重组人骨保护素对聚乙烯颗粒刺激破骨细胞功能的影响

目的通过观察重组人骨保护素(recombinant human osteoprotegerin,rhOPG)对聚乙烯颗粒刺激破骨细胞功能的影响,探讨rhOPG防治人工关节无菌性松动的可行性。方法取出生24h内新西兰白兔5只,体重80～100g,雌雄不限。分离培养四肢长骨破骨细胞,以1×105/mL密度均匀接种于大小为10mm×10mm玻片和8mm×8mm×50μm骨片的24孔板内。根据加入rhOPG及聚乙烯颗粒浓度和密度的不同,玻片培养板和骨片培养板再分别分为1×109/mL聚乙烯颗粒培养组(聚乙烯组)、1×109/mL聚乙烯颗粒和100ng/mLrhOPG共培养组(聚乙烯/rhOPG组)及空白对照组。于培养1、3、5、7d取细胞玻片行HE、甲苯胺蓝染色,抗酒石酸酸性磷酸酶(trafrate resistant acid phosphatase,TRAP)染色计数阳性细胞数;皮质骨片行甲苯胺蓝染色并用扫描电镜观察骨片吸收陷窝形态。结果TRAP染色后破骨细胞呈玫瑰红色;培养后5、7d,聚乙烯组阳性染色的破骨细胞与对照组、聚乙烯/rhOPG组比较明显增多,差异均有统计学意义(P<0.05);对照组与聚乙烯/rhOPG组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。骨片吸收陷窝甲苯胺蓝染色呈蓝紫色;培养5、7d后,聚乙烯组骨片上的吸收陷窝计数与对照组比较明显增多(P<0.05);培养后1、3、5、7d,聚乙烯/rhOPG组骨片上的吸收陷窝计数与聚乙烯组比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论rhOPG可抑制聚乙烯颗粒对破骨细胞的刺激作用,可用于防治人工关节置换术后的无菌性关节松动。

重组人骨保护素对聚乙烯颗粒刺激的人工关节置换术患者外周血IL-6和TNF-α表达的影响

目的:探讨重组人骨保护素(rhOPG)对聚乙烯颗粒刺激的人工关节置换术患者外周血IL-6和TNF-α表达的影响,分析rhOPG防止关节置换术后假体无菌性松动的应用价值。方法:收集2009年1月-2011年3月我院收治的人工关节置换术患者的外周血清60份,采用梯度离心法分离出单个核细胞,并将其随机分成5组,每组12份。对照组:单个核细胞,模型组:单个核细胞+1×109/mL聚乙烯颗粒,低剂量组:单个核细胞+1×109/mL L聚乙烯颗粒+10 ng/mL rhOPG,中剂量组:单个核细胞+1×109/mL聚乙烯颗粒+100 ng/mL rhOPG,高剂量组:单个核细胞+1×109/mL聚乙烯颗粒+1000 ng/mL rhOPG。通过酶联免疫酶联免疫法(ELISA)测定各组细胞上清液中白介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子(TNF-α)的含量,并进行组间比较。结果:(1)模型组、低剂量组、中剂量组、高剂量组的IL-6、TNF-α含量均显著高于对照组(P<0.05)。(2)低剂量组、中剂量组、高剂量组的IL-6、TNF-α浓度均较模型组低(P<0.05)。(3)随着rhOPG浓度的增加,IL-6和TNF-α含量逐渐降低,组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:rhOPG可抑制聚乙烯颗粒刺激的人工关节置换术患者外周血IL-6和TNF-α的表达,可有助于防治人工关节置换术后的无菌性关节松动。