卵巢浆液性肿瘤组织中转导蛋白β样1X相关蛋白1、睾素2表达对病人的预后价值

目的探究卵巢浆液性肿瘤组织中转导蛋白β样1X相关蛋白1(TBL1XR1)、睾素2蛋白表达水平及其与预后的关系。方法选取2015年4月至2017年4月南通大学附属肿瘤医院102例卵巢浆液性癌病人(恶性组),50例卵巢交界性浆液性肿瘤病人(交界组),48例卵巢良性浆液性肿瘤病人(良性组)。免疫组织化学法检测组织中TBL1XR1、睾素2蛋白表达。实时荧光定量PCR检测血清TBL1XR1、睾素2 mRNA表达水平。Kaplan-Meier分析TBL1XR1、睾素2蛋白不同表达情况与生存时间关系。Cox回归模型分析恶性组病人不良预后影响因素。受试者操作特征曲线(ROC曲线)分析血清TBL1XR1、睾素2 mRNA对恶性组不良预后预测价值。结果恶性组TBL1XR1、睾素2蛋白高表达率高于交界组,交界组又高于良性组(P<0.05)。恶性组、交界组、良性组血清TBL1XR1(2.27±0.58,1.41±0.37,1.06±0.13)、睾素2 mRNA表达水平(2.66±0.67,1.58±0.40,1.09±0.15)逐次降低(P<0.05)。FIGO分期为Ⅲ~Ⅳ期、淋巴结转移及组织学分级为高级别TBL1XR1、睾素2蛋白高表达率高于Ⅰ~Ⅱ期、淋巴结无转移及低级别(P<0.05)。生存分析显示,TBL1XR1、睾素2蛋白高表达组5年累积生存率分别低于TBL1XR1、睾素2低表达组(P<0.05)。Cox多因素回归分析,FIGO分期Ⅲ~Ⅳ期、淋巴结发生转移、组织学分级为高级别、TBL1XR1高表达、睾素2高表达是卵巢浆液性癌病人不良预后危险因素(P<0.05)。恶性组死亡病人血清TBL1XR1(2.65±0.61比1.82±0.54)、睾素2 mRNA表达水平(3.10±0.76比2.15±0.57)高于生存病人(P<0.05)。ROC曲线结果显示,血清TBL1XR1、睾素2 mRNA预测恶性组病人不良预后的曲线下面积(AUC)都为0.84;二者联合预测不良预后的AUC为0.94,优于TBL1XR1、睾素2 mRNA单独预测(Z=2.24、P=0.025,Z=2.17、P=0.030)。结论卵巢浆液性癌组织及血清TBL1XR1、睾素2均为高表达,与FIGO分期、淋巴结转移、组织学分级及不良预后密切相关,血清TBL1XR1联合睾素2具有较高的预后预测价值。

NLRP3在卵巢储备功能减退发病机制中的研究进展

卵巢储备功能减退(DOR)是全球育龄期女性生育力下降的一个重要原因,其主要表现为卵巢内卵母细胞数量减少或伴随质量下降。目前其致病原因尚不明确,但慢性无菌性炎症反应被认为是DOR发病机制中的主要病理生理过程。细胞在微生物感染或损伤等刺激下炎症小体的激活是机体免疫反应的重要机制。Nod样受体蛋白3(NLRP3)炎症小体是当前广泛研究的炎症小体类型之一。NLRP3参与炎症小体形成,随着近年来对NLRP3炎症小体的深入研究,发现NLRP3炎症小体的过度激活是导致DOR的重要因素。本文对NLRP3炎症小体的组装和激活、NLRP3炎症小体在DOR中的作用等方面进行综述,以期为DOR后续相关研究的开展及临床治疗手段的开发提供新思路。

