炎症与正常牙周膜来源牙周膜干细胞的成骨分化能力和自噬水平

背景:炎症影响牙周膜干细胞的成骨分化,同时牙周膜干细胞的成骨能力与自噬水平密切相关,但是炎症是否影响牙周膜干细胞成骨分化不同阶段的成骨能力与自噬水平尚未见相关报道。目的:探讨牙周膜干细胞在牙周炎和正常状态下的碱性磷酸酶表达和自噬水平。方法:分离培养健康人群与牙周炎患者的牙周膜干细胞,进行Vimentin、pan-CK和Stro-1荧光染色。正常和炎症牙周膜干细胞成骨分化3,7,14d时,Westernblot检测碱性磷酸酶、LC3B、Beclin1、ATG5的蛋白表达,real-time PCR检测碱性磷酸酶、骨唾液蛋白、骨钙素、Runx2、LC3B、Beclin1、ATG5的mRNA表达。结果与结论:(1)牙周膜干细胞内Stro-1阳性表达,Vimentin阳性表达,pan-CK阴性表达;(2)成骨分化3,7,14 d,与正常牙周膜干细胞相比,炎症牙周膜干细胞所形成的矿化结节明显减少(P<0.01),碱性磷酸酶的蛋白和mRNA表达明显降低(P<0.05),骨唾液蛋白、骨钙素、Runx2的mRNA表达明显降低(P<0.05);(3)成骨分化7,14 d,与正常牙周膜干细胞相比,炎症牙周膜干细胞的ATG5、LC3B与Beclin1蛋白和mRNA表达均明显降低(P<0.05)。结果表明,炎症可减少牙周膜干细胞的矿化结节形成和碱性磷酸酶的表达,削弱牙周膜干细胞成骨分化7,14 d的自噬潜能。

血清骨性标记物NTx和BALP与前列腺癌骨转移的关系及临床意义

目的 探讨前列腺癌患者血清骨性标记物Ⅰ型胶原交联氨基末端肽（NTx）和骨源性碱性磷酸酶（BALP）表达与前列腺癌骨转移程度的关系及临床意义。方法 收集2014年1月至2015年12月79例前列腺癌患者的临床资料，根据全身核素骨扫描结果，按照Soloway法将骨转移程度分为0～3级，分析血清骨性标记物NTx和BALP表达在不同程度前列腺癌骨转移中的差异。结果 79例前列腺癌患者中，骨转移0级32例、1级16例、2级20例、3级11例。79例患者NTx、BALP的表达量分别为（130.9±16.4）nmoL／mmoL Cr和（234.2±31.6）U／L。NTx 和BALP水平与TNM分期、Gleason评分、PSA水平有关，与年龄无关。骨转移阳性组NTx 和BALP水平明显高于阴性组。NTx、BALP诊断前列腺癌骨转移的灵敏度分别为87.2％、86.7％，特异度分别为72.1％、79.9％。结论血清骨性标记物NTx和BALP对前列腺癌骨转移的进展程度有一定的诊断价值，其可作为评价骨转移病变范围的指标。

