OPA柱前衍生化HPLC同时测定川红工夫红茶20种氨基酸含量

建立在线柱前衍生液相色谱法同时测定不同品种川红工夫红茶中的20种氨基酸含量,并评价其与滋味品质相关性。以邻苯二甲醛(OPA)为衍生试剂,利用液相色谱仪的自动进样器进行柱前衍生,采用Hypersil BDS C 18柱(150 mm×4.6 mm,3μm),以0.016 mol/L的磷酸盐缓冲液(pH=8.2)与甲醇-乙腈-水(4.5∶4.5∶1,V∶V∶V)组成流动相进行梯度洗脱,流速为1.0 mL/min,柱温50℃,荧光检测器激发波长340 nm、发射波长450 nm;通过相关分析,比较不同滋味属性氨基酸含量与红茶滋味的相关性。结果表明:20种氨基酸在0.195~2.584μg/mL的范围内与各自峰面积呈良好的线性关系,其相关系数为0.9954~0.9999,检测限为0.006~0.036μg/mL,定量限为0.020~0.184μg/mL,加标回收率为90.40%~99.13%;除四川群体种红茶和梅占红茶中未检出组氨酸外,其余氨基酸均在5个品种红茶中检出,氨基酸总量27.33~65.29 mg/g之间,其中含量最高的是黄金芽红茶,氨基酸组分中,含量最高的是茶氨酸,然后是天冬氨酸和谷氨酸;红茶中的鲜味氨基酸、甜味氨基酸、苦味氨基酸、氨基酸总量与红茶的鲜味、甜味和综合滋味评分呈显著或极显著正相关,对红茶滋味的鲜爽度和浓强度起着重要作用。采用OPA柱前衍生反相液相色谱荧光法检测氨基酸组分精密度和回收率高,具有成本低、快速、准确的特点,可用于红茶中20种氨基酸组分的快速测定。

高效液相色谱法测定发芽糙米中γ-氨基丁酸含量

建立一种简单快速的邻苯二甲醛柱前衍生,紫外检测反相高效液相色谱测定发芽糙米中γ-氨基丁酸含量的方法。色谱柱为Intertsil ODS-C18柱,梯度洗脱,紫外吸收波长为332 nm,线性方程为Y=9.26×106X+2 093.79,r=0.999 5。方法线性范围为0.005~0.06 mg/mL,检出限为2.927 ng,峰面积的相对标准偏差为0.57%,回收率范围为98.85%~100.94%。该方法易于操作、反应时间短、精密度高。用该方法测定了20种发芽糙米中γ-氨基丁酸含量(22.68~88.36 mg/100 g,以干质量计),结果表明,发芽糙米中γ-氨基丁酸含量随品种不同而不同,其中中嘉早17和浙福802明显高于其他品种(P<0.05),故在实际生产中可尝试作为发芽糙米副产品的原料。

HPLC法测定发芽糙米中γ-氨基丁酸中不同衍生方式的比较研究

针对HPLC法测定发芽糙米中γ-氨基丁酸（GABA）所用衍生剂缺乏系统的比较分析,研究了3种常见衍生剂及其色谱方法比较。以邻苯二甲醛（OPA）、丹磺酰氯（Dansyl-Cl）、6-氨基喹啉基-N-羟基琥珀酰亚氨基氨基甲酸酯（AQC）3种物质作为柱前衍生剂,色谱柱为intertsil ODS-C18柱（前两者使用）、Waters AccQ Tag氨基酸分析柱,均为梯度洗脱,紫外吸收波长分别为332 nm、386 nm、250 nm,线性方程分别为Y=9.0×106X＋2062.5（R2=0.9989）、Y=7.0×106X＋11337（R2=0.9982）、Y=7.1×106X＋10025（R2=0.9999）,检出限分别为0.005 mg/mL、0.01 mg/mL、0.001 mg/mL,同一样品中测得GABA峰面积的RSD分别为1.16%、1.98%、0.94%,加标回收率分别为98.5%～106.9%、95.8%～110.6%、99.4%～103.4%,同一样品中测得GABA含量分别为11.24、10.67、13.47 mg/100 g干重。从上述结果得知,HPLC法测定GABA的3种衍生剂中,测定结果最准确的是AQC,其次是OPA和Dansyl-Cl。AQC作为一种新型衍生剂,在γ-氨基丁酸乃至氨基酸分析中前景广阔。

