P16 GENE EXPRESSION IN OVARIAN EPITHELIAL CYSTADENOCARCINOMA

P16 gene expression was measured by immnohistochemical method in poor differentiated serous cystadenocarcinoma cell line, xenograft of highly metastasizing human ovarian carcinoma in nude mice and paramn embedded tissues from 69 patients with ovarian carcinoma. The result showed that P16 gene was positive expression in HO-8910 cell of mother line,HO8910PM cell line and xenograft of highly mcatstasizing human ovarian carcinoma in nude mice. However, P16gene in the metastatic cell had a weaker expression. P16gene positive expression were also found in sl cases of 69cases (73.9%) in the ovarian epithelial carcinoma paramn embedded tissues. Comparative studies showed that the positive rate of P16 gene expression markedly reduced with the increase of pathologic grade and clinical stage,metastasis in the lymph node and decrease of 5-year survival (P<0.05, p<0.01).P16 gene is not only a controller of cytokerastic cycle, but also a key member of tumorigenic suppresser:its absence and expression degree are also correlated with the ovarian carcinoma genesis and development,especially with the metastasis of the ovarian cancer.

Effect of hepatitis C virus infection on expression of several cancer-associated gene products in hepatocellular carcinoma

ＮＴＲＯＤＵＣＴＩＯＮＯｕｒｐｒｅｖｉｏｕｓｓｔｕｄｉｅｓｂｙｓｅｒｏｅｐｉｄｅｍｉｏｌｏｇｉｃａｌ，ｍｏｌｅｃｕｌａｒｅｐｉｄｅｍｉｏｌｏｇｉｃａｌａｎｄｉｍｍｕｎｏｐａｔｈｏｌｏｇｉｃａｌｍｅｔｈｏｄｓｈａｖｅｒｅｖｅａｌｅｄｔｈａｔｈｅｐａ...

A STUDY OF MULTI-GENE EXPRESSION IN THE HIGHLY METASTASIZING HUMAN OVARIAN CANCER CELL LINE HO-8910PM AND ITS MOTHER CELL LINE HO-8910

Objective: To investigate multi gene expression in the highly metastasizing human ovarian cancer cell line HO 8910PM and its mother cell line HO 8910. Method: The expression of 9 kinds of gene products in HO 8910PM and its mother cell line HO 8910 was detected by S P immunohistochemical method. Result: Eight kinds oncogene products showed various degrees of positive expression in both HO 8910PM and HO 8910 cell lines except gene bax. The expression of P53, Cyclin D 1, CD 44 ν6 and EGFR in HO 8910PM was stronger than that in HO 8910. However, the expression of P16, nm23 in HO 8910PM was weaker than that in HO 8910. There was no significant difference on the expression of C erb B 2 and bcl 2 between the two cell lines. Conclusion: Stronger invasive and metastatic patential is found in HO 8910PM than that in HO 8910. Carcinogenesis is a result of multi oncogene and multiple step process cooperation.

HCV感染对肝癌一些癌相关基因产物表达的影响

目的 研究丙型肝炎病毒(HCV)的致癌机理。方法 以免疫组化ABC法对46 例肝细胞癌(HCC)及其癌旁肝组织的HCV CP10、NS3及NS5 抗原和ras p21、c-m yc、c-erbB-2、突变型p53 及p16 蛋白进行染色,并将HCC分为HCV抗原阳性组和HCV 抗原阴性组,对比分析HCV 感染对上述癌相关基因蛋白产物表达的影响。结果 46 例HCC患者中,1～3 种HCV 抗原阳性20 例(43.5 % ),2～3 种HCV 抗原阳性16 例(34.8 % ),3 种HCV 抗原阳性9 例(19.6 % )。HCV 抗原阳性组p16 蛋白表达缺失率(80 % ,16/20)明显高于HCV 抗原阴性组(42.3 % ,11/26)(P<0.025),而其他癌相关基因产物在HCV 抗原阴阳性组间的表达则无明显差异。结论 重庆地区约三分之一左右肝癌的发生可能与HCV 感染有关;HCV