沙棘黄酮通过调控TLR4/NF-κB信号通路改善大鼠多囊卵巢综合征的作用

目的:探究沙棘黄酮改善大鼠多囊卵巢综合征(polycystic ovarian syndrome,PCOS)的作用及机制,为PCOS的防治提供新的思路。方法:采用高脂饲料联合灌胃来曲唑法复制PCOS模型,并随机分为模型组、低、高剂量沙棘黄酮组(200、400 mg/kg)及二甲双胍组(100 mg/kg),灌胃21 d后检测相关指标变化。结果:与模型组比较,低、高剂量沙棘黄酮组大鼠卵巢指数、发情间期时像百分率、空腹血糖(FBG)、空腹胰岛素(FINS)含量、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、血清促黄体生成素(LH)活性及睾酮(T)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)、C反应蛋白(CRP)含量显著降低(P<0.05,P<0.01),促卵泡刺激素(FSH)活性极显著增加(P<0.01);低、高剂量沙棘黄酮组大鼠卵巢组织病理形态有所改善,Toll样受体4(TLR4)、髓样分化因子88(My D88)、核转录因子κBp65(NF-κBp65)mRNA及TLR4、MyD88、p-NF-κBp65蛋白表达显著降低(P<0.05,P<0.01)。结论:沙棘黄酮可以改善PCOS大鼠症状,减轻胰岛素抵抗,调节性激素水平,修复卵巢组织病理改变,其机制与抑制TLR4/NF-κB信号通路介导的炎症反应有关。

伴KRAS突变的卵巢中肾样腺癌1例

中肾样腺癌(mesonephric-like adenocarcinoma,MLA)是一种主要发生于子宫内膜和卵巢并显示中肾样分化的腺癌,具有侵袭性强及倾向转移等特点。因其镜下表现复杂多样,仅通过组织形态学观察难以确诊,需借助免疫组织化学及分子生物学检测辅助诊断。现报告1例原发于卵巢的MLA。患者,女,52岁,因外院行彩色多普勒超声检查提示盆腔肿物,遂于2022年10月于贵州医科大学附属医院妇科就诊。术中送检右侧卵巢,冰冻诊断结果为(右)侧卵巢腺癌,遂行全子宫、左侧附件、大网膜切除及盆腔淋巴结清扫术。病理诊断为(右)侧卵巢MLA伴子宫内膜异位症;子宫多发平滑肌瘤(肌壁间及浆膜下型);子宫腺肌症。送检淋巴结及大网膜组织均未见转移癌。给予紫杉醇联合卡铂化学治疗6个疗程。随访至2023年10月二维超声检查提示复发。

转导蛋白β样1X连接受体1表达对卵巢癌A2780细胞增殖和迁移的影响

目的:研究转导蛋白β样1X连接受体1(transducin beta-like 1X-linked receptor,TBL1XR1)在卵巢癌患者组织中表达,及其对卵巢癌A2780细胞增殖和迁移的影响。方法:采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测10对卵巢癌组织、癌旁组织中及人卵巢癌IOSE80、A2780、CP70、SKOV-3中TBL1XR1 mRNA表达,筛选TBL1XR1 mRNA高表达细胞株。选择4~6周龄雌性BALB/C裸鼠,建立卵巢癌人源肿瘤异种移植(patient-derived tumor xenografts,PDTX)模型;将10只模型鼠均分为siR-NC组和si-TBL1XR1组,每组5只,分别给予siR-NC、si-TBL1XR1局部注射,10 mg/kg,每3 d注射1次,18 d后取各组瘤组织,计算其体积与重量。取卵巢癌A2780细胞,将其分为siR-NC组、si-TBL1XR1组、pcDNA3.1组和pcDNA3.1-TBL1XR1组,分别予以siR-NC、si-TBL1XR1、pcDNA3.1空载质粒和pcDNA3.1-TBL1XR1质粒处理;采用蛋白免疫印迹法检测各组卵巢癌细胞周期蛋白表达,MTT比色法检测细胞活力,流式细胞术检测细胞周期和凋亡细胞比例,以及Transwell细胞迁移实验检测细胞迁移能力。结果:卵巢癌组织中TBL1XR1 mRNA表达明显高于癌旁组织(P<0.05);人卵巢癌A2780细胞系TBL1XR1 mRNA表达明显高于卵巢癌IOSE80、CP70、SKOV-3细胞系(P<0.05)。与siR-NC组相比,第18天si-TBL1XR1组瘤体积明显减小(P<0.05),重量明显降低(P<0.05)。与siR-NC组相比,si-TBL1XR1组促癌细胞周期蛋白表达明显降低(P<0.05),与pcDNA3.1组相比,pcDNA3.1-TBL1XR1组表达则明显升高(P<0.05);与siR-NC组相比,si-TBL1XR1组卵巢癌细胞迁移数明显降低(P<0.05),早期凋亡和晚期凋亡细胞比例明显升高(P<0.05);与pcDNA3.1组相比,pcDNA3.1-TBL1XR1组卵巢癌细胞迁移数明显增多(P<0.05),早期凋亡和晚期凋亡细胞比例明显降低(P<0.05)。结论:TBL1XR1在卵巢癌组织中呈高表达,降低TBL1XR1 mRNA表达可抑制卵巢癌A2780细胞增殖和迁移。