HPLC法测定脑复清胶囊中γ-氨基丁酸的含量

目的 :建立柱前衍生高效液相色谱法测定脑复清胶囊中γ 氨基丁酸 (GABA)含量的方法。方法 :色谱柱为HypersilODSC18柱 (12 5mm× 4 .0mm ,5 μm) ,流动相A为 2 0mmol·L-1乙酸钠 +0 .0 2 %三乙胺 (pH 7.3) ;流动相B为 10 0mmol·L-1乙酸钠 (pH7.2 ) 乙腈 甲醇 (10 0∶175∶2 2 5 )梯度洗脱 ;检测波长为 338nm。结果 :线性范围0 .0 5～ 1.0 3mg·mL-1,线性方程A =4 2 3784C +6 919.5 ,r =0 .9994 ,平均加样回收率 10 1.7% ,RSD为 1.7%(n =9)。结论 :本法简便、快速、灵敏度高 ,可用于脑复清胶囊中GABA的质量控制。

高效液相色谱法测定发芽米胚芽中的γ-氨基丁酸

建立一种高灵敏度的邻苯二甲醛(OPA)柱前衍生荧光检测高效液相色谱法测定发芽米胚芽中γ-氨基丁酸(GA-BA)含量的方法。色谱柱为Shimadzu VP-ODS C18柱(250mm×4.6mm,5μm),流动相:0.05mol/L乙酸钠∶甲醇=60∶40,荧光发射波长λex 338nm,激发波长λem430nm。方法的线性范围为0.10～1.0μg/mL,检出限为0.005μg/mL。日间和日内测定的精密度分别为1.36%和2.54%,加标回收率在98.5%～99.8%。该法简便、快速、灵敏度高,可用于发芽米胚芽中GABA的质量控制。

强次亚紧和遗传次亚紧的σ-积

主要获得如下两个定理：（１）设Ｘ＝σ｛Ｘα：α∈Ａ｝，如果Ｘ的每个有限子积是强次亚紧的，则Ｘ是强次亚紧的；（２）设Ｘ＝σ｛Ｘα：α∈Ａ｝，如果Ｘ的每个有限子积是遗传次亚紧的且Ｘ正规，则Ｘ是遗传次亚紧的．其次。

σ-仿Lindelof区间的Tychonoff乘积

本文主要获得了两个拓扑空间的Tychonoff乘积是б-仿Lindelof空间的三个定理。

组分百日咳抗原中间产物中氨基酸含量的邻苯二甲醛柱前衍生化RP-HPLC检测

目的建立邻苯二甲醛(O-phthalaldehyde,OPA)柱前衍生化反相高效液相色谱法(reversed phase high performance liquid chromatography,RP-HPLC)并验证,以检测百日咳抗原中间产物中氨基酸的含量。方法采用OPA柱前衍生化RP-HPLC检测百日咳抗原中间产物百日咳毒素脱毒液中L-天冬氨酸钠盐、丝状血凝素脱毒液中甘氨酸及黏附素脱毒液中L-赖氨酸的含量,并对该方法的专属性、系统适用性、线性、准确度、耐用性、检测限和定量限进行验证。结果OPA柱前衍生化RP-HPLC检测配置溶液,对照品和供试品溶液可见对应的氨基酸色谱峰,供试品溶液的保留时间和峰面积相对标准偏差均小于2.0%。氨基酸浓度在5~100μg/ml时,浓度与峰面积线性关系良好,检测氨基酸样品的加标回收率均在80%~120%之间。用磺基水杨酸和盐酸稀释剂处理供试品后,2种稀释剂检测值之间的相对误差在±5%范围内。定量限为5μg/ml,检测限为2μg/ml。结论成功建立了检测百日咳抗原中间产物中氨基酸含量的OPA柱前衍生化RP-HPLC检测方法,该方法的专属性、系统适用性、线性、准确度、耐用性良好。

邻苯二甲醛、戊二醛、含氯消毒剂内镜消毒效果及耐用性比较

目的比较邻苯二甲醛、戊二醛、含氯消毒剂对内镜的消毒效果及其耐用性。方法比较内镜使用3种消毒剂消毒后内镜外表面和内腔的菌落总数;并比较3种消毒剂在最小有效浓度内消毒内镜的条数。结果邻苯二甲醛与碱性戊二醛、万福金安消毒内镜后,内镜外表面与腔内菌落总数均符合标准,差异无显著意义(P>0.05);最小有效浓度内邻苯二甲醛能够消毒内镜的条数多于戊二醛和万福金安;平均每天邻苯二甲醛消毒内镜的条数高于戊二醛组和万福金安组。结论邻苯二甲醛具有与传统消毒剂相当的消毒效果并更具耐用性。