低氧环境下EphrinB2/EphB4调控MC3T3⁃E1细胞成骨分化的实验研究

目的探讨低氧环境下促红细胞生成素肝细胞激酶受体配体B2/促红细胞生成素肝细胞激酶受体B4(erythropoietin producing hepatocyte kinase receptor ligand B2/erythropoietin producing hepatocyte kinase receptor B4,EphrinB2/EphB4)对MC3T3-E1细胞成骨分化的影响,为低氧调控成骨细胞分化提供实验依据。方法设置对照组与氯化钴诱导的低氧组,对MC3T3-E1细胞进行分组培养,应用qRT-PCR检测细胞成骨标志物碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)、runt相关转录因子2(runt related transcription factor 2,RUNX2)、I型胶原(collogen-1,COL I)、骨钙素(osteocalcin,OCN)的mRNA表达变化,ALP染色检测细胞成骨诱导7 d后ALP活性。同时通过qRT-PCR与Western blot检测两组MC3T3-E1细胞缺氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)、EphrinB2、EphB4的mRNA和蛋白表达。然后增设氯化钴+EphB4磷酸化抑制剂组(加入EphB4磷酸化抑制剂NVP-BHG712)阻止EphrinB2与EphB4结合,通过qRT-PCR与Western blot检测三组成骨标志物ALP、RUNX2、COL I、OCN的mRNA与蛋白表达,ALP染色、茜素红染色检测细胞成骨诱导后ALP活性及矿化情况。结果与对照组相比,在氯化钴诱导的体外细胞低氧环境下,MC3T3-E1成骨标志物ALP、RUNX2、COL 1、OCN mRNA表达增加,ALP活性增强,矿化增强(P<0.05)。同时,在氯化钴诱导的低氧环境下,HIF-1α、EphrinB2、EphB4的mRNA和蛋白水平表达增加(P<0.05)。使用NVP-BHG712阻止EphrinB2和EphB4的结合后,细胞的成骨标志物表达下降,ALP活性及矿化能力降低(P<0.05)。结论低氧环境可通过EphrinB2/EphB4信号通路促进MC3T3-E1细胞的成骨分化,增加成骨标志物的表达及组织矿化。

龙胆苦苷通过抑制miR-103-3p表达促进成骨细胞成骨分化的研究

目的探讨龙胆苦苷(GPS)对成骨细胞MC3T3-E1增殖、分化的影响,分析其对miR-103-3p的调控作用。方法采用不同剂量GPS分别处理小鼠成骨细胞系MC3T3-E1,用MTT法检测细胞增殖活性;用qRT-PCR法检测miR-103-3p表达量;用qRT-PCR、Western blot法分别检测Runt相关转录因子2(RUNX2)、骨保护素(OPG)、骨钙素(OCN)表达量;用试剂盒检测碱性磷酸酶(ALP)活性。后续实验中设置anti-miR-NC组、anti-miR-103-3p组、GPS-H+miR-NC组、GPS-H+miR-103-3p组,比较各组细胞增殖活性、ALP活性及OPG、OCN、RUNX2蛋白和mRNA表达量。结果GPS处理后细胞增殖活性、ALP活性升高,OPG、OCN、RUNX2 mRNA及蛋白表达升高,miR-103-3p表达量降低,且呈剂量依赖性(P<0.05);与anti-miR-NC组比较,anti-miR-103-3p组细胞增殖活性、ALP活性和OPG、OCN、RUNX2 mRNA及蛋白表达水平均升高(P<0.05);与GPS-H+miR-NC组比较,GPS-H+miR-103-3p组细胞增殖活性、ALP活性和OPG、OCN、RUNX2 mRNA及蛋白表达水平均降低(P<0.05)。结论GPS可通过下调miR-103-3p表达促进MC3T3-E1细胞增殖、分化,miR-103-3p可能为GPS治疗骨折的潜在靶点。

小檗碱对骨髓间充质干细胞成骨分化的影响

目的探讨小檗碱对体外培养SD大鼠骨髓间充质干细胞成骨分化的影响。方法应用MTT法检测不同浓度小檗碱对骨髓间充质干细胞增殖情况的影响,以对硝基苯磷酸盐法检测碱性磷酸酶活性,等离子体直读光谱仪检测钙沉积,放射免疫法检测骨钙素含量,茜素红法染色观察钙化结节形成。结果小檗碱在1×10-9～1×10-5mol.L-1浓度范围对骨髓间充质干细胞增殖无明显影响。小檗碱浓度为1×10-7和1×10-6mol.L-1培养3～7d能明显提高骨髓间充质干细胞内碱性磷酸酶活性。小檗碱在1×10-7～1×10-5mol.L-1浓度范围培养22d能明显促进骨髓间充质干细胞骨钙素合成和分泌。小檗碱在浓度为1×10-6和1×10-5mol.L-1培养28d时钙盐沉积量和钙化结节形成增加。结论小檗碱可促进骨髓间充质干细胞向成骨细胞方向分化,增强骨钙化。这可能为其防治骨质疏松的机制之一。