CKAP2L在卵巢癌中的表达及临床意义

目的本研究主要分析细胞骨架相关蛋白2样蛋白(cytoskeleton associated protein 2 like protein,CKAP2L)在卵巢癌中的表达及临床意义。方法选取2018年2月至2020年5月在太原市中心医院行卵巢癌根治术的卵巢癌患者87例,收集其卵巢癌组织及距癌灶边缘>2 cm的癌旁组织。实时荧光定量聚合酶链反应(quantitative real-time polymerase chain reaction,qRT-PCR)法测定卵巢癌组织及癌旁组织中CKAP2L的mRNA表达,免疫组化法分析卵巢癌组织及癌旁组织中CKAP2L的蛋白表达。Kaplan-Meier法分析卵巢癌组织中CKAP2L表达与患者预后的关系。结果CKAP2L在卵巢癌组织中mRNA表达显著高于癌旁组织(P<0.05)。卵巢癌组织中CKAP2L的蛋白阳性表达率显著高于癌旁组织(P<0.05)。卵巢癌组织中CKAP2L mRNA表达与患者肿瘤分化程度、淋巴结转移、FIGO分期、浸润深度有关(P<0.05)。Kaplan-Meier分析结果表明,卵巢癌患者3年总生存率为80.46%;CKAP2L低表达患者3年总生存率为显著高于CKAP2L高表达患者(Log-rankχ^(2)=8.316,P=0.004)。患者3年无复发生存率为77.01%;CKAP2L低表达患者3年无复发生存率显著高于CKAP2L高表达患者(Log-rankχ^(2)=8.921,P=0.003)。结论CKAP2L在卵巢癌组织中高表达,与FIGO分期、淋巴结转移等有关,是卵巢癌患者死亡的影响因素。

单细胞转录组数据揭示PHLDA1是卵巢癌T细胞耗竭的关键分子

目的通过绘制高级别浆液性卵巢癌(High-grade serous ovarian cancer,HGSOC)单细胞转录组图谱,筛选并验证与CD8^(+)T细胞耗竭相关的关键基因。方法利用实验室前期的单细胞测序数据(SRA数据库:PRJNA756768),并整合数据库中5例HGSOC测序数据,分析肿瘤微环境中T细胞的具体亚型,拟时序分析探究T细胞亚群分化轨迹,差异基因富集确定免疫抑制的CD8^(+)IL-2^(Low)和CD8^(+)IFN-γ^(Low)细胞亚群及差异基因,再结合患者预后筛选出与CD8^(+)T细胞耗竭密切相关的候选分子。流式分析人PBMC中的T细胞激活到耗竭过程中Pleckstrin同源样结构域家族A成员1(Pleckstrin homology-like domain,family A,member 1,PHLDA1)在CD8^(+)T、CD4^(+)T及Treg细胞上的表达,ELISA检测PHLDA1 High和PHLDA1 Low的CD8^(+)T细胞分泌IFN-γ和IL-2的水平,最后流式数据分析PHLDA1与耗竭标志物PD-1、TIM-3的关联。结果将T细胞按三种方式分群:(1)IL-2 High和IL-2^(Low);(2)IFN-γ^(High)和IFN-γ^(Low);(3)耗竭和杀伤T细胞。随后取其差异基因的交集,最终筛选到关键基因PHLDA1。流式分析提示T细胞激活到耗竭的过程中,PHLDA1在CD8^(+)T、CD4^(+)T及Treg细胞上的表达持续升高;ELISA结果显示CD8^(+)PHLDA1^(High)的T细胞分泌IFN-γ和IL-2的水平显著低于CD8^(+)PHLDA1^(Low)T细胞。同时,CD8^(+)PHLDA1^(High)T细胞亚群可同时覆盖CD8^(+)TIM-3^(+)和CD8^(+)PD-1^(+)的耗竭T细胞类型。结论本研究基于单细胞测序数据筛选到PHLDA1是卵巢癌CD8^(+)T细胞耗竭的关键分子,该研究为卵巢癌的免疫治疗提供了新的思路。