高转移人卵巢癌细胞系及其母系多基因表达研究

为研究高转移人卵巢癌细胞系ＨＯ８９１０ＰＭ及其母系ＨＯ８９１０多基因表达情况及其彼此关系，采用ＳＰ免疫组化染色方法，观察了９种基因产物的表达。结果显示，除ｂａｘ外，其余８种基因产物在２株细胞均呈不同程度的阳性表达。在ＨＯ８９１０ＰＭ细胞系中，以ｐ５３、ＣｙｃｌｉｎＤ１、ＣＤ４４Ｖ６、ＥＧＦＲ的表达强度强于母系；而ｐ１６、ｎｍ２３表达强度则较母系弱。２株细胞ｃｅｒｂＢ２、ｂｃｌ２表达无明显不同。结果表明，ＨＯ８９１０ＰＭ是一株较母系ＨＯ８９１０更具侵袭和转移生长潜能的细胞株。同时也证实肿瘤的发生、浸润和转移是多基因参于。

卵巢囊腺癌抑癌基因p16检测及其意义

目的：进一步探讨新型抑癌基因ｐ１６与人类卵巢癌发生发展的关系。方法：采用Ｓ－Ｐ免疫组化方法对母系ＨＯ－８９１０细胞系、高转移ＨＯ－８９１０ＰＭ、ＮＳＭＯ模型和转移瘤以及６９例卵巢囊腺癌手术标本石蜡组织进行ｐ１６检测。结果：母系ＨＯ－８９１０细胞与高转移ＨＯ－８９１０ＰＭ细胞、ＮＳＭＯ模型及转移瘤均具有ｐ１６阳性表达，表达强度均以转移细胞为弱。６９例卵巢癌石蜡组织检测ｐ１６阳性５１例（占７３．９％），结合ｐ１６表达有无及强弱与病理组织学类型及分级、临床期别、腹水、癌肿播散、淋巴结转移及５年生存情况比较分析，发现随恶性程度、期别的增加，癌肿播散、淋巴结转移的出现，５年生存率的减低，ｐ１６表达明显减少，阳性强度减弱，具有统计学差异（Ｐ＜０．０１）。结论：ｐ１６基因不仅为细胞周期的固有调控者，亦与抑制肿瘤生长的关系密切，其缺失与表达水平的改变与卵巢癌的发生发展有关。

食管鳞癌组织中脾酪氨酸激酶及p53基因的表达及临床病理意义

目的研究食管鳞状上皮细胞癌(简称食管鳞癌)组织中脾酪氨酸激酶(Syk)及p53基因的表达及二者的关系,并探讨其与食管鳞癌发生及发展的相关性。方法用快捷免疫组化法及RT-PCR法检测食管鳞癌组织及其对应癌旁组织中Syk蛋白及mRNA的表达,同时检测p53蛋白及mRNA的表达,分析食管鳞癌中上述2个基因表达变化的相关性,并观察其临床病理意义。结果食管鳞癌组织Syk蛋白及mRNA的表达显著低于癌旁组织(P<0.05);食管鳞癌组织p53蛋白及mRNA的表达显著高于癌旁非肿瘤组织(P<0.05);Syk蛋白表达与p53蛋白(突变型)表达呈负相关(rs=-0.604,P<0.05);Syk蛋白表达与食管鳞癌TNM分期、淋巴结转移情况相关(P<0.05),与肿瘤大小无关(P>0.05)。结论 Syk在食管鳞癌中表达减弱及缺失与其发生和转移倾向相关;Syk可能是食管鳞癌的肿瘤抑制基因,其作用可能是p53(野生型)依赖性的。

早期胆囊癌癌基因的表达

目的：研究从慢性胆囊炎，胆囊腺瘤至早期胆囊癌等多阶段发展过程中多种癌基因变化，进一步探讨胆囊癌的发病机理，寻找胆囊癌早期诊断的肿瘤标志物。方法：采用免疫组织化学Ｓ－Ｐ法检测慢性胆囊炎、胆囊腺瘤及早期胆囊癌的ｎｍ２３、ｐ５３、ｒａｓ、ｃ－ｍｙｃ、ｃ－ｅｒｂＢ－２等癌相关基因蛋白的表达。结果：①ｎｍ２３、ｐ５３、ｃ－ｍｙｃ、ｒａｓ及ｃ－ｅｒｂＢ－２基因在胆囊腺瘤及早期胆囊癌中有表达；②着色强度随病变发展逐渐增强；③２例胆囊腺瘤伴不典型增生呈强阳性表达；④ｐ５３基因仅见于早期胆囊癌；⑤联合癌基因ｐ５３、ｒａｓ，ｐ５３、ｃ－ｍｙｃ，ｐ５３、ｃ－ｅｒｂＢ－２及ｐ５３、ｒａｓ、ｃ－ｍｙｃ对诊断早期胆囊癌有价值。结论：ｐ５３，ｒａｓ，ｃ－ｍｙｃ及ｃ－ｅｒｂＢ－２可能与胆囊癌的发生有关，四者在胆囊癌的发生中可能起协同作用。

