Osborne分级法提取燕麦麸球蛋白的响应面分析

对Osborne分级法提取燕麦麸球蛋白的条件进行优化,确定球蛋白最佳提取方案。以提取液盐浓度、提取料液比、提取温度、提取时间,四个因素为自变量,球蛋白的提取率为响应值,设计试验方案。通过Design-Expert8.0.6.1软件做响应面分析,得球蛋白最佳提取参数为:盐浓度1.21 mol/L,料液比1:15.9,提取温度26.39℃,提取时间2.04 h,球蛋白提取率为55.87%。在最优条件下,进行验证试验得球蛋白提取率为54.84%,与理论结果基本相符,测得蛋白纯度为83.07%。为燕麦麸皮球蛋白进一步的研究提供理论基础。

Osborne分级法提取藜麦糠清蛋白及功能性质研究

以藜麦糠为研究对象,采取超声辅助Osborne分级法对藜麦糠中清蛋白进行提取。在单因素实验基础上,应用Box-Behnken方法选取料液比、提取温度、提取时间3个因素,以清蛋白提取率为响应值进行优化,确定藜麦糠清蛋白的最优提取条件为:料液比1∶37(g/m L)、提取温度46℃、提取时间25 min,在此条件下藜麦糠清蛋白提取率为43.21%,与理论预测值43.76%相比,其相对误差约为1.25%。说明通过响应面分析优化后得到的回归方程在实践指导方面具有一定的意义。对藜麦糠清蛋白功能(溶解性、持水力、乳化性、起泡性)特性进行了测定,结果表明p H为2.5即等电点时,清蛋白的溶解度最低,持水力最小达到1.33 g/g,乳化性最低,乳化稳定性反而最好,而起泡性和起泡稳定性在等电点附近均最差。

Osborne分级法提取藜麦清蛋白的响应面分析

以藜麦为研究对象,采用超声辅助Osborne分级法对藜麦中清蛋白的提取条件进行优化,确定其最佳提取方案。在单因素试验的基础上,以提取温度、料液比、提取时间为影响因子,以清蛋白提取率为响应值;利用Box-Behnken中心组合原理和响应面分析法优化提取条件,并作了响应面和等高线图。结果显示,藜麦清蛋白的最优提取条件为:提取温度45℃,料液比1∶25(g/m L),提取时间17 min,此条件下,藜麦清蛋白提取率为63.91%;与理论预测值64.72%相比,其相对误差约为1.25%,说明通过响应面分析优化后,得到的多元回归方程可以指导实践操作;各因素对清蛋白提取率的影响先后顺序为:提取温度>提取时间>料液比。

绿豆清蛋白Osborne分级提取工艺优化及亚基组成分析

以绿豆为原料,采用Osborne分级法从绿豆中提取清蛋白,在单因素试验基础上,用L 9(3^4)正交试验,研究提取温度、提取时间和料液比对绿豆清蛋白提取率的影响,并采用SDS-PAGE电泳分析绿豆清蛋白的亚基组成。结果表明,绿豆清蛋白的最佳提取工艺为料液比1 10(g/mL)、提取温度45℃、提取时间150 min,该条件下绿豆清蛋白的提取率为(86.79±0.31)%,清蛋白纯度为88.33%。提取的绿豆清蛋白中有4条亚基条带,分子量分别为56.2,46.8,26.3,21.9 kD。

Osborne法分级提取青花椒籽仁中蛋白质及性质研究

本文以九叶青花椒籽仁为原料,采用Osborne法分级提取籽仁中的清蛋白、醇溶蛋白、球蛋白、谷蛋白4种蛋白质,从提取温度、提取时间、提取液浓度、提取料液比这4个因素进行单因素试验和正交试验,从而得到球蛋白最佳提取工艺,并对青花椒籽仁总蛋白的等电点、起泡性和乳化性展开初步研究。试验数据表明,球蛋白最佳提取条件为:料液比1:10、浓度1%、时间2.5h、温度45℃,提取率35±0.25%,对提取率有显著影响的因素是提取料液比。