外周血PTPN3、DCLK1水平与卵巢癌患者临床病理特征及预后的关系

目的探究外周血蛋白酪氨酸去磷酸酶3(PTPN3)、双皮质素样激酶1(DCLK1)水平与卵巢癌(OC)患者临床病理特征及预后的关系。方法选取2018年5月至2019年5月在张家口市第一医院收治的120例疑似OC患者作为研究对象,将60例经手术病理诊断确诊为OC的患者纳入OC组,60例经手术病理诊断确诊为良性的患者纳入良性组;选取同期同一医院体检的60例健康女性纳入对照组。根据OC患者3年随访情况,分为生存组(n=41)和死亡组(n=19)。采取酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测所有研究对象外周血PTPN3、DCLK1水平。采用Kaplan-Meier法分析PTPN3、DCLK1水平与患者预后的关系,COX回归分析影响OC患者预后的危险因素。结果与对照组相比,OC组和良性组外周血PTPN3、DCLK1水平显著升高;与良性组相比,OC组外周血PTPN3、DCLK1水平显著升高(P<0.05)。PTPN3和DCLK1水平与OC患者国际妇产科联盟(FIGO)分期、有无淋巴结转移、分化程度有关(P<0.05)。PTPN3、DCLK1高表达组患者3年内生存率低于低表达组(P<0.05)。死亡组外周血PTPN3、DCLK1水平显著高于生存组(P<0.05)。多因素COX回归分析结果显示,分化程度、高水平PTPN3及DCLK1是影响OC患者预后的危险因素(P<0.05)。结论OC患者外周血PTPN3、DCLK1表达水平显著升高,且与OC患者术后3年的生存状况相关。

lncRNA HAGLR促卵巢癌细胞生长和上皮-间充质转化的机制研究

目的研究长链非编码RNA同源盒D基因簇反义生长相关长链非编码RNA(lncRNA HAGLR)通过调控核苷酸结合寡聚化结构域样受体家族pyrin结构域蛋白3(NLRP3)炎症小体对卵巢癌细胞生长和上皮-间充质转化(EMT)的调控作用。方法培养卵巢正常细胞IOSE-80(IOSE-80组)以及卵巢癌细胞A2780(A2780组)。然后将A2780随机分为lncRNA HAGLR沉默组(siHAGLR组)、沉默阴性对照组(siNC组)、siHAGLR联合NLRP3抑制剂MCC950处理组(siHAGLR+MCC950组)。qRT-PCR法检测lncRNA HAGLR的表达。Western blot检测NLRP3炎症小体相关蛋白NLRP3、caspase-1、ASC和EMT相关蛋白Vimentin、Snail1、α-SMA、Twist1的表达。CCK-8法检测A2780细胞的增殖活性。Transwell法检测A2780细胞的迁移和侵袭能力。细胞克隆形成实验检测A2780细胞的生长能力。TUNEL染色检测A2780细胞的凋亡。结果与IOSE-80组相比,A2780组lncRNA HAGLR、Vimentin、Snail1、α-SMA、Twist1表达均上调(P<0.05),但NLRP3、caspase-1、ASC的表达均下调(P<0.05)。与siNC组相比,siHAGLR组的lncRNA HAGLR、Vimentin、Snail1、α-SMA、Twist1表达均下调(P<0.05),但NLRP3、caspase-1、ASC的表达均上调(P<0.05),细胞增殖率、细胞克隆数以及迁移和侵袭数均明显减少(P<0.05),细胞凋亡数则增加(P<0.05)。与siHAGLR组相比,siHAGLR+MCC950组的lncRNA HAGLR表达无明显变化(P>0.05),而Vimentin、Snail1、α-SMA、Twist1表达均上调(P<0.05),但NLRP3、caspase-1、ASC的表达均下调(P<0.05),细胞增殖率、细胞克隆数以及迁移和侵袭数均显著增加(P<0.05),细胞凋亡数则减少(P<0.05)。结论lncRNA HAGLR通过抑制NLRP3炎症小体促进卵巢癌细胞的生长和EMT。