荧光法检测鸭肉中新霉素残留的研究

抗生素滥用所导致的健康问题已成为人们关注的焦点。为了快速检测抗生素残留,利用荧光法对鸭肉中新霉素的残留进行检测。在乳化剂OP-10的环境下,新霉素和邻苯二甲醛、巯基乙醇发生化学反应,经过激发光照射后可以产生强的荧光。以新霉素为研究对象,研究了其自身和反应物的荧光强度。研究结果表明:加入1.5 mL邻苯二甲醛溶液,1 mL乳化剂OP-10溶液,2.5 mL巯基乙醇溶液,并且反应90 min后测得的荧光强度为最佳;对浓度范围在1.00～8.00μg/mL的新霉素标准样品进行测定,得到的线性方程为,相关系数为0.984 9;对含不同浓度新霉素的鸭肉提取液进行测定,相关系数为0.999 8。结果表明,荧光法是一种方便、快速的新霉素残留分析方法。

邻苯二甲醛和强化戊二醛杀灭细菌芽孢效果比较

目的比较邻苯二甲醛消毒剂与强化戊二醛消毒剂对枯草杆菌黑色变种芽孢的杀灭效果。方法采用载体定量杀菌试验对两者的杀灭效果和连续使用稳定性进行比较。结果0.53%邻苯二甲醛消毒液作用3 h对不锈钢片上枯草杆菌黑色变种芽孢的杀灭对数值为3.21,作用10 h杀灭对数值>6.10;而2.18%强化戊二醛消毒液作用3 h杀灭对数值>6.10;0.53%邻苯二甲醛消毒液连续使用7、14 d后,仍保持对芽孢有良好的杀灭能力。结论邻苯二甲醛消毒剂杀灭细菌芽孢的效果不如强化戊二醛,但可具备用于内镜高水平消毒效果和使用稳定性。

邻苯二甲醛消毒剂杀菌性能及影响因素的研究

为研究邻苯二甲醛消毒剂的杀菌效果及影响因素,采用载体定量杀菌试验方法进行了研究。结果,以含邻苯二甲醛5000 mg/L该消毒液作用1 m in,对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的平均杀灭对数值分别为3.09和3.15;含邻苯二甲醛6300 mg/L该消毒液作用1 m in,对白色念珠菌的平均杀灭对数值为3.05,作用60 m in,对枯草杆菌黑色变种芽孢的杀灭对数值为3.27。作用温度、pH值和使用浓度等因素明显影响邻苯二甲醛杀菌效果。试验证明,随药物浓度增加、温度和pH值增高,邻苯二甲醛杀菌作用增强;有机物对邻苯二甲醛杀菌效果有轻度影响。邻苯二甲醛消毒剂性能稳定,对金属腐蚀性低。结论,邻苯二甲醛杀菌效果受诸多因素影响,作用温度和pH值升高可增强其杀菌作用,有机物增加会降低其杀菌效果。

邻苯二甲醛杀灭枯草杆菌黑色变种芽孢效果及其影响因素的研究

为研究邻苯二甲醛最佳杀菌效果,采用载体定量杀菌试验方法对其在不同条件下杀灭枯草杆菌黑色变种芽孢效果及其影响因素进行了观察。结果,邻苯二甲醛在pH值为8.3(碱性)条件下杀菌效果最好。在碱性条件下,邻苯二甲醛随浓度增加杀菌效果增强,19836mg/L邻苯二甲醛对载体上枯草杆菌黑色变种芽孢作用4h,杀灭对数值为6.35。添加表面活性剂的邻苯二甲醛以4959mg/L作用30min,对枯草杆菌黑色变种芽孢杀灭对数值即可达5.77。而4959mg/L邻苯二甲醛纯品作用4h平均杀灭枯草杆菌黑色变种芽孢对数值为3.69;50%小牛血清对含有表面活性剂的碱性邻苯二甲醛杀菌效果有轻微影响;在室温下连续反复浸泡器械35d,其杀芽孢效果基本不下降。结论,邻苯二甲醛对枯草杆菌黑色变种芽孢的杀菌效果受其浓度、pH值和表面活性剂影响较大,以含表面活性剂的碱性邻苯二甲醛杀芽孢效果最好且性能稳定。

邻苯二甲醛的消毒灭菌效果研究

目的探索邻苯二甲醛的消毒灭菌效果。方法用标准菌株作定量杀菌试验。结果邻苯二甲醛作用60 min,细菌杀灭率达99. 90%;作用90 min,细菌杀灭率达100%。结论邻苯二甲醛是一种新型、快速、高效消毒剂。

紫外分光光度法快速测定消毒剂邻苯二醛

为建立紫外分光光度法测定消毒剂邻苯二醛的方法 ,用紫外分光光度计 ,在 2 6 0nm波长下 ,对样品进行了测定。结果 ,标准溶液在 10～ 10 0 μg/ml浓度范围内 ,相关系数r =0 .999,回收率 90 %～ 110 % ,相对标准偏差2 .5 % (n=6 )。测定值与配方值相符。邻苯二醛在 2 6 0nm处有特征吸收 ,可作为定性依据。此方法简便、快速 ,准确度好 ,灵敏度高 ,适宜大批样品测定。

反相高效液相色谱法快速测定复方化学消毒剂中邻苯二甲醛

为建立快速测定复方化学消毒剂中邻苯二甲醛的方法,采用反相高效液相色谱法进行了试验研究.结果,以乙腈：水=30：70为流动相,包被基核的Shiseido C18柱为分离柱;在波长262 nm处检测,6 min内可完成样品中邻苯二甲醛的测定.检出限为0.5 mg/L,精密度相对误差值为0.4%,线性范围为10～20 mg/L,加标回收率为91.52%～108.1%.结论,所建立的反相高效液相色谱法适于测定复方化学消毒剂中邻苯二甲醛的含量,达到了方法简单和快速.

