绿豆清蛋白Osborne分级提取工艺优化及亚基组成分析

以绿豆为原料,采用Osborne分级法从绿豆中提取清蛋白,在单因素试验基础上,用L 9(3^4)正交试验,研究提取温度、提取时间和料液比对绿豆清蛋白提取率的影响,并采用SDS-PAGE电泳分析绿豆清蛋白的亚基组成。结果表明,绿豆清蛋白的最佳提取工艺为料液比1 10(g/mL)、提取温度45℃、提取时间150 min,该条件下绿豆清蛋白的提取率为(86.79±0.31)%,清蛋白纯度为88.33%。提取的绿豆清蛋白中有4条亚基条带,分子量分别为56.2,46.8,26.3,21.9 kD。

Osborne法分级提取青花椒籽仁中蛋白质及性质研究

本文以九叶青花椒籽仁为原料,采用Osborne法分级提取籽仁中的清蛋白、醇溶蛋白、球蛋白、谷蛋白4种蛋白质,从提取温度、提取时间、提取液浓度、提取料液比这4个因素进行单因素试验和正交试验,从而得到球蛋白最佳提取工艺,并对青花椒籽仁总蛋白的等电点、起泡性和乳化性展开初步研究。试验数据表明,球蛋白最佳提取条件为:料液比1:10、浓度1%、时间2.5h、温度45℃,提取率35±0.25%,对提取率有显著影响的因素是提取料液比。

Osborne法分级提取青花椒籽蛋白质及其理化性质研究

为探究青花椒籽蛋白质的组成及其基本性质,采用Osborne法分级提取青花椒籽中的4种蛋白质(清蛋白、球蛋白、醇溶蛋白和谷蛋白),并分析4种蛋白质的理化性质。结果表明,青花椒籽中4种蛋白质的相对含量分别为23.06%、21.64%、6.41%、40.02%,等电点依次为3.0、3.3、2.0、3.3。扫描电镜观察发现,清蛋白表面细致多层,谷蛋白呈山脊状,清蛋白和谷蛋白分子均连接紧密,局部有孔,孔径较大;球蛋白呈光滑的突触分层结构,结构相对密集,局部有较小孔隙;醇溶蛋白分子连接紧密,呈不规则的球状,连接成较大的分子基团。DSC分析表明,热变性温度分别为35.71、37.75、33.44、40.01℃。SDS-PAGE电泳分析表明,清蛋白亚基的分子量分布在34.414、21.841、11.059 kDa,球蛋白亚基的分子量分布在32.924、20.683 kDa,醇溶蛋白没有谱带,谷蛋白亚基的分子量大致分布在32.441、19.801、11.059 kDa。本研究为花椒籽蛋白的精细高值利用提供了理论依据。

凉粉草多糖提取和分级及抗氧化性能

文中采用热碱提取法结合超声技术制备了凉粉草多糖(MCP),然后进一步根据相似相溶的原理对凉粉草多糖进行分级,成功获得了分级多糖MCP-1和MCP-2,并通过单因素实验研究了超声时间和提取次数对凉粉草多糖提取率的影响。结果表明,凉粉草多糖的最佳提取条件为在超声功率400W时超声60min,碱提取4次,在此条件下,多糖产率为44.02%±0.06%。紫外和红外光谱测试表明MCP是一种含糖醛酸的粗多糖,凝胶渗透色谱测试其重均分子量(Mw)为4.991×105。而体外抗氧化实验表明,与MCP相比,MCP-1对羟基自由基的清除能力较强,MCP-2对超氧阴离子自由基的清除能力较强,在生物医药领域具有广阔的应用前景。

Osborne分级法提取燕麦麸球蛋白的响应面分析

对Osborne分级法提取燕麦麸球蛋白的条件进行优化,确定球蛋白最佳提取方案。以提取液盐浓度、提取料液比、提取温度、提取时间,四个因素为自变量,球蛋白的提取率为响应值,设计试验方案。通过Design-Expert8.0.6.1软件做响应面分析,得球蛋白最佳提取参数为:盐浓度1.21 mol/L,料液比1:15.9,提取温度26.39℃,提取时间2.04 h,球蛋白提取率为55.87%。在最优条件下,进行验证试验得球蛋白提取率为54.84%,与理论结果基本相符,测得蛋白纯度为83.07%。为燕麦麸皮球蛋白进一步的研究提供理论基础。