多囊卵巢综合征不孕女性血清胰岛素样生长因子结合蛋白-3、游离睾酮指数水平及与卵巢储备功能的关系

目的 分析多囊卵巢综合征(PCOS)不孕女性血清胰岛素样生长因子结合蛋白-3(IGFBP-3)、游离睾酮指数(FAI)水平及其与卵巢储备功能的关系。方法 回顾性分析青岛市第八人民医院收治的120例PCOS不孕女性(观察组)和42名健康体检女性(对照组)的临床资料。比较观察组和对照组研究对象血清IGFBP-3及FAI水平,并统计观察组患者卵巢储备功能情况,比较卵巢储备功能正常、卵巢储备功能低下患者的基线资料,分析PCOS不孕女性卵巢储备功能低下的影响因素,血清IGFBP-3、FAI水平与PCOS不孕女性卵巢储备功能的关系及其对PCOS不孕女性卵巢储备功能低下的预测效能。结果 与对照组比较,观察组患者血清IGFBP-3水平更低,FAI水平更高(P<0.05)。120例PCOS不孕女性中,38例存在卵巢储备功能低下。与卵巢储备功能正常患者比较,卵巢储备功能低下患者的盆腔炎发生率、婚姻不满意占比及FAI水平更高(P<0.05),血清IGFBP-3水平更低(P<0.05);多因素Logistic回归分析显示盆腔炎(95%CI:1.151~6.290)、婚姻满意程度(95%CI:1.033~4.952)、血清IGFBP-3水平(95%CI:0.040~0.286)及FAI水平(95%CI:10.024~185.807)是PCOS不孕女性的卵巢储备功能低下的影响因素(P<0.05)。Pearson分析显示血清IGFBP-3水平与卵巢储备功能呈正相关关系(r=0.513,P<0.05),FAI水平与卵巢储备功能呈负相关关系(r=-0.495,P<0.05)。ROC曲线分析血清IGFBP-3、FAI水平及两者联合预测PCOS不孕女性卵巢储备功能低下的AUC分别为0.786、0.845、0.912,且联合预测的AUC值更高(P<0.05)。结论 与正常人群比较,PCOS不孕女性血清IGFBP-3水平更低,与卵巢储备功能呈正相关关系;FAI水平更高,与卵巢储备功能呈负相关关系,即血清IGFBP-3水平越低,FAI水平越高,卵巢储备功能越低下,血清IGFBP-3联合FAI水平对卵巢储备功能低下具有较好的预测效能。

miRNA-146通过调控TLR4/NF-κB信号通路促进 POI模型卵巢颗粒细胞生长的机制研究

目的 探讨小鼠原发性卵巢功能不全(POI)模型的微小RNA(miRNA)-146、Toll样受体4(TLR4)和核转录因子-κB(NF-κB)的水平及对卵巢颗粒细胞生长的影响。方法 取健康雌性BALB/c小鼠40只,随机分为POI组和对照组,每组20只。采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测血清miRNA-146水平;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-6(IL-6)表达水平;采用蛋白质印迹法检测小鼠卵巢组织TLR4和NF-κB蛋白水平。采用miRNA-146模拟物或抑制剂转染小鼠卵巢颗粒细胞,评估卵巢颗粒细胞增殖、生长活力和细胞凋亡率及TLR4、NF-κB通路蛋白的表达。采用Spearman相关分析POI模型miRNA-146水平与TLR4和NF-κB水平的相关性。结果 POI组的miRNA-146水平显著低于对照组(P<0.05),TNF-α、IL-6、TLR4、NF-κB水平高于对照组(P<0.05)。miRNA-146模拟物在卵巢颗粒细胞中呈高表达水平,且呈浓度依赖趋势。miRNA-146转染后,miRNA-146模拟物组细胞凋亡率低于对照组,miRNA-146抑制剂组细胞凋亡率高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.01)。Spearman相关性分析结果显示,POI小鼠的miRNA-146水平与TLR4、NF-κB水平呈负相关(r=-0.725、-0.681,P<0.05)。结论 上调miRNA-146水平具有促进卵巢颗粒细胞生长的作用,其机制可能与miRNA-146负性调控TLR4/NF-κB信号通路和下调TNF-α、IL-6的表达相关,miRNA-146有望作为评估卵泡质量的指标之一。

