接种未发现严重异常反应和相互干扰免疫应答,可以同时接种。

OPV疫苗糖丸在-20℃以下保存的稳定性

目的：考察口服脊髓灰质炎减毒活疫苗糖丸（OPV）在-20℃温度下保存的稳定性.方法：将存放在-20℃以下1999～2003年生产的疫苗糖丸样品各随机抽取10个批号,分别进行3价总病毒含量及Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型分型病毒含量检测,根据检测结果,分析糖丸存放于-20℃以下1～5年其病毒含量及其变化.结果：糖丸存放于-20℃以下2年,其3价总病毒含量及Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型分型病毒含量4个指标均达到2000年版《中国生物制品规程》的要求;-20℃以下保存5年,3价总病毒含量及Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型分型病毒含量（log CCID50/粒）平均值分别为5.59±0.12、5.57±0.08、5.02±0.24及4.85±0.29;在3个型中,Ⅲ型病毒含量下降值最多,Ⅰ型次之,Ⅱ型最少（P＜0.01）.结论：口服脊髓灰质炎减毒活疫苗糖丸存放于-20℃以下1～5年的稳定性良好.

口服轮状病毒活疫苗LLR-85株的选育及鉴定

一株羊轮状病毒经初生小牛肾原代细胞传代，定名为LLR－85株。按Jennerian种痘法的原理，取第37代和第19代毒种，作为人用口服轮状病毒活疫苗的候选疫苗株。疫苗株电镜检查形态典型，抗原鉴定为A群、亚群Ⅰ、血清型G10和P12。电泳型为长型，11条带。病毒滴度可达105.0～7.0TCIDEA50。经无菌试验、支原体检查、外源因子检查及动物安全试验等项目检定，均符合我国规程要求。疫苗株遗传性状稳定，有望用于婴幼儿轮状病毒急性腹泻的预防。

甲型肝炎减毒活疫苗(L-A-1株)口服免疫小白鼠抗体反应

为研究甲型肝炎减毒活疫苗（L－A－1株）口服免疫的免疫原性，114只小白鼠1次口服免疫后1～8周内，每周收集肠洗液和血清样品，用ELISA方法检测特异抗体反应。111只小白鼠检测到阳性抗体反应，阳转率为93．37％。肠洗液S－IgA阳转率高峰在第1和第6周（65％和64％）。血清IgA于第一周未测到，其高峰在第6周（100％）。IgM于第1周即达高峰（88％），IgG于第3周达高峰（88％）。至第8周末，S－IgA维持在40％，IgA、IgM和IgG分别维持在90％，80％和80％。实验结果表明，该疫苗口服免疫后具有良好的免疫原性，可激活小白鼠的局部与全身免疫反应。

可生物降解微球甲型肝炎减毒活疫苗口服免疫恒河猴的免疫应答

目的 探索用一种新型的甲型肝炎减毒活疫苗及其免疫途径。方法 用可生物降解的材料聚乳 酸／乙醇酸（ＰＬＡ／ＰＬＧ）包裹甲型肝炎减毒活疫苗，制成微球型疫苗，检测微球的大小及在体外病毒释放的状况，和口 服免疫恒河猴后病毒在体内繁殖及免疫应答状况。结果 微球大小在６～１０μｍ范围，体外病毒抗原释放长达２７ｄ 左右，体外抗原释放高峰在３～７ｄ，口服免疫恒河猴后，约１ｗ左右开始排毒，以后一直呈间断排毒。抗体应答于第 ３ｗ出现，高峰期在５～６ｗ，达１２６１ＭｍＩＵ／ｍｌ，随后逐渐下降，口服加强免疫后，抗体回升，野毒株攻击后，抗体再度回升 达１２４４ｍＩＵ／ｍｌ。结论 微球型甲型肝炎减毒活疫苗口服免疫恒河猴后，能引起一定水平的免疫应答。