过氧乙酸消毒剂对胃镜污染枯草杆菌黑色变种芽孢的消毒研究

目的分析过氧乙酸消毒剂对枯草杆菌黑色变种芽孢人工污染胃镜的清洗消毒效果,为临床内镜清洗消毒工作提供参考。方法采用人工模拟试验,比较过氧乙酸、戊二醛、邻苯二甲醛等3种不同内镜消毒剂对枯草杆菌黑色变种芽孢人工污染胃镜的清洗消毒效果及效率。结果过氧乙酸组、戊二醛组和邻苯二甲醛组胃镜清洗消毒后残留菌落数分别为2（0~90）cfu/镜、1 885（1 000~5 500）cfu/镜和2 360（700~10 375）cfu/镜,经检验,过氧乙酸组胃镜残留菌落数显著低于戊二醛组和邻苯二甲醛组（P均〈0.01）;过氧乙酸组、邻苯二甲醛组、戊二醛组清洗消毒所需时间分别为19min、19min和24min。结论过氧乙酸对胃镜的消毒效果优于戊二醛和邻苯二甲醛。

柱前衍生化HPLC法分离苏氨酸对映体

以邻苯二甲醛/N-异丁酰基-L-半胱氨酸(OPA/IBLC)为手性衍生化试剂,建立了苏氨酸手性分离和光学纯度检查的高效液相色谱法。采用HederaODS-2色谱柱(250mm×4.6mm,5μm),以0.1%醋酸铵-甲醇-乙腈(体积比70︰27︰3)为流动相,检测波长为338nm,考察了溶液pH值、试剂用量、衍生化时间及温度对衍生化反应的影响。结果表明,在该优化的色谱条件下,苏氨酸的对映体分离度为1.6,L-苏氨酸最低检测限约为0.05μg/mL。该方法灵敏度高,重现性好,可用于L-苏氨酸光学纯度的检查控制。

微波协同4种消毒剂杀菌效果研究

目的探寻一种高水平的消毒方法。方法利用微波与4种常用消毒剂(氯己定、苯扎溴铵、戊二醛和邻苯二甲醛)的联合作用进行载体定量杀菌试验。结果在微波输出功率为210 W的协同作用下,低效消毒剂(氯己定和苯扎溴铵)显现微弱杀枯草杆菌黑色变种芽胞活性,高效消毒剂(戊二醛和邻苯二甲醛)杀枯草杆菌黑色变种芽胞的活性则显著增强。戊二醛浓度为2%,作用时间为4 min;邻苯二甲醛浓度为0.55%,作用时间为3 min,其杀灭对数减少值均>3.00。结论微波和加热对消毒剂均有增效作用,而微波除热效应使消毒剂增效外,非热效应也起到一定作用。

3种内镜消毒剂耐用性比较和经济学评价

目的对内镜清洗消毒机满负荷运转条件下,邻苯二甲醛(OPA)、微酸性氧化电位水(SAEOW)和过氧乙酸(PAA)用于消化内镜消毒的耐用性和经济学进行评价。方法比较3种消毒剂耐用性指标,按使用中每更换下一轮前消毒内镜条数计算;比较3种消毒剂消毒单条内镜成本;比较3种消毒剂每日消毒内镜效益和成本比值,并利用效益-成本增量分析法进行经济学评价。结果 3种消毒剂中OPA耐用性最好,消毒内镜(124±1)条;SAEOW次之,消毒内镜(34±1)条;PAA最少,消毒内镜(26±1)条,3者间两两比较均有统计差异(P<0.05)。3种消毒剂中OPA消毒单条内镜成本为(47.51±0.10)元,SAEOW为(23.77±0.08)元,PAA为(20.42±0.02)元,3者间两两比较均有统计差异(P<0.05)。3种消毒剂消毒内镜每日效益与成本比值均大于1,进一步比较两两间的增量效益与增量成本,提示SAEOW消毒内镜的经济效益最高,PAA次之,OPA最小。每多投资1元,SAEOW可较PAA多得8.33元增量效益。结论 3种消毒剂在机洗满负荷条件下,OPA耐用性最好,SAEOW的经济效益最高。