桂籽提取物对LPS诱导的AML12细胞的保护作用及机制研究

目的研究桂籽提取物(OFSN)正丁醇部位对脂多糖(LPS)诱导的小鼠正常肝细胞(AML12)的保护作用及其机制。方法体外培养AML12,CCK-8法测定不同浓度与时间下OFSN对AML12活性的影响,不同浓度的OFSN及Aspirin干预后对LPS诱导AML12活性的影响,筛选出合适的OFSN给药浓度及时间。将细胞分为Control组、LPS组(1μg/mL)、Asipirin组(900μg/mL)、OFSN低、中、高剂量组(100、200、400μg/mL)。利用荧光探针试剂盒检测活性氧(ROS)生成,Western blot法检测各组细胞TLR4/NF-κB p65信号通路蛋白的表达。结果与Control组相比,经LPS诱导后的细胞存活率下降,TLR4/NF-κB p65通路蛋白表达增加,细胞内ROS生成增加。与LPS组相比,经过OFSN及Aspirin干预后细胞活力升高(P<0.01),且在一定的浓度范围内呈现剂量依赖性;Aspirin组与OFSN中、高剂量组细胞中TLR4、NF-κB p65蛋白的表达水平显著性降低(P<0.05,P<0.01),ROS的产生显著减少(P<0.01),OFSN低剂量组无显著变化。结论OFSN对LPS诱导的AML12损伤具有一定的保护作用,其作用机制可能与下调TLR4/NF-κB p65信号通路蛋白表达,减少ROS的生成,同时减少COX-2的表达,从而减少炎症小体NLRP3及炎症因子IL-6的释放相关。

桂花子黄酮的提取工艺优化

为确定桂花子中黄酮类物质的提取工艺,以黄酮得率为考察指标,比较不同溶剂对桂花子黄酮类物质的提取效果,并采用正交试验,研究提取溶剂浓度、提取温度、提取时间和料液比对桂花子黄酮类化合物提取的影响。确定最佳提取工艺条件为最佳提取溶剂为乙醇、乙醇体积分数60%、提取温度90℃、料液比1:50(m/V)、提取时间5h。在此条件下进行提取,黄酮的得率为3.96%。

桂花籽总黄酮的提取工艺及抗氧化活性研究

采用超声辅助提取桂花籽总黄酮,并通过单因素试验以及正交试验优化桂花籽总黄酮的提取工艺条件,并进一步测试了桂花籽总黄酮对DPPH·和·OH的清除作用。试验表明,最佳提取工艺条件为乙醇浓度70%、提取温度50℃、料液比1∶25(g/mL)、提取时间50 min,在此条件下桂花籽总黄酮提取率为2.37%。在最佳提取工艺条件下桂花籽总黄酮对DPPH·和·OH的清除率作用明显。在相同条件下,桂花籽总黄酮对DPPH·的清除率优于BHT。

桂籽提取物对大鼠急性肺损伤的作用及其机制

目的探讨桂籽提取物对大鼠急性肺损伤的作用及其机制。方法将48只SD大鼠随机分为空白对照组、模型对照组、泼尼松组和桂籽粗提物大、中、小剂量组,每组8只。桂籽粗提物大、中、小剂量组分别给予桂籽粗提物400,200,100 mg·kg^-1,泼尼松组给予泼尼松3 mg·kg^-1,空白对照组和模型对照组给予等量0.9%氯化钠溶液。均连续灌胃10 d。模型对照组和各给药组于第10天灌胃结束1 h造模。24 h后经腹主动脉取血,开胸取肺。观察肺湿/干比(W/D)及肺组织水肿情况,苏木精-伊红(HE)染色观察肺部病理变化,测定各组髓过氧化物酶(MPO)、白细胞介素-6(IL-6)、IL-2、肿瘤坏死因子α(TNF-α)含量,Western blot法测定NF-κBp65及IκBα蛋白表达情况。结果与空白对照组比较,模型对照组大鼠肺部炎症细胞浸润明显,支气管壁明显增厚,水肿指数明显增大(W/D、LI值比较,P<0.01),血浆MPO、IL-6、IL-2、TNF-α含量明显升高,IκBα蛋白表达减少,NF-κBp65表达增加(P<0.05或P<0.01);与模型对照组比较,各给药组大鼠肺部炎症细胞浸润明显减少,支气管壁增厚明显改善,水肿指数明显减小(中、大剂量组LI值,P<0.05;中、大剂量组W/D值,泼尼松组W/D值、LI值,P<0.01)桂籽提取物可明显降低肺损伤大鼠MPO、IL-6、IL-2、TNF-α含量(P<0.05或P<0.01),提高IκBα蛋白表达,降低NF-κBp65表达(P<0.01)。结论桂籽提取物对大鼠急性肺损伤有一定保护作用,其机制一定程度上可能与上调IκBα以及激活NF-κBp65有关。