PCOS患者血清血管生成素样蛋白2、4水平与卵巢间质血流动力学的关系

目的探讨多囊卵巢综合征(PCOS)患者血清血管生成素样蛋白2、4(Angptl2、Angptl4)与卵巢间质血流动力学的关系。方法选取123例PCOS患者(PCOS组)及41例健康志愿者(对照组),比较2组血清Angptl2、Angptl4水平及卵巢间质收缩期最大血流速度(PSV)、搏动指数(PI)、阻力指数(RI);分析Angptl2、Angptl4与PSV、PI、RI及PCOS的关系及两者对PCOS的预测价值。结果PCOS组左右侧卵巢间质PI、RI均低于对照组,PSV高于对照组(P<0.05)。Pearson分析显示,PCOS患者血清Angptl2、Angptl4与左右侧卵巢间质PSV呈正相关,与PI、RI呈负相关(P<0.01)。Logistic回归结果显示,高HOMA-IR(OR=1.921,95%CI:1.017~4.154)、高BMI(OR=1.459,95%CI:1.085~3.220)、高Angptl2(OR=2.625,95%CI:1.330~6.324)、高Angptl4(OR=3.543,95%CI:1.915~8.147)是影响PCOS发生的危险因素(P<0.05)。受试者工作特征(ROC)曲线显示,血清Angptl2、Angptl4单独应用时,预测PCOS的AUC(95%CI)为0.747(0.661~0.821)、0.769(0.685~0.841),低于两者联合应用的0.879(0.793~0.921,P<0.05)。结论血清Angptl2、Angptl4在PCOS患者中异常升高,与卵巢间质血流动力学相关,且两者与PCOS发生密切相关,可作为评估PCOS的参考指标。

miR-767-5p通过调控TBL1XR1蛋白表达抑制人卵巢癌细胞系侵袭

目的探索miR-767-5p和转导素β1X连锁受体蛋白1(TBL1XR1)对卵巢癌进展的影响以及作用机制。方法数据库分析:使用GEO、miRPATH数据库和RStudio对miR-767-5p进行KEGG(京都百科全书)富集分析,并在GEO数据集低表达和高表达microRNA中各选择差异表达倍数TOP5的microRNAs,按照差异倍数由低到高排列;miRDB等数据库预测miR-767-5p可结合的靶基因并取交集,结合Open Target Platform、GEPIA等数据库筛选出目的基因;GEPIA、THPA数据库分析TBL1XR1在人体各器官表达量分析、免疫组化分析以及生存曲线分析。实验验证:双荧光素酶报告基因实验验证miR-767-5p和TBL1XR1存在结合靶点;Western blot检测卵巢癌细胞系(OC3、SKOV-3、HO-8910)和正常卵巢上皮细胞系(IOSE80)中TBL1XR1的表达;在SKOV-3细胞中转入miR-767-5p过表达质粒与TBL1XR1过表达质粒后,Western blot检测TBL1XR1表达量,Tanswell小室法检测细胞侵袭。结果数据库分析:选择低表达差异倍数最高的miR-767-5p作为目的microRNA进行后续研究;miR-767-5p参与多种癌的相关通路,且miR-767-5p、TBL1XR1与乳腺癌、卵巢癌等联系密切;TBL1XR1在卵巢癌中呈现高表达,且与患者预后不良相关。实验验证:miR-767-5p和TBL1XR1可靶向结合(P<0.05);相对于IOSE80细胞,TBL1XR1在OC3、SKOV-3、HO-8910细胞中呈现明显高表达;转入miR-767-5p过表达质粒后,TBL1XR1表达量降低,卵巢癌细胞侵袭性降低(P<0.05),而同时转入TBL1XR1过表达质粒后可在一定程度上减弱这种影响。结论miR-767-5p通过调控TBL1XR1的表达抑制人卵巢癌细胞系的侵袭。