卵巢肿瘤组织中C-erbB_2、P_(16)基因的表达及与预后的关系

目的:探讨卵巢肿瘤中癌基因C-erbB2及抑癌基因P16的表达及其与临床病理特征及患者预后的关系。方法:用免疫组织化学ABC法,分析98例卵巢恶性肿瘤、24例交界性肿瘤、30例良性肿瘤、10例正常组织石蜡包埋组织中C-erbB2、P16的表达情况。结果:①C-erbB2在卵巢恶性肿瘤、交界性肿瘤、良性肿瘤之间的表达存在显著性差异(P<0.01)。C-erbB2的表达率及表达强度与组织分化程度及生存期有显著相关性(P<0.05),C-erbB2的过度表达见于恶性程度高、组织分化差、预后不良的肿瘤中。②P16在卵巢恶性肿瘤、交界性肿瘤、良性肿瘤之间的表达存在显著性差异(P<0.01)。其表达强度与组织分化程度及临床分期有显著相关性,在恶性程度比较高、组织分化差、较晚期的肿瘤中P16的表达较弱。结论。癌基因C-erbB2及抑癌基因P16在卵巢癌组织中广泛存在,并与其临床病理指标之间有一定的相关性。提示这些基因在卵巢癌的发生、发展中起一定作用,并对患者临床预后的判断及治疗有一定的指导意义。对各基因之间复杂的相互作用、协同作用还有待于进一步研究。

肿瘤抑制候选基因4及Raf激酶抑制蛋白在不同级别卵巢浆液性腺癌中的表达

目的探讨肿瘤抑制候选基因4(TUSC4)及Raf激酶抑制蛋白(RKIP)在不同级别卵巢浆液性腺癌中的表达情况。方法收集经手术切除并经病理确诊的卵巢浆液性腺癌标本77例,其中卵巢低级别浆液性腺癌25例,卵巢高级别浆液性腺癌52例;另收集经手术切除并经病理确诊的卵巢浆液性囊腺瘤53例及卵巢交界性浆液性囊腺瘤23例;同时选取其他病因手术切除的正常输卵管组织25例及正常卵巢上皮组织25例进行对照。采用免疫组织化学方法对6组标本的TUSC4及RKIP进行检测,并对其阳性表达率进行比较分析。结果 TUSC4在正常卵巢上皮组织、卵巢浆液性囊腺瘤、卵巢交界性浆液性囊腺瘤及卵巢低级别浆液性腺癌、卵巢高级别浆液性腺癌、正常输卵管上皮组织的阳性表达率分别为80.0%、73.6%、60.9%、48.0%、32.7%和32.0%;TUSC4在卵巢低级别浆液性腺癌组织中的阳性表达率显著低于正常卵巢上皮组织(P<0.05);而正常输卵管上皮组织与卵巢高级别浆液性腺癌组织的TUSC4阳性表达率比较差异无统计学意义(P>0.05)。低级别浆液性腺癌组织中TUSC4的阳性表达率低于卵巢浆液性囊腺瘤(χ2=4.91,P<0.05)及正常卵巢上皮组织(χ2=5.56,P<0.05);正常输卵管上皮组织、卵巢高级别浆液性腺癌组织TUSC4的阳性表达率均低于卵巢交界性浆液性囊腺瘤(χ2=4.02、5.22,P<0.05)、卵巢浆液性囊腺瘤(χ2=12.27、17.63,P<0.01)及正常卵巢上皮组织(χ2=11.69、15.14,P<0.01)。RKIP在正常卵巢上皮组织、卵巢浆液性囊腺瘤、卵巢交界性浆液性囊腺瘤、卵巢低级别浆液性腺癌、正常输卵管上皮组织、卵巢高级别浆液性腺癌的阳性表达率分别为100.0%、84.9%、69.6%、64.0%、52.0%和13.5%。卵巢高级别浆液性腺癌组织中RKIP的阳性表达率显著低于正常卵巢上皮组织、卵巢浆液性囊腺瘤、卵巢交界性浆液性囊腺瘤、卵巢低级别浆液性腺癌、正常输卵管上皮组织(χ2=52.06、53.59、23.61、20.59、13.04,P<0.01);卵巢交界性浆液性囊腺瘤组织中RKIP阳性表达率低于正常卵巢上皮组织(χ2=8.91,P<0.01);正常输卵管上皮组织、卵巢低级别浆液性腺癌组织RKIP的阳性表达率均显著低于正常卵巢上皮组织(χ2=15.79、10.98,P<0.01)、卵巢浆液性囊腺瘤(χ2=9.65、4.36,P<0.05)。结论 TUSC4及RKIP均参与了卵巢低级别浆液性腺癌的发病过程,而RKIP亦参与了卵巢高级别浆液性腺癌的发生,且卵巢低级别浆液性腺癌与卵巢高级别浆液性腺癌可能存在不同的分子发病机制。