阿魏酸对体外培养的成骨细胞增殖、分化和矿化功能的影响

阿魏酸化学名称为3-甲氧基4-羟基丙烯酸,是当归等抗骨质疏松中药复方制剂的组方中药所含的一种水溶性单体成分,是其主要活性物质之一,具有降低胆固醇、抗氧化、抗血小板聚集等功能.目前阿魏酸对心肌细胞、淋巴细胞活性影响的研究已有报道,而其对成骨细胞活性影响的研究较为少见.

黄芩苷通过Wnt/β-catenin信号通路对大鼠骨髓间充质干细胞成骨分化的促进作用

目的研究黄芩苷（baicalin）对大鼠骨髓间充质干细胞（rat bone marrow derived mesenchymal stem cells,rBMSC）成骨分化过程中Wnt/β-catenin信号通路的影响.方法采用贴壁筛选法体外培养rBMSC,给予黄芩苷3、5、7d后,比较药物处理组与对照组之间碱性磷酸酶（ALP）的活性.同时检测给予黄芩苷对碱性磷酸酶阳性克隆和矿化结节形成的影响.提取总mRNA和总蛋白,用实时荧光定量PCR检测黄芩苷对Wnt10a、GSK-3β、β-catenin以及LEF1mRNA水平的影响.免疫印迹检测药物处理对β-catenin以及Runx2蛋白表达量的影响.结果黄芩苷明显提高ALP的活性.10μmol·L-1浓度的黄芩苷还可增加碱性磷酸酶克隆数和钙化结节的形成.黄芩苷还可提高Wnt10a、β-catenin、GSK-3β、LEF1以及osteocalcin的mRNA水平,并提高β-catenin和Runx2的蛋白表达量.结论黄芩苷在0.1～50μmol·L^-1的给药浓度下可促进rBMSC的成骨分化成熟,Wnt/β-cate-nin信号可能参与调控rBMSC的成骨分化.

雌激素对离体成骨细胞成骨能力的影响

目的 验证不同浓度的雌三醇对人类成骨细胞功能表达和体外成骨能力的影响 ,研究雌激素促进成骨作用的机制及剂量效应关系。方法 取成人的髂骨松质骨 ,采用胶原 胰蛋白酶消化法 ,获得松质骨中的成骨细胞 ,进行纯化和培养。在此基础上添加不同浓度的雌三醇 (1× 10 - 11、1× 10 - 9、1× 10 - 7、1× 10 - 6 、1× 10 - 5 、5× 10 - 5 mol·L- 1)并进行培养。用生化法测定细胞碱性磷酸酶 (ALP)活性 ,用放射免疫法测定细胞培养液中骨钙素 (OC)和细胞间质含钙量。结果 雌三醇对成骨细胞ALP活性和骨钙素分泌的影响均呈正相关 ,即各浓度雌三醇对ALP活性和骨钙素的分泌均有刺激作用 ,并与雌三醇剂量呈正相关。低浓度 (1× 10 - 11、1× 10 - 9、1× 10 - 7mol·L- 1)的雌三醇可促进成骨细胞的成骨能力 ,高浓度时则无此作用。结论 雌激素能增加成骨细胞的ALP活性和骨钙素的产生 。