LINC01503通过miR-342-3p/IGF2R轴促进上皮性卵巢癌的进展

目的:探讨LINC01503在上皮性卵巢癌(EOC)中的表达水平和生物学功能及其可能的作用机制。方法:收集2015年5月至2016年5月间在河北医科大学第四医院妇瘤科手术切除并经病理学确诊的85例EOC患者的肿瘤组织和输卵管组织。常规培养人EOC细胞A2780、SKOV3、OVCAR3和OV90及正常人卵巢上皮细胞IOSE80,将si-LINC01503、si-NC及miR-342-3p mimic、miR mimic NC分别转染至SKOV3和A2780细胞,分别作为si-LINC01503组、si-NC组、miR-342-3p mimic组和miR mimic NC组。q PCR法检测EOC组织和细胞中LINC01503的表达水平,Kaplan-Meier法分析LINC01503表达水平与患者生存的关系。双荧光素酶报告基因实验验证LINC01503/miR-342-3p/IGF2R轴相关分子间的靶向关系。平板克隆、划痕愈合和Transwell实验分别检测敲低LINC01503及转染miR-342-3p mimic对A2780和SKOV3细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响。WB法检测EOC细胞中LINC01503/miR-342-3p通路对IGF2R蛋白表达的影响。构建A2780细胞裸鼠移植瘤模型,观察敲低LINC01503对移植瘤生长的影响。结果:EOC组织和细胞中LINC01503表达水平分别显著高于输卵管组织和IOSE80细胞(均P<0.01),LINC01503高表达组患者术后PFS和OS均显著短于LINC01503低表达组患者(均P<0.01)。敲低LINC01503、转染miR-342-3p mimic均可抑制EOC细胞的增殖、迁移和侵袭能力(均P<0.01)。敲低LINC01503可下调IGF2R的表达(P<0.01),这一现象可通过转染miR-342-3p inhibitor挽救。敲低LINC01503可抑制A2780细胞裸鼠移植瘤的生长(P<0.01)。结论:在EOC组织和细胞中呈高表达的LINC01503与患者的不良预后密切相关,LINC01503可能通过吸附miR-342-3p影响IGF2R表达进而促进EOC的进展。

血清lncRNA LOXL1-AS1、lncRNA MALAT1与上皮性卵巢癌患者临床病理特征、血清细胞凋亡分子和预后不良的关系研究

目的 探讨血清长链非编码核糖核酸(lncRNA)中的赖氨酰氧化酶样1(LOXL1-AS1)、肺腺癌转移性相关转录本1(MALAT1)与上皮性卵巢癌(EOC)患者临床病理特征、血清细胞凋亡分子和预后不良的关系。方法 选取2017年1月至2020年1月该院收治的EOC患者68例作为EOC组,另选取70例卵巢良性肿瘤患者作为良性组,选取同期体检健康者60例作为对照组;对比3组患者血清中lncRNA LOXL1-AS1与lncRNA MALAT1表达水平,以lncRNA LOXL1-AS1、lncRNA MALAT1表达水平中位值(1.90、1.38)分别将EOC患者分为lncRNA LOXL1-AS1低表达组(34例)和lncRNA LOXL1-AS1高表达组(34例),以及lncRNA MALAT1低表达组(33例)和lncRNA MALAT1高表达组(35例),对比EOC患者各表达组的临床病理特征、血清细胞凋亡分子[B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、生存素(Survivin)、B细胞CLI/淋巴瘤2关联凋亡基因1(Bag-1)]水平,并采用Pearson相关性分析法探讨其相关性;采用Kaplan-Meier生存曲线分析EOC患者各表达组的预后差异,多因素Cox分析EOC患者的预后不良的影响因素。结果 3组血清lncRNA LOXL1-AS1、lncRNA MALAT1、Bcl-2、Survivin、Bag-1水平从高到低依次为EOC组、良性组、对照组(P<0.05);血清Bax水平从低到高依次为EOC组、良性组、对照组(P<0.05)。不同年龄和病理类型的EOC患者lncRNA LOXL1-AS1、lncRNA MALAT1表达水平比较差异无统计学意义(P>0.05),不同国际妇产科联盟(FIGO)分期、淋巴结转移、组织分期的EOC患者lncRNA LOXL1-AS1、lncRNA MALAT1表达水平比较差异有统计学意义(P<0.05)。lncRNA LOXL1-AS1、lncRNA MALAT1高表达组Bcl-2、Survivin、Bag-1水平均高于lncRNA LOXL1-AS1、lncRNA MALAT1低表达组,Bax水平低于lncRNA LOXL1-AS1、lncRNA MALAT1低表达组(P<0.05)。Pearson相关性分析结果显示,血清lncRNA LOXL1-AS1与lncRNA MALAT1表达水平均与Bcl-2、Survivin、Bag-1均呈正相关(P<0.05),与Bax呈负相关(P<0.05)。随访2年后,lncRNA LOXL1-AS1低表达组累积生存率为85.29%,高于lncRNA LOXL1-AS1高表达组的55.88%,lncRNA MALAT1低表达组累积生存率为81.82%,高于lncRNA MALAT1高表达组的60.00%(P<0.05)。多因素Cox回归分析结果显示,淋巴结转移、lncRNA LOXL1-AS1与lncRNA MALAT1高表达是EOC患者预后不良的独立影响因素(P<0.05)。结论 EOC患者血清lncRNA LOXL1-AS1与lncRNA MALAT1水平呈高表达,且与淋巴结转移、FIGO分期、组织分期、凋亡因子表达及预后相关,其表达水平升高提示患者有EOC的可能,且其预后较差,检测血清lncRNA LOXL1-AS1与lncRNA MALAT1水平可能对EOC的诊断及治疗具有重要意义。