狂犬病减毒脂质体口服冻干活疫苗的制备及理化性质的检测

【目的】分析研发的狂犬病减毒脂质体口服冻干活疫苗的脂质体形态、粒径分布状态、疫苗抗原包封率,确定狂犬病减毒脂质体口服冻干活疫苗的制备工艺。【方法】(1)以大豆卵磷脂、胆固醇、十八胺、VE等物质为原料,采用薄膜分散法制备空白脂质体,采用电子显微镜和激光粒径分布仪测定空白脂质体的形态与粒径分布;(2)采用冷冻干燥方法将狂犬病rSRV9减毒株与空白脂质体等体积混合后冻干,制备狂犬病减毒脂质体口服冻干活疫苗;(3)采用BCA蛋白定量法检测狂犬病减毒脂质体口服冻干活疫苗的抗原包封率。【结果】制备空白脂质体形态为大单室脂质体;平均粒径为378 nm;疫苗包封率为71.19%。【结论】薄膜分散-冻干方法制备狂犬病减毒脂质体口服冻干活疫苗,抗原包封率高、性状稳定。

恶性疟原虫74肽抗原基因在减毒鼠伤寒沙门氏菌的表达和家兔免疫应答

利用减毒鼠伤寒沙门氏菌来表达外源抗原并制备口服活菌苗,是疫苗研究的一个新的突破。作者已在减毒鼠伤寒沙门氏菌SL3261以β—半乳糖苷酶(GZ)融合蛋白的形式表达了人工合成的恶性疟原虫74肽基因HGFC。现报道用活菌SL3261(pWRC)(C组)、SL3261(pWR450-1)(R组)分别免疫新西兰家兔,研究其在家兔体内免疫应答的结果。

甲肝减毒活疫苗口服免疫动物后的抗体反应

用PLAG微粒包裹甲肝减毒活疫苗制成微球口眼免疫恒河猴及昆明种小鼠，用EIA法对HAV-IgM、HAV-IgG、HAV-IgA等抗体进行检测，以筛选一种方便易行的免疫途径。结果表明；恒河猴抗体应答于第3周出现，高峰期在5～6周，达1261mIU／mL，随后逐渐下降，口服加强免疫后，抗体回升，野毒株攻击后，抗体再度回升达1244mIU／mL。初次免疫HAV-IgM滴度为1：4000，加强免疫后滴度为1：1000，野毒株攻击后下降为1：100。对照组仪在野毒株攻击后测到HAV-IgM。小鼠免疫2周后有HAV-IgG抗体产生，4周达高峰，S-IgA抗体1周开始测到，4周达高峰并持续两周后开始下降。微粒包裹疫苗免疫灵长类动物后所诱导产生的抗体应答，对野毒株攻击的保护效果明显。小鼠免疫结果与报道相似，但抗体反应出现的时间较免疫恒河猴的时间有所提前。

口服轮状病毒活疫苗的安全性临床观察

为了观察口服轮状病毒活疫苗的安全性，2004年4～10月在济南市中心医院预防接种门诊对总服用该疫苗的410例7月龄～3岁的幼儿密切观察其反应，测量腋下体温并询问有无不适症状等。结果显示，95．61％幼儿（392／410）无不良反应；约4．39％（18／410）出现发热、腹泻等不良副反应，其中强反应3例（0．73％），中度反应11例（2．68％），轻度反应4例（0．98％），均于对症治疗后3日内缓解并消失。临床资料证明，使用该疫苗是安全的。

高压静电检漏法对口服轮状病毒活疫苗包装无损密封性检查

目的探索高压静电检漏法对口服轮状病毒活疫苗包装无损密封性检查的可行性。方法采用高压静电检漏法对口服轮状病毒活疫苗包装密封性进行检查,并观察此方法对疫苗有效成分的影响。结果口服轮状病毒活疫苗经18 000 V和14 000 V高压静电检测显示,导电电流值均极低;病毒滴度结果均在6.0~6.5 lg CCID_(50)/mL之间,热稳定性试验病毒滴度下降值在0.5~1.0 lg之间,均符合质量标准,且与对照组(A组和B组)检测结果差异无统计学意义(P>0.05)。结论高压静电检漏法用于口服轮状病毒活疫苗包装无损密封性检查是可行的。