Osborne法分级提取青花椒籽蛋白质及其理化性质研究

为探究青花椒籽蛋白质的组成及其基本性质,采用Osborne法分级提取青花椒籽中的4种蛋白质(清蛋白、球蛋白、醇溶蛋白和谷蛋白),并分析4种蛋白质的理化性质。结果表明,青花椒籽中4种蛋白质的相对含量分别为23.06%、21.64%、6.41%、40.02%,等电点依次为3.0、3.3、2.0、3.3。扫描电镜观察发现,清蛋白表面细致多层,谷蛋白呈山脊状,清蛋白和谷蛋白分子均连接紧密,局部有孔,孔径较大;球蛋白呈光滑的突触分层结构,结构相对密集,局部有较小孔隙;醇溶蛋白分子连接紧密,呈不规则的球状,连接成较大的分子基团。DSC分析表明,热变性温度分别为35.71、37.75、33.44、40.01℃。SDS-PAGE电泳分析表明,清蛋白亚基的分子量分布在34.414、21.841、11.059 kDa,球蛋白亚基的分子量分布在32.924、20.683 kDa,醇溶蛋白没有谱带,谷蛋白亚基的分子量大致分布在32.441、19.801、11.059 kDa。本研究为花椒籽蛋白的精细高值利用提供了理论依据。

Osborne法分级提取五味子蛋白及抗氧化活性比较

目的:采用Osborne法提取五味子各组分蛋白,并对其体外抗氧化活性比较研究。方法:用Osborne方法分级提取五味子中的蛋白质,得到四种组分蛋白:清蛋白、球蛋白、醇溶蛋白和谷蛋白,对其进行十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶(sodium lauryl sulfate-polyacrylamide gel,SDS-PAGE)电泳分析,并对不同组分蛋白和总蛋白的体外抗氧化活性进行对比研究。结果:分级提取得到的四种蛋白质,清蛋白亚基分子量分布在15~25 kDa和40~55 kDa,球蛋白分子量大致分布在15~25 kDa和35~55 kDa,谷蛋白亚基分子量在15~20 kDa和30~40 kDa。以五味子总蛋白为参照物,体外抗氧化试验结果表明,总蛋白对羟基自由基和DPPH自由基的清除能力强于各分级蛋白;四种分级蛋白对Fe3+的还原能力强于总蛋白;在ABTS自由基清除试验中含量最高的谷蛋白效果最佳,其清除效果在一定的浓度下与Vc接近,同时,其在羟基、DPPH自由基与Fe3+还原能力的试验中抗氧化活性良好,表明五味子组分蛋白中谷蛋白可作为一种良好的抗氧化潜在物质。

汉麻籽蛋白的分级提取及产物功能特性的研究

采用碱提酸沉和经典Osborne分级分离的方法,分别制备得到了汉麻分离蛋白以及清蛋白、球蛋白、醇溶蛋白和谷蛋白,并研究了这5种分离蛋白的氨基酸组成、等电点、吸水吸油性、起泡性、乳化性、成膜性及凝胶性。结果表明:4种蛋白分离产物中汉麻球蛋白的占比最高为46.80%,其次为清蛋白18.47%和谷蛋白18.00%,醇溶蛋白最少;汉麻球蛋白的多数氨基酸含量高于其他组分,并表现出了优异的氨基酸组成特性;5种分离蛋白的等电点依次为pH 4.5、p H 4.0、p H 5.0、p H 5.5和pH 5.5;汉麻分离蛋白起泡性最好,汉麻清蛋白的乳化性最好,汉麻分离蛋白和谷蛋白吸水性较强,清蛋白和球蛋白的吸油能力较强,5种分离蛋白在质量浓度50 mg/L下均可以揭膜,在200 mg/m L时汉麻分离蛋白、清蛋白和谷蛋白能够形成凝胶。

小麦胚蛋白分级提取及功能性研究

以小麦胚为原料,首先采用正己烷低温脱脂,然后利用碱法提取麦胚蛋白(WheatGerm Protein,WGP),采用Osborne法对麦胚蛋白进行分级,得到麦胚清蛋白、球蛋白、醇溶蛋白和谷蛋白4种组分,分别占总蛋白的32.5%、15.6%、4.2%和12.6%。在此基础上,对麦胚蛋白、麦胚清蛋白、麦胚球蛋白和麦胚谷蛋白的功能性进行定量分析比较。结果表明,4种蛋白中,麦胚蛋白的吸水性最佳,为3.03g/g;麦胚清蛋白的溶解性、起泡性、乳化性和乳化稳定性最好,分别为71.2%、84.8%、63.6%和62.8%;麦胚谷蛋白的吸油性最强,为2.79g/g。

乙醇梭菌蛋白的分级提取工艺优化

通过超声辅助Osborne分级法对新型蛋白质源乙醇梭菌蛋白进行分级提取,得到水溶性蛋白、盐溶性蛋白、醇溶性蛋白和碱溶性蛋白4种蛋白质,蛋白含量的大小顺序为碱溶性蛋白>水溶性蛋白>盐溶性蛋白>醇溶性蛋白,对其中含量最多的碱溶性蛋白的提取条件进行优化,结果表明,碱溶性蛋白的最佳提取条件为提取温度50℃、料液比1∶35(g/mL)、提取时间30 min、NaOH溶液质量分数0.3%。此条件下蛋白得率为75.75%。