西地那非促进体外培养大鼠骨髓间充质干细胞的成骨性分化

目的研究西地那非对体外培养大鼠骨髓间充质干细胞(Rat bone marrow stromal stem cells,rBMSCs)增殖与成骨性分化的影响。方法取大鼠股骨及胫骨全骨髓,贴壁筛选法培养rBMSCs,每3天换液1次,9d后传代培养。采用终浓度分别为1×10-4、1×10-5、1×10-6、1×10-7mol·L-1的西地那非进行药物干预,MTT法检测细胞增殖率,同时检测成骨性诱导培养后9d的碱性磷酸酶(ALP)活性,筛选出最佳浓度。以最佳药物浓度干预rBMSCs的成骨性分化,比较西地那非组和不加药的对照组之间的钙化结节数量及阳性克隆数(colonies stained positive for alkaline phosphatase,CFU-FALP);提取Total RNA,Real-Time PCR检测Runx-2与Osterix mRNA的表达情况;Western blot法检测Ⅰ型胶原蛋白的分泌量。结果西地那非剂量依赖性抑制细胞的增殖,但可强烈促进成骨性分化,最佳药物浓度为1×10-5mol·L-1。该浓度下的西地那非可明显增加钙化结节和CFU-FALP数量,促进与成骨相关的转录因子Runx-2与Osterix mRNA的表达,同时也可增强Ⅰ型胶原蛋白的分泌。结论浓度为1×10-5mol·L-1的西地那非可明显促进rBMSCs的成骨性分化,提示西地那非在具备其他药理作用的同时,也有较强的抗骨质疏松活性,具备开发为抗骨质疏松药物的潜力。

肿瘤坏死因子α可激活NF-κB信号通路抑制牙周膜干细胞成骨分化

背景:既往研究大多侧重于炎症因子激活NF-κB信号通路对骨细胞的影响,关于微炎症环境对人牙周膜干细胞成骨分化及NF-κB信号通路的影响研究较少。目的:探讨肿瘤坏死因子α对人牙周膜干细胞骨向分化及NF-κB信号通路的影响。方法:通过酶消化结合组织块法体外培养人牙周膜干细胞,免疫组织化学染色鉴定人牙周膜干细胞来源。该研究获得青海大学附属医院伦理委员会批准,患者均签署知情同意书。将人牙周膜干细胞分为2组,对照组用单纯成骨诱导液培养,肿瘤坏死因子α组用单纯成骨诱导液+10μg/L肿瘤坏死因子α培养。在成骨诱导不同时间点,进行茜素红染色定量分析、碱性磷酸酶活性检测,实时定量RT-PCR检测Osterix、Runx2基因表达水平,Western Blot检测NF-κB信号通路关键蛋白表达水平。结果与结论:①免疫组织化学染色结果显示人牙周膜干细胞抗波形丝蛋白染色表达阳性,抗角蛋白表达阴性;②茜素红染色后肿瘤坏死因子α组形成的矿化结节比对照组数量少、范围小、染色浅;③肿瘤坏死因子α组碱性磷酸酶活性明显低于对照组(P <0.05);④肿瘤坏死因子α组Osterix、Runx2基因表达水平均显著低于对照组(P <0.05);⑤肿瘤坏死因子α组p-IκBα蛋白表达量显著高于对照组(P <0.05),p65、IκBα蛋白表达量显著低于对照组(P<0.05);⑥结果表明,肿瘤坏死因子α能够通过激活NF-κB信号通路抑制人牙周膜干细胞成骨分化。

人重组骨形成蛋白-1对牙髓细胞生物学效应的研究

通过细胞培养技术、噻唑盐比色测定（ＭＴＴ）、酶动力学方法和放射免疫技术，了解人重组骨形成蛋白－１（ｒｈＯＰ－１）对体外培养的人牙髓细胞增殖、碱性磷酸酶活性及骨钙素表达的影响。结果表明，ｒｈＯＰ－１可促进牙髓细胞增殖，提高牙髓碱性磷酸酶活性及骨钙素的表达，在本实验剂量范围内呈浓度依赖关系，具有诱导牙髓细胞向成骨方向转化的趋势。

