口虾蛄主要过敏原TM的单抗制备和免疫学特性鉴定

目的制备和鉴定鼠抗虾主要变应原TM的单克隆抗体(Monoclonal Antibody,McAb)。方法用重组TM蛋白为免疫原,免疫Balb/c小鼠,取免疫小鼠脾细胞与小鼠骨髓瘤NS-1细胞融合。间接ELISA法筛选特异性分泌的杂交瘤细胞。杂交瘤细胞株诱导小鼠产生腹水,再用蛋白A亲和层析法纯化抗体。采用Ig类与亚类鉴定试剂盒鉴定该单克隆抗体的Ig亚型;通过间接ELISA、Western Blotting鉴定该单克隆抗体的特性和交叉性,对常见食物的检测。结果获得4株可稳定分泌鼠抗虾主要变应原TM的单克隆抗体,其Ig亚型均为IgG1。且4株单抗均具有良好的效价。ELISA和Western Blotting分析表明该4株单抗均能识别重组TM蛋白和天然的虾提取物。结论成功制备了4株鼠抗虾主要变应原TM的单克隆抗体,为建立TM检测及纯化方法奠定了基础。

响应面法优化黑斑口虾蛄头中多不饱和脂肪酸提取条件研究

以黑斑口虾蛄头不饱和脂肪酸提取率(Y1)和不饱和度(Y2)为响应值,利用响应面法(response surface methodology)对虾蛄头不饱和脂肪酸提取工艺进行多目标同步优化。由响应面三维及等高线叠加图推测得到黑斑口虾蛄头不饱和脂肪酸提取率与不饱和度均较高的最佳提取工艺参数是:包合温度0.5℃,尿脂比13∶1,包合时间17h。验证优化工艺参数得到不饱和脂肪酸提取率达到2.30%,脂肪酸不饱和度达到241.42%,与模型预测值非常接近。采用响应面法对黑斑口虾蛄头不饱和脂肪酸提取条件进行优化合理可行。