油牡丹籽粕蛋白质提取工艺优化及其抗氧化活性研究

以经超临界CO_(2)萃取提油后的油牡丹籽粕为原料,研究油牡丹籽粕蛋白质提取工艺、氨基酸组成和抗氧化活性。通过Osborne分级法分离出四种蛋白质,并对清蛋白、醇溶蛋白、谷蛋白及球蛋白提取工艺进行初步优化,采用响应面法分析油牡丹籽粕主要蛋白质清蛋白最佳提取条件,分析四种蛋白质的氨基酸组成。在此基础上,通过DPPH及ABTS自由基清除率评价四种蛋白的抗氧化效果。研究结果表明:油牡丹籽粕清蛋白、球蛋白、醇溶蛋白、谷蛋白的最佳提取条件为粉碎度100目,提取温度依次为45、40、50、30℃,提取时间依次为86、100、100、60 min,清蛋白提取率为47.02%。此外,四种蛋白质均为完全蛋白质具有较强的DPPH自由基清除能力及ABTS自由基清除率能力。油牡丹籽粕蛋白是优质蛋白质资源,本研究为油牡丹籽粕综合利用奠定理论基础。

葛根蛋白组分提取、抗氧化活性及功能特性研究

以葛根为原料,提取葛根蛋白组分,对其进行体外抗氧化活性研究,采用SDS-PAGE和傅里叶红外光谱(Fourier infrared spectroscopy,FT-IR)对葛根蛋白组分进行亚基、结构分析,对谷蛋白进行功能特性研究。结果表明,谷蛋白的DPPH自由基、ABTS阳离子自由基及·OH清除率均可达90%以上,其IC50值分别为0.118、0.089、0.217 mg/mL,还原能力也较高,为1.33;亚基分析结果显示,葛根醇溶蛋白无条带,葛根清蛋白在10~55 kDa均有分布,葛根球蛋白主要分布于10~25 kDa,葛根谷蛋白主要分布于33~25 kDa;氨基酸分析结果显示,4种葛根分级蛋白的氨基酸含量不同,其中葛根谷蛋白的氨基酸含量最高。FT-IR显示蛋白组分均有典型的蛋白吸收峰。谷蛋白的功能特性研究表明,pH值、温度及离子强度对葛根谷蛋白的持水(油)性、乳化及乳化稳定性、起泡及起泡稳定性有明显影响。

苦荞麸皮蛋白的提取分离及清除自由基作用研究

以苦荞二道荞麸为原料,进行复合蛋白提取和蛋白质Osborne分级分离,并对各蛋白组分进行清除自由基能力研究。结果表明,苦荞麸皮中最主要的蛋白组分为清蛋白,占蛋白总量的51.22%;其次为球蛋白和谷蛋白,分别占13.69%和17.07%;最少的为醇溶蛋白,占8.83%。苦荞麸皮复合蛋白及各蛋白组分均有体外清除自由基作用,其中水溶性清蛋白和球蛋白清除自由基能力高于醇溶蛋白和碱溶蛋白,且在低浓度范围内,随蛋白质浓度增加,清除能力呈线性提高,但在高浓度时却无明显量效关系。

燕麦麸蛋白的组成及功能性质研究

以燕麦麸为原料制备了燕麦麸浓缩蛋白(OBPC)。同时,也按照Osborne蛋白分级提取方法对燕麦麸蛋白进行了精细的分类,分别得到了燕麦麸清蛋白、球蛋白、醇溶蛋白和谷蛋白。球蛋白和谷蛋白是燕麦麸蛋白的主要组分。清蛋白提取液中含有高含量的可溶性碳水化合物,可以通过(NH4)2SO4分级沉淀的方法将其纯度由6.5%提高到67.2%。SDS-PAGE的结果表明OBPC及各蛋白组分有不同的分子组成。OBPC及各蛋白组分的功能性质,包括溶解性、持水持油性、乳化活性、泡沫性质也分别进行了测定,以评价燕麦蛋白作为一种潜在的配料在食品中的应用价值。

桃仁蛋白的提取及性质研究

采用碱溶酸沉法对桃仁蛋白进行提取,最佳提取工艺是:pH为10.0,料液比1:15(g/mL),温度为45℃,提取时间为75min。蛋白的最佳提取率为72.49%。Osborne分级提取的四种蛋白中清蛋白含量最高,其相对百分含量达86.83%。分析了桃仁蛋白及分提蛋白的氨基酸组成。采用SDS-PAGE凝胶电泳分析了桃仁蛋白及分提蛋白的亚基分布。