Zip1转染骨髓间充质干细胞对Wnt1/β-catenin信号成骨通路的影响

目的观察ZIP1 siRNA转染的骨髓间充质干细胞对Wnt1/β-catenin信号成骨通路的影响。方法从成年雄性新西兰兔股骨骨髓中提取骨髓间充质干细胞并培养传代,然后使用0.03 mol/L,0.09 mol/L,0.15 mol/L,0.21 mol/L酒精进行培养,经ZIP1 siRNA及ZIP1表达转染后,检测各组骨髓间充质干细胞中ALP、I型胶原、OCN及Runx2蛋白的表达量。结果与空白对照组相比,不同酒精组的ALP、I型胶原、OCN及Runx2蛋白表达量均有所下降,随着浓度升高,其表达量逐渐下降,但0.03 mol/L组中ALP及OCN下降不明显,统计学无明显意义(P>0.05),其他各组均有明显的统计学意义(P<0.05),不同酒精组中的I型胶原及Runx2与正常组之间差异均有明显统计学意义(P<0.05)。与空白对照组对比,ZIP1表达组ALP、I型胶原及OCN表达量明显升高,差异具有明显的统计学意义(P<0.05),ZIP1siRNA组ALP、OCN表达量明显降低,差异具有明显的统计学意义(P<0.05),而I型胶原表达量下降不明显,差异无统计学意义(P>0.05);与ZIP1siRNA组相比,ZIP1表达组ALP、I型胶原及OCN表达量明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 ZIP1能促使骨髓间质干细胞向成骨分化,从而促进骨修复及骨代谢。沉默ZIP1表达能抑制骨髓间充质干细胞的WNT1/β-catenin信号成骨通路的表达,从而抑制促进细胞的成骨分化能力。

内毒素对重组人成骨蛋白-1诱导人牙髓细胞活性的影响

目的：研究具核梭杆菌的内毒素（ＬＰＳ）对重组人成骨蛋白－１（ｒｈＯＰ－１）诱导牙髓细胞增殖、分化的影响。方法：采用噻唑盐比色测定（ＭＴＴ）、酶动力学方法和放射免疫技术。结果：在较低浓度ＬＰＳ作用时，可协同增加ｒｈＯＰ－１对牙髓细胞增殖和碱性磷酸酶（ＡＬＰａｓｅ）活性，但对骨钙素（ＢＧＰ）无明显影响，而高浓度ＬＰＳ则起抑制作用。结论：提示适度的ＬＰＳ在牙髓对龋病的防御反应过程中起着一定调节作用。

新生儿骨碱性磷酸酶活性增高与其血铅水平的相关性研究

为研究新生儿骨碱性磷酸酶(BALP)活性与其血铅水平的相关关系,于1997年11月～1998年11月对我院产科出生的585例新生儿,采用全血干化学免疫浓缩法,取耳垂微量血30μl进行BALP活性测定,同时,对测得BALP>200U/L的215例新生儿随机抽取100例,用石墨炉原子吸收光谱法进一步测定血铅含量。结果:①585例新生儿中,BALP活性≤200U/L(正常)370例,～250U/L(临界佝偻病)167例,～300U/L(佝偻病活动期)48例,阳性检出率36.75％;②所测血铅的100例中,其血铅含量最高值197μg/L,最低值27.40μg/L,均值76.92μg/L,≥100μg/L21例(占21％);③BALP为201U～250U/L的167例中,血铅≥100μg/L者8例,BALP251U/L～300U/L48例中,血铅≥100μg/L者13例,经相关系数检验,r=0.4772,P<0.01。提示新生儿BALP活性与血铅含量有显著的相关性,因此,加强对孕妇的营养干预和健康教育尤为重要。