基于Deeplabv3+的猕猴桃特征提取和自动分级研究

【目的】当前猕猴桃的缺陷识别与分级大多基于传统图像处理技术,无法完全脱离人工操作,且对图像的质量要求高、可靠性差,无法满足猕猴桃现有的分级需求。【方法】课题组提出了一种基于Deeplabv3+网络模型的猕猴桃特征提取和自动分级方案,采用轻量级卷积神经网络MobileNetV2作为图片特征提取工具,将采集的466张猕猴桃图片进行滤波处理、数据增强等步骤后获得2 796张图片,按8∶2的比例分为训练集和预测集进行网络模型训练,并与传统模型识别率进行了对比。【结果】基于Deeplabv3+网络模型的猕猴桃四个等级的识别率分别为100%、96.15%、95.83%和97.05%,高于传统计算机视觉方法的识别率,验证了该方法在猕猴桃分级上的可行性。【结论】该模型有效地降低了系统的参数和计算量,具有训练时间短、空间复杂度低等优点,在猕猴桃图像的特征抽取和分级任务上具有较好的表现。

Osborne分级法提取藜麦糠清蛋白及功能性质研究

以藜麦糠为研究对象,采取超声辅助Osborne分级法对藜麦糠中清蛋白进行提取。在单因素实验基础上,应用Box-Behnken方法选取料液比、提取温度、提取时间3个因素,以清蛋白提取率为响应值进行优化,确定藜麦糠清蛋白的最优提取条件为:料液比1∶37(g/m L)、提取温度46℃、提取时间25 min,在此条件下藜麦糠清蛋白提取率为43.21%,与理论预测值43.76%相比,其相对误差约为1.25%。说明通过响应面分析优化后得到的回归方程在实践指导方面具有一定的意义。对藜麦糠清蛋白功能(溶解性、持水力、乳化性、起泡性)特性进行了测定,结果表明p H为2.5即等电点时,清蛋白的溶解度最低,持水力最小达到1.33 g/g,乳化性最低,乳化稳定性反而最好,而起泡性和起泡稳定性在等电点附近均最差。

Osborne分级法提取藜麦清蛋白的响应面分析

以藜麦为研究对象,采用超声辅助Osborne分级法对藜麦中清蛋白的提取条件进行优化,确定其最佳提取方案。在单因素试验的基础上,以提取温度、料液比、提取时间为影响因子,以清蛋白提取率为响应值;利用Box-Behnken中心组合原理和响应面分析法优化提取条件,并作了响应面和等高线图。结果显示,藜麦清蛋白的最优提取条件为:提取温度45℃,料液比1∶25(g/m L),提取时间17 min,此条件下,藜麦清蛋白提取率为63.91%;与理论预测值64.72%相比,其相对误差约为1.25%,说明通过响应面分析优化后,得到的多元回归方程可以指导实践操作;各因素对清蛋白提取率的影响先后顺序为:提取温度>提取时间>料液比。

Osborne法分级提取五味子蛋白及抗氧化活性比较

目的:采用Osborne法提取五味子各组分蛋白,并对其体外抗氧化活性比较研究。方法:用Osborne方法分级提取五味子中的蛋白质,得到四种组分蛋白:清蛋白、球蛋白、醇溶蛋白和谷蛋白,对其进行十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶(sodium lauryl sulfate-polyacrylamide gel,SDS-PAGE)电泳分析,并对不同组分蛋白和总蛋白的体外抗氧化活性进行对比研究。结果:分级提取得到的四种蛋白质,清蛋白亚基分子量分布在15~25 kDa和40~55 kDa,球蛋白分子量大致分布在15~25 kDa和35~55 kDa,谷蛋白亚基分子量在15~20 kDa和30~40 kDa。以五味子总蛋白为参照物,体外抗氧化试验结果表明,总蛋白对羟基自由基和DPPH自由基的清除能力强于各分级蛋白;四种分级蛋白对Fe3+的还原能力强于总蛋白;在ABTS自由基清除试验中含量最高的谷蛋白效果最佳,其清除效果在一定的浓度下与Vc接近,同时,其在羟基、DPPH自由基与Fe3+还原能力的试验中抗氧化活性良好,表明五味子组分蛋白中谷蛋白可作为一种良好的抗氧化潜在物质。

