正交实验设计优化白木香ISSR-PCR反应体系的研究

利用正交实验设计的方法,对白木香ISSR-PCR(简单重复序列区间-多聚酶链式反应)反应体系中的5种主要因素(dNTP、Mg2+、模板DNA、引物和Taq酶)在4个水平上进行优化筛选,建立了白木香ISSR-PCR反应的最佳体系(25μl)为:dNTP 0.2 mmo1/L、Mg2+2.5 mmol/L、引物0.5μmol/L、模板DNA 100 ng和Taq酶1.0 U。通过梯度PCR反应得到相应引物的最佳退火温度为49.2℃。这一体系的建立为今后利用ISSR标记技术研究白木香的遗传多样性提供了标准化程序。

基于均匀设计法优化土沉香的组培再生体系研究

以带有腋芽的幼嫩土沉香茎段为外植体,运用DPS数据处理系统,通过均匀设计法筛选诱导土沉香茎段从出芽到生根整个再生体系的适宜培养基。结果表明:适宜土沉香茎段腋芽萌发的培养基为7/10MS+6-BA 0.35mg/L+NAA 0.01mg/L,诱导率为93.33%;适宜土沉香出芽增殖的培养基为7/10MS+KT 1.27mg/L+NAA 0.2mg/L,增殖倍数为3.53;适宜土沉香茎段生根的培养基为7/10MS+6-BA 0.02mg/L+IBA 1.23mg/L+CM 25mL/L,诱导率为33.33%。该试验优化了土沉香茎段再生体系的培养条件,为其快速繁殖的推广及遗传转化体系的建立提供了基础支持。