脊髓灰质炎的流行现状及疫苗免疫策略的研究进展

自1988年世界卫生大会发起"全球消灭脊髓灰质炎行动"倡议以来,全球脊髓灰质炎发病率已减少了99%以上。如今,全球已进入了后脊灰时代。2013年世界卫生组织制定了《消灭脊髓灰质炎最后阶段战略计划(2013-2018)》,以彻底消灭脊髓灰质炎。由于接种脊髓灰质炎减毒活疫苗(OPV)的人群中有可能会出现罕见的疫苗相关麻痹型脊髓灰质炎(VAPP)病例和疫苗衍生脊髓灰质炎病毒(VDPV)相关病例。因此,彻底消灭脊髓灰质炎的重要途径是研制出有效的疫苗。脊髓灰质炎灭活疫苗(IPV)能避免OPV使用过程中出现的VAPP和VDPV循环(cVDPVs)事件的发生,适用人群较广泛。然而,不同国家的脊髓灰质炎疫苗种类和使用程序不尽相同,本文对脊髓灰质炎流行现状及疫苗免疫策略进展情况进行简述,以期为终结脊髓灰质炎提供理论参考。

人轮状病毒疫苗研究进展

轮状病毒(RV)是引起婴幼儿和幼龄动物腹泻的主要病原体,轮状病毒无特效药物进行治疗,只能通过疫苗免疫预防,因此,轮状病毒疫苗的合理应用在降低全世界轮状病毒性腹泻的发病率和死亡率中显得尤为重要。但目前商品化的口服减毒活疫苗存在潜在的安全性问题以及在中低收入国家免疫效力不高的缺陷,需要研发更加安全、高效的疫苗来防控轮状病毒性腹泻。近年来,随着轮状病毒研究的不断深入,鉴定出了新的轮状病毒血清型,并且有4种轮状病毒疫苗通过世界卫生组织的使用资格预审,还有一些新型疫苗正处于研发阶段。本文根据各国学者的研究对轮状病毒疫苗研究进展做一综述,为进一步研究提供一定的参考。

儿童LLR株轮状病毒口服减毒活疫苗接种效果及影响因素的研究分析

目的探讨儿童LLR株轮状病毒(RV)口服减毒活疫苗接种效果及影响因素。方法选取2018年7月至2019年7月浙江温州鹿城区双屿街道黄龙社区卫生服务中心疫苗接种点已建立健康记录的2个月至3岁的健康婴幼儿为研究对象,从中随机招募100例接受RV减毒株(LLR株)口服者为疫苗组,100例拒绝接种疫苗者为对照组,随访12个月,调查两组RV感染情况,研究疫苗接种效果及影响因素。结果疫苗组粪便RV抗原阳性率显著低于对照组,差异有统计学意义(χ^(2)=19.24,P<0.01);疫苗组外周血RV-IgA水平、RV-IgG水平显著高于对照组,差异均有统计学意义(t值分别为16.14、15.68,P<0.01);单因素分析结果显示,首剂接种时间越早、疫苗接种次数越多、母乳喂养者,疫苗接种效果越好(χ^(2)值分别为30.76、7.71、33.63,P<0.01);而性别和肠道疾病无显著差异(P>0.05);多因素Logistic回归分析结果显示,相比母乳喂养,牛乳喂养是影响RV接种效果的危险因素(OR=0.097,P<0.05);相比首剂接种时间在0~6月龄,首剂接种在7~12月龄是影响RV接种效果的危险因素(OR=0.074,P<0.05);相比接种1次,接种3次是影响RV接种效果的保护因素(OR=4.725,P<0.05)。结论LLR株可减少RV性肠炎发生率,外周血RV-IgA和RV-IgG水平对接种效果有一定预测价值,要提高RV疫苗接种效果,应及早接种,且提倡母乳喂养,从而不断改善RV疫苗接种成功率。