Osborne’s韧带悬吊尺神经前置术结合经皮神经肌肉电刺激在肘管综合征治疗中的应用

目的探究Osborne’s韧带悬吊尺神经前置术结合经皮神经肌肉电刺激在肘管综合征治疗中的应用。方法前瞻性选取2020年1月至2022年10月拟在秦皇岛市第一医院进行Osborne’s韧带悬吊尺神经前置术治疗的肘管综合征患者120例,按照随机数字表法分为两组,每组各60例。对照组行常规手术治疗,研究组在对照组患者治疗的基础上结合经皮神经肌肉电刺激治疗。比较两组术后分并指Lovett肌力分级、肘管综合征功能评分以及治疗前后肘上—肘下神经运动神经传导速度(MCV)及感觉神经传导速度(SCV)水平。结果术后6个月,两组患者的Lovett肌力分级、肘管综合征功能评分均有改善,Lovett肌力分级4、5级患者所占比例增大,且研究组术后6个月Lovett肌力4~5级占比、肘管综合征功能评分优良占比及肘管综合征功能评分为85.00%、90.00%、(12.56±2.15)分,均高于对照组[61.57%、70.00%、(11.02±4.15)分],差异均有统计学意义(P<0.05)。术后1、3个月,两组SCV、MCV均较术前升高,且研究组SCV分别为(47.55±6.65)、(53.66±5.46)m/s,MCV分别为(46.38±7.55)、(53.33±6.45)m/s,均高于对照组[(43.88±5.56)、(48.26±5.97)m/s以及(42.77±7.11)、(47.46±7.31)m/s],差异均有统计学意义(P<0.05)。结论在对肘管综合征患者进行治疗时,采用Osborne’s韧带悬吊尺神经前置术结合经皮神经肌肉电刺激可以有效提高患者的治疗效果,提高患者术后尺神经肌电图SCV、MCV水平,且安全性较好。

湖泊沉积物磷形态分级提取及分析方法研究进展

磷是湖泊富营养化的重要限制性因子,其在沉积物-水界面的化学形态和迁移转化过程是调控湖泊富营养化问题的关键。文章综述了沉积物磷的化学形态、无机磷和有机磷连续提取方法及发展演变,分析和总结了各种提取方法的优缺点。最后详细介绍了当前较前沿的沉积物磷分析方法,如X射线吸收光谱、原子配对分布函数和核磁共振光谱等,总结了各项分析技术的特点和面临的挑战,指出各种分析技术应与磷连续分级提取方法有机结合,多种表征手段优势互补,以期为沉积物中磷素形态表征和转化机制研究提供有效的技术支撑。

桑叶蛋白的超声分级提取及体外抗氧化活性分析

为了探究超声处理不同溶剂分级提取所得到的四种桑叶蛋白(清蛋白、球蛋白、醇溶蛋白、谷蛋白)的含量及其抗氧化活性的变化,以桑叶粉为原料,依次使用水、氯化钠、乙醇、氢氧化钠四种溶剂分级提取,并以未超声处理作为对照,研究超声对四种蛋白质提取率及抗氧化活性的影响。结果显示:四种桑叶蛋白的含量为清蛋白>谷蛋白>球蛋白>醇溶蛋白,超声后清蛋白及球蛋白的含量有明显提高,分别为2.67、0.47 mg/mL;在五种抗氧化指标中,羟基自由基(·OH)清除率较其他四种抗氧化指标提高更为显著,分别为91.15%、28.20%、3.91%、46.79%。结果表明:在超声分级提取的四种桑叶蛋白中,清蛋白与球蛋白的蛋白质含量及五种抗氧化指标均明显高于未超声组,而醇溶蛋白与谷蛋白的蛋白质含量及五种抗氧化指标则低于未超声组。因此,在超声逐级提取桑叶蛋白的过程中,超声处理可明显增加清蛋白与球蛋白的提取率及抗氧化效果,但对醇溶蛋白及谷蛋白的提取并无积极效果。

黑牛肝菌多糖提取工艺比较及其体外抗氧化活性研究

以得率为标准,从3种多糖提取方法(热水提取法、超声提取法、超声辅助复合酶法)中筛选并优化出黑牛肝菌多糖的最佳提取流程,进而获取黑牛肝功多糖体外抗氧化活性信息。利用单因素实验选出多糖得率最高提取法,利用响应面法进一步优化提取方法,采用分级醇沉法对多糖进行分级,采用DPPH自由基清除法、ABTS自由基清除法、羟自由基清除法以及还原力测定法了解黑牛肝菌多糖的体外抗氧化活性。结果发现:热水提取法、超声提取法、超声辅助复合酶提取法的多糖得率分别为5.64%、6.74%、18.47%。优化后的超声辅助复合酶提取法最佳工艺方案为:复合酶比例(m纤维素酶:m蛋白酶)2:1,酶解温度42.7℃,酶解时间67 min,酶添加量为1.92%,超声时间为20 min,预期得率18.867%;各级醇沉黑牛肝菌多糖均具有良好的抗氧化活性,抗氧化能力与多糖浓度和醇沉浓度呈正比,80%乙醇沉淀获得的多糖综合体外抗氧化活性最佳。超声辅助复合酶提取法可显著提高黑牛肝菌多糖得率,获得的黑牛肝菌多糖具有良好的体外抗氧化活性。