胃癌组织中P16、P53蛋白表达的相关性和临床意义

目的 探讨 P16、 P5 3基因在胃癌发生发展及预后判断上的作用 ,以及可能的基因调节机制。方法 应用免疫组化方法检测 61例胃癌标本和 4 9例癌旁正常胃粘膜的 P16和 P5 3蛋白表达。结果 胃癌组织 P16蛋白的阳性率为 70 .5 % ( 4 3 / 61) ,而癌旁正常胃粘膜的阳性率为 10 0 % ( 4 9/ 4 9) ,10例早期胃癌均有 P16蛋白的表达 ,而且在同一切片中可以观察到分化较好或浸润浅层的癌细胞表达 P16蛋白 ,而分化较差、浸润深层的癌细胞则没有表达。P16蛋白表达强度与胃癌的分化程度、浸润深度、有无淋巴结转移及病人的生存期密切相关 ( P<0 .0 1) ;P5 3蛋白表达与 P16蛋白的失表达无显著相关 ,但对于 P16有表达的病例 ,P5 3阳性时 ,其表达强度较强 ( P<0 .0 5 )。结论 确有部份的胃癌组织存在 P16基因的失表达 ,且失表达发生在胃癌发生发展的晚期阶段 ;胃癌细胞中可能存在 Rb- P16的负反馈调节。

c-myc、P21^(WAF1)和LMP-1在鼻咽癌中表达的意义及其与Ki67的关系

目的:研究原癌基因c-myc、细胞周期调控蛋白(P21WAF1)、EB病毒潜伏膜蛋白1(Latent m embraneprote in 1)LMP-1与K i67在鼻咽癌(Nasopharyngeal carc inom a,NPC)中的表达及其相关性和临床意义。方法:应用免疫组织化学Envision二步法检测35例经治疗后,生存时间<5年的鼻咽非角化性癌(Nonkeratin izing carc ino-m a,NKC),60例生存时间≥5年的NKC及对照组30例鼻咽黏膜慢性炎症组织(non-tumour nasopharyngeal tis-sue,NP)内c-myc,P21WAF1,LMP-1,K i67的表达水平。结果:(1)c-myc,LMP-1和K i67在生存时间<5年组、生存时间≥5年组及NP组中的阳性表达率依次递减(P<0.05);(2)P21WAF1在NKC生存时间<5年组,生存时间≥5年组及NP组中的阳性率依次递增(P<0.05);(3)c-myc的阳性表达与NKC的淋巴结转移有关(P<0.05)。LMP-1,K i67的阳性表达与NKC临床分期密切相关(P<0.05);(4)c-myc和LMP-1共同表达时较两者各自单独表达时,K i67的强表达率明显增强;(5)c-myc和LMP-1的阳性表达与K i67的强表达呈正相关关系,P21WAF1的阳性表达与K i67的强表达呈负相关关系。结论:c-myc,LMP-1的高表达及P21WAF1的低表达与NPC细胞的增殖密切相关,且前两者在NKC发生发展中存在协同作用;通过检测c-myc,P21WAF1,LMP-1及K i67的表达,有助于对NKC预后的评估。

原发性胆囊癌染色体比较基因组杂交分析

目的探讨原发性胆囊癌组织中的基因组变化,寻找与胆囊癌相关的癌基因和抑癌基因的染色体候选区域。方法采用比较基因组杂交方法(CGH)分析28例原发性胆囊癌组织基因组的不平衡即 DNA 的扩增和丢失。结果胆囊癌常见的染色体扩增区域是7p、7q、8q、17q、5p、11q、1q;常见的缺失染色体为17 p、9p、5q、6q、3p、15p、13p。结论胆囊癌中存在多条染色体拷贝数的改变,7p、7q、8q 和17p、9p 等部位可能分别存在与胆囊癌密切相关的癌基因和抑癌基因。