水稻库/源比对叶片光合作用、同化物运输和分配及叶片衰老的影响

两系杂交稻N31S/P40水培稻株不同库/源比植株剑叶光合速率在灌浆结实前期去叶处理明显高于对照,去1/2花则降低光合速率;灌浆中、后期处理间差异较小。改变库/源比后1～7天.去叶处理剑叶的RuBP羧化酶活性、光合磷酸化和Hill反应活性、蔗糖磷酸合成酶活性,叶片中无机磷含量、被同化碳在醇溶部分分配比例及光合同化物从剑叶输出的速率均明显高于对照,而叶片中蔗糖和淀粉含量低于对照。去1/2花处理则表现为与去叶效应相反的作用。库/源比对蜡熟期^(14)C-同化物从剑叶输出和向稻穗分配均有明显影响。提高库/源比可减轻叶片的脂质过氧化,具一定的延缓叶片衰老的作用。

水稻26kDa球蛋白基因启动子克隆及序列分析

以水稻品种日本晴基因组总DNA为模板,采用PCR扩增获得约900bp大小的DNA片段,回收该片段并与pUCm-T载体连接,转化感受态大肠杆菌。进行PCR检测和酶切鉴定,选取阳性克隆进行测序分析。测序结果显示,该片段含904个核苷酸对;采用vectorNTI软件将本试验中克隆的序列与Genbank(AY427575)公布的日本晴球蛋白基因启动子序列比对,有9个核苷酸差异,同源性为99%,证实本试验中克隆的DNA序列为水稻球蛋白基因启动子;在重要功能区段上,两者核苷酸序列完全一致。本研究认为造成长期不在一个环境中种植的同一水稻品种球蛋白基因启动子序列差异的原因之一,可能是核苷酸中性突变。水稻球蛋白基因启动子的成功克隆,为今后开展水稻等重要农作物转基因研究奠定基础。

水稻APC/C辅激活子CDH1同源基因OsCCS52B的表达研究(英文)

利用同源克隆的方法得到水稻的泛素连接酶APC/C辅助激活子CDH1的同源基因OsCCS52B.通过蛋白质序列分析发现OsCCS52B和苜蓿及拟南芥中的AtCCS52B(细胞周期转换开关基因)基因同源性最高;RNA原位杂交实验研究发现,OsCCS52B基因在减数分裂期间的表达存在一个高-低-高的波动变化.由于OsCCS52B表达变动的这个模式和减数分裂M-M(细胞分裂-细胞分裂)的转化过程中对受CDH1调控的细胞周期激酶CDKA活性的要求相一致,所以推测水稻的OsCCS52B基因参与了水稻减数分裂M-M转换期间对染色体复制的调控.同时,RNA原位杂交实验显示,OsCCS52B在核内复制旺盛的组织如根尖分生组织和穗下节的分生区和伸长区表达强烈,证明OsCCS52B可能参与了水稻的核内复制.

两系杂交稻始穗期追氮钾肥对同化物运输与分配的影响

研究表明，将占总量１／３左右的氮、钾肥在始穗期施用，可促进两系杂交稻Ｎ３１Ｓ／Ｐ４０￣（１４）Ｃ－光合同化物从剑叶的输出和向稻穗的分配，尤其是灌浆中后期向穗下部枝梗籽粒的分配。始穗期追氮钾肥可降低叶片中淀粉的含量，促进剑叶碳水化合物在夜间的降解，提高叶片中蔗糖磷酸合成酶和胞质果糖－１，６－二磷酸酯酶的活性。

旱稻65及其杂交后代的RAPD分析

利用随机扩增多态性DNA标记(RAPD)从分子水平检测旱稻65(Oryza.sativa L.cv.upland rice 65)及杂交后代间的遗传差异。采用20对随机引物对两者基因组DNA进行RAPD-PCR扩增。结果表明,RAPD共扩增出159个位点,其中多态性位点有33个,占总位点的20.75%。旱稻65和杂交后代之间存在RAPD多态性,表明旱稻65和杂交后代之间DNA水平存在差异。

水稻原生质体产生细胞团的冰冻保存和冻后再生植株形成

水稻(Oryza sativa L.)原生质体产生的细胞团加上10-20％的二甲亚枫(DMSO)和10-20％的蔗糖,置于液氮中保存。冻后细胞生存率达到对照的40-50％。存活的细胞在附加2×10^(-5)mol/l 2,4-D 的Linsmier-Skoog(Ls)固体培养基上再生长,然后将形成的愈伤组织块转到附加10^(-6)mol/l NAA,4×10^(-6)mol/l 激动素和10^(-6)mol/l 2 IP 及8％的蔗糖的 LS培养基上分化出芽并形成植株。

水稻硝酸还原酶基因5′上游序列的克隆与序列分析

以日本晴水稻幼苗叶的基因组总DNA为模板,采用PCR方法扩增获得约1 300 bp大小的DNA片段,回收该片段并与pMD18-T载体连接,转化大肠杆菌感受态,并提取质粒DNA。用凝胶电泳检测和酶切鉴定,选取阳性克隆进行测序分析。测序结果显示,该片段含1 376个核苷酸对;应用NCB1网站的BLAST软件对本试验中克隆的序列与GenBank(NC_008401)公布的水稻硝酸还原酶基因启动子序列进行比对,有3个核苷酸差异,同源性为99%,证实本试验中克隆的DNA序列为水稻硝酸诱导基因启动子。该序列含有多个与转录调控有关的保守序列(如TATA-box、CAAT-box和GAGA-box)。此序列的成功克隆,为今后开展水稻等重要农作物转基因研究奠定基础。

水稻几丁质酶基因克隆RCH8的DNA结构分析

用DNA外切核酸酶Ⅲ和S1核酸酶生成连续缺失突变体，用Sanger双脱氧链终止法对该克隆进行双向DNA顺序测定，测序全长2049个碱基，初步确定了1057bp的5'端上游顺序，966bp不含内含子的完整编码区和可能的TATAbox等。所编码的322个氨基酸包括N-端20个氨基酸的信号肽，其后40个氨基酸长度的含8个半胱氨酸的hevein结构域和一个催化结构域。