基于钻进参数和岩性的钻爆法隧道围岩智能分级模型

为进一步提高基于钻进参数的围岩智能分级模型判识准确率,引入围岩岩性作为已知条件,对不同岩性分别建立基于钻进参数的围岩智能分级模型。首先,依托宜兴高铁、郑万高铁隧道工程中凿岩台车采集到的钻进参数,将其根据围岩岩性划分为白云岩、花岗闪长岩、灰岩、砂岩、页岩5类子数据集;然后,进行数据清洗、特征提取,对各子数据集及原始数据集按照4∶1的比例拆分为训练集和测试集,分别以提取的特征和原始特征均值2类特征集合作为输入;最后,使用机器学习随机森林算法建立5个基于钻进参数和岩性的围岩智能分级模型以及基于钻进参数的围岩智能分级模型,评估每个模型的泛化性能。结果显示:1)以提取特征集合为输入的白云岩、花岗闪长岩、灰岩、砂岩、页岩5种围岩智能分级模型在测试集上的准确率分别为85.48%、92.16%、88.62%、85.00%、89.47%,不考虑岩性的围岩智能分级模型的测试集准确率为84.91%。2)相比不考虑岩性的围岩智能分级模型,基于钻进参数和岩性的围岩智能分级模型测试集准确率提高0.09%~7.25%;相比不进行钻进参数特征提取,围岩智能分级模型准确率提升1.61%~13.82%。由此表明:进行钻进参数特征提取能够有效提升围岩智能分级模型的准确率;相比不考虑岩性的围岩智能分级模型,考虑岩性的围岩智能分级模型稳定性提高,模型的泛化能力提升。

基于机器视觉的盆栽微型月季品质分级方法研究

建立准确高效的品质分级方法,对于花卉产业的标准化发展具有重要的意义。针对人工分级劳动强度大、经验要求高、缺乏统一性等问题,提出了基于机器视觉技术的盆栽微型月季品质分级方法。该方法根据盆栽微型月季的株高、花朵数、整齐度、花盖度和病虫害状况特征的不同,分别提取其相应的特征参数,并利用最小二乘支持向量机作为分类器,对其品质等级进行评价。经试验研究,单独利用株高、花朵数、整齐度、花盖度和病虫害状况特征进行分级的准确率分别为95.65%、94.68%、94.68%、94.20%、96.61%,而综合特征分级准确率为99.50%,验证了特征提取和分类模型的有效性,利用综合特征进行分级时间为10 s,明显提高了分级效率,该方法为建立准确高效的智能盆栽微型月季分级方法提供了理论参考。

通关藤提取物联合化学治疗药物治疗肿瘤的系统评价再评价

目的为通关藤提取物联合化学治疗(简称化疗)药物治疗肿瘤提供科学、可靠的证据支持。方法采用计算机检索PubMed,The Cochrane Library,Web of Science,Embase及中国知网(CNKI)、万方(WanFang)、维普(VIP)、中国生物医学文献服务系统(CBM)、读秀数据库中自建库起至2023年3月13日的有关通关藤提取物联合化疗药物治疗肿瘤的相关文献,由2位研究者独立筛选出符合纳入标准的系统评价/Meta分析,采用多系统评价量表(AMSTAR 2)评价纳入文献的方法学质量,采用推荐分级的评估、制订与评价(GRADE)3.6系统工具对纳入文献的证据进行质量分级。结果共纳入12篇文献。AMSTAR 2量表评价结果显示,低质量1篇,极低质量11篇;GRADE分级结果显示,47项结局指标中,低质量证据9项,极低质量证据38项。与单用化疗药物比较,通关藤提取物联合化疗药物治疗肿瘤在提高临床有效率[OR=1.71,95%CI(1.53,1.91),P<0.00001]和疾病控制率[OR=1.89,95%CI(1.65,2.17),P<0.00001],改善卡氏(KPS)评分[OR=2.78,95%CI(2.39,3.22),P<0.00001],提高CD3+活性[MD=12.34,95%CI(11.63,13.06),P<0.00001]和CD4+活性[MD=9.14,95%CI(6.72,11.56),P<0.00001],降低神经毒性[OR=0.69,95%CI(0.54,0.86),P=0.001],降低白细胞减少[OR=0.46,95%CI(0.40,0.54),P<0.00001],改善恶心呕吐[OR=0.67,95%CI(0.55,0.80),P<0.0001],降低血小板减少[OR=0.52,95%CI(0.44,0.62),P<0.00001]方面的效果均显著更优。结论通关藤提取物联合化疗药物治疗肿瘤有助于提高临床有效率、疾病控制率、CD3+和CD4+活性,改善KPS评分和恶心呕吐,降低神经毒性、白细胞减少、血小板减少等,但因纳入文献的方法学质量与证据质量普遍较低,仍需更多高质量研究进一步证实。