花椒籽壳蛋白与籽仁蛋白理化性质分析

以花椒籽为原料,主要研究花椒籽仁与籽壳脱脂后的基本化学成分、蛋白等电点、氨基酸组成、亚基组成以及蛋白组分等理化性质的差异。结果显示,脱脂后的花椒籽仁和籽壳中蛋白质含量分别为61. 17%、8. 54%,其蛋白等电点分别为3. 5、4. 5。花椒籽仁脱脂粉的氨基酸总量为43g/100 g,必需氨基酸占总量的27. 31%,籽壳脱脂粉的氨基酸总量为4. 07 g/100 g,必需氨基酸占总量的26. 78%,两者主要的氨基酸为天冬氨酸、谷氨酸和精氨酸。采用Osborne法对蛋白分类,花椒籽仁中清蛋白、球蛋白、谷蛋白、醇溶蛋白的含量分别为7. 76%、72. 06%、15. 80%、1. 22%,籽壳中相对应的蛋白含量分别为13. 12%、56. 54%、21. 45%、3. 25%。SDS-PAGE电泳分析表明:花椒籽仁粗蛋白有7个条带,相对分子质量在0~66. 200 k Da之间,籽壳粗蛋白有2个条带,相对分子质量在18. 400~35. 000 k Da之间;花椒籽仁4种蛋白组分相对分子质量较小,亚基相对分子质量分布在0~45 k Da之间,花椒籽壳4种蛋白组分分布范围较小,亚基相对分子质量分布在14. 4~35 k Da之间。

樟树籽仁蛋白的组成及功能性质研究

采用以石油醚低温脱脂的樟树籽仁为原料,按照Osborne蛋白分级提取方法对樟树籽仁蛋白进行精细的分类,分别得到了樟树籽仁清蛋白、球蛋白、醇溶蛋白和谷蛋白四种组分,分别占总蛋白的25.64%、23.51%、2.32%和30.14%。在此基础上,研究了各蛋白组分的功能性质,包括溶解性、吸水性、吸油性、乳化性和乳化稳定性以及起泡性和起泡稳定性。结果表明,樟树籽仁清蛋白的溶解性、吸水性、乳化性及乳化稳定性和起泡性及其稳定性较好,分别为59.15%、2.5 g/g、72.92%、80%和123%。樟树籽仁球蛋白的吸油性最好,为4.19 g/g。

米糠蛋白的组成及功能性

以米糠蛋白为原料,通过Osborn分级分离和氨基酸分析,对米糠蛋白的组成及营养价值进行分析,并分别研究不同pH值、温度和蛋白质量浓度对米糠蛋白的溶解性、乳化性和起泡性等功能性的影响。结果表明:米糠蛋白主要是由清蛋白和球蛋白构成,氨基酸组成全面,比例合适,且米糠蛋白中的疏水性氨基酸含量较高。米糠蛋白在不同pH值和温度条件下溶解度、乳化性、起泡性不同;米糠蛋白溶解度在等电点范围趋于最小;蛋白质量浓度对米糠蛋白乳化性有较大影响。

橡胶籽分离蛋白的组成及功能性质

以低温脱脂橡胶籽粕为原料,采用等电点沉淀法制备橡胶籽分离蛋白。对橡胶籽分离蛋白的组成及功能性质进行测定,结果表明:橡胶籽分离蛋白中清蛋白、球蛋白、醇溶蛋白和谷蛋白所占比例依次为33.5%,4.8%,0.9%和60.8%。氨基酸组成比较全面,其中谷氨酸含量较高,达到19.894 g/100 g。p H值对橡胶籽分离蛋白的功能性质影响较大;橡胶籽蛋白浓度与其乳化性和起泡性呈正相关;在温度为60℃时,橡胶籽蛋白乳化性和起泡性分别达到34.29 m L/g和31.2%。

响应面法优化苦荞麦水溶性清蛋白提取工艺研究

研究通过Osborne分级法对苦荞麦中的清蛋白进行提取,选择提取清蛋白的料液比、搅拌时间、搅拌温度为单因素,以清蛋白提取率为指标。在单因素的研究基础上,采用三因素三水平的设计方法,利用响应面法优化苦荞麦水溶性清蛋白提取工艺,确定苦荞麦清蛋白最佳提取工艺为:料液比1∶19.48(g/mL)、搅拌时间59.84 min、搅拌温度35.05℃。考虑其实际操作方便,将上述条件更正为料液比1∶20(g/mL),搅拌时间60 min,搅拌温度35℃,在此条件下蛋白提取率为35.86%,与预测值36.16%接近。