成骨生长肽调节鼠胚颅盖骨成骨细胞样细胞酶活性的观察

目的 观察成骨生长肽 ( Osteogenic growth peptide,简称 OGP)对 SD大鼠鼠胚颅盖骨成骨细胞样细胞酶活性的影响。方法 无菌条件下培养鼠胚颅盖骨成骨细胞样细胞 ,分为不加 OGP的对照组和加 OGP的用药组 ,用药组在 10 -12 M～ 10 -8M OGP浓度范围内 ,再分为三组 (分别为 OGP浓度10 -12 M、10 -10 M、10 -8M) ,收集以上四组细胞及细胞培养液 ,测定它们的碱性磷酸酶及酸性磷酸酶活性。结果 用药组的碱性磷酸酶活性均显著地高于对照组 ( P<0 .0 1～ 0 .0 5,用药组 OGP10 -8M浓度、培养7天的细胞培养液中碱性磷酸酶活性为 0 .82± 0 .16U/ L,而对照组同样条件活性为 0 .2 3± 0 .10 U/ L) ,且随着 OGP浓度的升高碱性磷酸酶活性也升高 ,而酸性磷酸酶用药组与对照组无显著差异。

骨碱性磷酸酶对佝偻病早期诊断的临床研究

目的:探讨骨碱性磷酸酶(BALP)在小儿佝偻病早期诊断的临床意义。方法:对101例VitD缺乏性佝偻病患儿进行BALP检测并设立正常对照组,对BALP≥250U/L者,结合临床进行血清Ca、P、ALP和X线比较分析。结果:BALP检测具有敏感、特异、简单、快速、经济等优点。结论:BALP是目前佝偻病早期诊断有价值的实验方法,值得普及和推广。

野黄芩苷体外促成骨分化作用研究

目的研究野黄芩苷的体外促成骨分化作用。方法利用荧光素酶报告基因系统检测野黄芩苷对稳定转染bmp2启动子的MC3T3-bmp2-Luc细胞中bmp2转录活性的影响;体外培养小鼠颅骨来源的前体成骨细胞系MC3T3-E1和小鼠多能间充质干细胞样成纤维细胞C3H10T1/2,采用MTT的方法检测野黄芩苷对细胞增殖的影响;p-NPP法检测野黄芩苷对成骨细胞内碱性磷酸酶活性的影响以及通过茜素红染色的方法考察野黄芩苷对钙化结节形成的影响;Real-time PCR进一步验证野黄芩苷长时间诱导后对成骨细胞bmp2 m RNA水平的影响。结果野黄芩苷可以在20μmol/L显著上调bmp2转录活性（P〈0.001）;在1~20μmol/L的剂量浓度范围内,野黄芩苷作用72 h后对MC3T3-E1细胞增殖不明显但也无杀伤作用。野黄芩苷在两种实验用细胞中均能剂量依赖地上调ALP的活性,其中10μmol/L和20μmol/L最为显著（P〈0.05）,并且在C3H10T1/2细胞中该作用呈时间依赖性。同时也观察到24 d诱导后,野黄芩苷（5~10μmol/L）可以增加成骨细胞钙化结节的数目,且诱导12 d后,在5~20μmol/L浓度下上调bmp2 m RNA的水平。结论野黄芩苷具有体外促成骨分化的活性,有潜力成为抗骨质疏松候选化合物。

人参皂苷Rb1对体外培养人脂肪干细胞增殖与成骨分化的影响(英文)