基于一维残差卷积的烟叶分级方法研究

在烟叶分级过程中,由于人为主观性、分级标准不一致等因素导致分级结果不一致。针对以上问题,提出一种一维残差卷积的烟叶等级分类模型。首先,改进VGG16网络,将方形矩阵卷积核和池化窗口改为适应于一维光谱数据的向量卷积核和池化窗口。然后,利用BasicBlock残差模块替换多层卷积叠加的结构,对光谱数据进行更深层的提取,防止梯度消失问题。最后,在卷积层后面接入BN层模块,通过归一化的方式,防止卷积计算后由于数据分布分散而导致的网络效率降低问题。选取B2V、B1F、C4F、C1L和X2L等5种不同等级的烟叶样本的近红外光谱数据进行实验。结果表明,所提方法对5种等级烟叶训练集和测试集的平均分类准确率分别为98.0%和97.3%,明显高于其他方法。该方法在一定程度上解决了烟叶人工分级带来的误差,减少了人力输出,提高了效率。

葛根蛋白组分提取、抗氧化活性及功能特性研究

以葛根为原料,提取葛根蛋白组分,对其进行体外抗氧化活性研究,采用SDS-PAGE和傅里叶红外光谱(Fourier infrared spectroscopy,FT-IR)对葛根蛋白组分进行亚基、结构分析,对谷蛋白进行功能特性研究。结果表明,谷蛋白的DPPH自由基、ABTS阳离子自由基及·OH清除率均可达90%以上,其IC50值分别为0.118、0.089、0.217 mg/mL,还原能力也较高,为1.33;亚基分析结果显示,葛根醇溶蛋白无条带,葛根清蛋白在10~55 kDa均有分布,葛根球蛋白主要分布于10~25 kDa,葛根谷蛋白主要分布于33~25 kDa;氨基酸分析结果显示,4种葛根分级蛋白的氨基酸含量不同,其中葛根谷蛋白的氨基酸含量最高。FT-IR显示蛋白组分均有典型的蛋白吸收峰。谷蛋白的功能特性研究表明,pH值、温度及离子强度对葛根谷蛋白的持水(油)性、乳化及乳化稳定性、起泡及起泡稳定性有明显影响。

土壤中重金属铊的分级提取形态分析法研究

以自然高铊污染土壤为样品, 对BCR标准分级提取形态分析法中争议较大的HAc和NH2OH·HCl提取剂pH、提取剂浓度和提取体系温度对土壤中相应形态Tl提取量的影响进行了研究。实验发现标准条件的HAc提取体系可有效提取土壤中可交换态的Tl, 而标准的NH2OH·HCl提取体系不能有效提取土壤中易还原态的Tl。根据实验结果, 对标准BCR法进行如下改进: NH2OH·HCl提取剂pH由2.0酸化至1.5, 提取剂浓度由0.1mol/L增至0.5 mol/L, 提取体系温度由室温(28℃)增至60℃; 其他提取条件不变。

食品中46种禁限用合成色素的分级提取净化体系研究

建立了46种禁限用合成色素的分级提取净化体系,采用反相液相色谱多波长检测对该体系的效果进行了评价。提取净化体系的第一级采用正己烷振荡提取、凝胶渗透色谱净化,实现了对苏丹类染料的有效提取分离,回收率均大于80%;第二级采用水振荡提取,乙腈辅助提取的手段,实现了对大多数水溶性合成色素及工业染料的提取分离,回收率均大于60%;第三级采用甲醇-氨水振荡提取,可实现对少数极性较强染料的提取分离,回收率均大于55%。经过第二、三级提取后的样品,无需再净化,即可直接进行高效液相色谱分析,提高了分析效率。采用此体系对样品进行合成色素的测定分析,结果表明,本方法对含蛋白质、脂肪类食品基质具有较强的适用性。