犬用口服狂犬病减毒活疫苗安全实验研究

目的 探讨犬用口服狂犬病减毒活疫苗（ＣＴＮ－ ２２ 毒株）的安全性。方法 依照ＷＨＯ专家会议关于犬和野生食肉动物口服狂犬病疫苗接种现场试验要求和标准的报告；以及美国动物与动物制品法规—兽医生物制品标准，进行本疫苗的安全性试验。结果 口服免疫的５ 只猫和口服、注射免疫的各５ 只黄毛鼠，观察２１天，无任何症状发生，均健康存活；用本疫苗１０个现场使用量的１ｍ ｌ，各对５ 只家犬肌肉和大隐神经及其周围组织浸润注射后，观察３～３５ 天，无狂犬病症状，并按方法中所规定时间淘汰犬，剖取颈淋巴结、脑、唾液腺等组织分离病毒，均为阴性；３ 月龄１０ 只犬以１０ 个现场剂量口服免疫后，１、２、３ 天连续３ 次取唾液进行病毒分离亦均阴性，免疫后观察６个月未显示狂犬病任何征象，均健康存活。结论 证实ＣＴＮ－

甘肃省2003～2005年口服脊髓灰质炎减毒活疫苗效价锥形抽样检测分析

目的了解甘肃省口服脊髓灰质炎（脊灰）减毒活疫苗（OPV）的质量（效价）变化情况。方法按省、市、县、乡四级逐级抽样北京天坛生物制品有限公司生产的脊灰减毒活疫苗，用脊灰效价微量细胞培养法进行检测。结果2003～2005年OPV检测除2004年古浪县疾控中心外，其余均达到≥3．50Log CCID50／ml人群免疫有效标准。结论脊灰疫苗效价检测是有效免疫的重要保证。

犬用口服狂犬病减毒活疫苗安全实验研究

目的:探讨犬用口服狂犬病减毒活疫苗(CTN-22毒株)的安全性。方法:依照WHO 专家会议关于犬和野生食肉动物口服狂犬病疫苗接种现场试验要求和标准的报告,以及美国动物与动物制品法规—兽医生物制品标准,进行本疫苗的安全性试验。结果:口服免疫的5只猫和口服、注射免疫的各5只黄毛鼠,观察21d,无任何症状发生,均健康存活;用本疫苗10个现场使用量的1ml,各对5只家犬肌肉和大隐神经及其周围组织浸润注射后,观察3～35d,无狂犬病症状,并按方法中所规定时间淘汰犬,剖取颈淋巴结、脑、唾液腺等组织分离病毒,均为阴性;3月龄10只犬以10个现场剂量口服免疫后,1、2、3d连续3次取唾液进行病毒分离亦均阴性,免疫后观察6个月未显示狂犬病任何征象,均健康存活。结论:证实CTN-22毒株制备的犬用口服狂犬病减毒活疫苗是安全的。

适龄儿童口服轮状病毒活疫苗流行病学效果评估

目的 评估适龄儿童口服轮状病毒活疫苗后的流行病学效果,为婴幼儿轮状病毒感染性腹泻的防治策略提供数据支持。方法 采用前瞻性队列研究方法,按1∶2比例选取接种组和未接种组适龄儿童共750名,每2个月随访1次,为期1年,收集腹泻发生、就诊、接触情况,采用描述性流行病学方法进行分析。结果 随访4个月之后,未接种组、接种1剂疫苗组、接种2~3剂疫苗组腹泻发生率差异有统计学意义(χ^(2)=6.157,P=0.046),未接种组发生腹泻的概率最高,达4.0%;接种组、未接种组腹泻频次、持续时间差异均无统计学意义(χ^(2)=3.105,P=0.078;χ^(2)=2.555,P=0.110);接种疫苗发生腹泻的相对危险度(RR)为0.83(95%CI:0.57~1.21),疫苗保护率为17.0%(95%CI:-21.3%~43.0%)。结论 适龄儿童口服轮状病毒活疫苗短期内可以有效减少腹泻的发生,保护效果需进一步观察。