背景:脂肪干细胞成骨分化受多种因素的影响,中药成骨诱导活性因子在脂肪干细胞研究中有重要意义。目的:观察人参皂苷Rb1在体外培养条件下对人脂肪干细胞增殖和成骨分化的影响。方法:体外分离培养人脂肪干细胞,传至第3代后,按2×103/孔接种至96孔板,分别加入0.5,1.0,2.0,4.0,6.0μmol/L人参皂苷Rb1培养基200μL进行培养;设立对照组,仅加入等量普通DMEM培养基。采用XTT比色法测定大鼠脂肪干细胞的生长增殖曲线。通过碱性磷酸酶试剂盒测定细胞碱性磷酸酶活性,放射免疫法检测骨钙素含量,茜素红染色观察钙化结节形成能力。结果与结论:0.5μmol/L人参皂苷Rb1可明显促进人脂肪干细胞增殖;随着人参皂苷Rb1浓度的增加,促细胞增殖活性降低,6.0μmol/L人参皂苷Rb1表现为明显的抑制细胞增殖作用。人参皂苷Rb1呈剂量依赖性促进人脂肪干细胞碱性磷酸酶活性和骨钙素表达。4.0,6.0μmol/L人参皂苷Rb1诱导钙化结节形成能力优于0.5,1.0和2.0μmol/L人参皂苷Rb1,对照组人脂肪干细胞未见钙化结节形成。提示人参皂苷Rb1在一定浓度范围内对体外培养条件下的人脂肪干细胞具有促生长增殖作用,但在高浓度时,人参皂苷Rb1对人脂肪干细胞的成骨分化具有促进作用,因此可作为一种良好的成骨诱导活性因子。

大鼠腹腔脂肪干细胞的分离培养及诱导成骨

背景:脂肪干细胞取材方便、增殖旺盛、具有多向分化潜能,有望取代骨髓间充质干细胞而成为新一代组织工程的种子细胞。然而,脂肪干细胞的分离培养仍存在诸多困难与不足。目的:优化脂肪干细胞的分离培养方法,并鉴定其成骨分化潜能。方法:选取200g成年雌性大鼠1只,无菌环境下切取大鼠肾脏、子宫周围及腹后外侧白色脂肪组织,多次胶原酶消化法分离消化,低糖培养基培养脂肪干细胞,倒置显微镜下观察脂肪干细胞的形态变化及增殖能力。采用成骨诱导培养液对第3代细胞进行成骨诱导,并采用碱性磷酸酶、茜素红染色方法进行鉴定。结果与结论:脂肪干细胞形态以长梭形为主,增殖活跃呈旋涡状生长。经成骨诱导10d后,碱性磷酸酶染色为阳性;成骨诱导28d后,茜素红染色阳性。提示采用多次酶消化法得到的大鼠腹腔源性脂肪干细胞在体外易于分离培养,可以稳定传代。在一定条件诱导下,可以向成骨细胞分化。采用以上方法进行脂肪干细胞的分离培养可以为组织工程提供大量、优质的种子细胞。

巴戟天多糖含药血清对骨髓间充质干细胞成骨分化过程中Cbfa-1 mRNA表达的影响

目的探讨巴戟天多糖含药血清对SD大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)骨向分化过程中核心结合因子ɑ-1(Cbfɑ-1)m RNA表达的影响。方法全骨髓贴壁法分离培养SD大鼠BMSCs,采用p NPP法检测不同浓度r巴戟天多糖含药血清(高、中、低)对BMSCs碱性磷酸酶(ALP)活性的影响,并以其最佳作用浓度进行后续实验,后续实验分成空白组、成骨诱导组、巴戟天多糖含药血清组、联合组(巴戟天多糖含药血清组+成骨诱导组),各组用药14d,采用RT-PCR技术检测各组BMSCs Cbfa-1m RNA表达的情况。结果与对照组比较,不同剂量的巴戟天多糖含药血清均可提高BMSCs分泌ALP(F=126.278,P<0.05),其中高剂量组的作用强度高于其它剂量组;与空白组相比,成骨诱导组、巴戟天多糖含药血清组、联合组均能上调BMSCs中Cbfa-1 m RNA的表达(F=261.412,P<0.05);但与成骨诱导组相比,巴戟天多糖含药血清组不及成骨诱导组,两者差异有统计学意义(t=26.721,P<0.05)。结论巴戟天多糖含药血清能够促进BMSCs向成骨细胞分化,并能上调Cbfa-1 m RNA的表达,但其作用不及成骨诱导强。