卵巢中肾样腺癌合并子宫腺肌病1例并文献复习

中肾样腺癌(mesonephric-like adenocarcinoma,MLA)是发生在子宫体或附件的一种罕见的恶性肿瘤。卵巢中肾样腺癌目前病例报道不多,其常伴发子宫内膜异位症、浆液性交界性肿瘤和低级别浆液性癌等,临床易与上皮性卵巢癌混淆。在本研究中我们报道了1例乳腺癌术后6年,卵巢MLA合并子宫内膜重度不典型增生及子宫腺肌病患者的诊治经过,同时,复习以往报道的67例卵巢MLA文献,进行归纳总结,为今后对此种罕见恶性肿瘤的研究提供更多的临床信息。

SALL4表达水平与卵巢癌患者化疗后疾病进展风险的相关性

目的探讨人类婆罗双树样基因4(spalt-like transcription factor 4,SALL4)表达水平与卵巢癌患者化疗后疾病进展风险的相关性。方法选取2019年1月至2021年10月于宁波大学附属人民医院进行化疗的94例卵巢癌患者为研究对象进行随访,截至2022年5月1日,最终89例获得随访,根据化疗后是否出现疾病进展分为进展组(n=49)和无进展组(n=40)。收集患者的临床资料,通过单因素和多因素Logistic分析卵巢癌患者化疗后疾病进展风险的影响因素。结果两组糖类抗原125(carbohydrate antigen 125,CA125)、SALL4、人附睾蛋白4(human epididymal protein 4,HE4)、中性粒细胞与淋巴细胞的比率(neutrophil to lymphocyte ratio,NLR)比较,差异均有统计学意义(P<0.05);单因素Logistic分析显示,CA125、SALL4、HE4、NLR为影响卵巢癌化疗后疾病进展的相关因素。多因素Logistic分析显示,SALL4、HE4、NLR为卵巢癌化疗后疾病进展的独立危险因素。受试者操作特征曲线显示,SALL4[曲线下面积(area under the curve,AUC)=0.902,95%置信区间(confidence interval,CI):0.830~0.974]、HE4(AUC=0.833,95%CI:0.739~0.926)、NLR(AUC=0.753,95%CI:0.653~0.853)能够预测卵巢癌患者化疗后疾病进展风险。结论SALL4、HE4、NLR与卵巢癌患者化疗后疾病进展风险密切相关,且可预测卵巢癌患者化疗后疾病进展风险。

Toll样受体4参与卵巢癌细胞增殖与凋亡的调控

目的 探讨Toll样受体4 (TLR4)异常表达对卵巢癌细胞增殖与凋亡的影响。方法 免疫组化法检测卵巢癌及其周围正常组织中TLR4的表达情况;构建针对TLR4基因的siRNA,转染人卵巢癌细胞株SKOV3,实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测TLR4 mRNA表达,Western blotting检测TLR4蛋白表达;CCK-8法检测TLR4 siRNA转染SKOV3细胞6~24 h后细胞的生长情况,流式细胞仪检测细胞转染24 h后的凋亡情况。结果 TLR4在卵巢癌及其周围正常组织中均有表达,且卵巢癌组织中TLR4表达量明显高于癌旁组织(P <0.05);TLR4 siRNA转染后,SKOV3细胞中TLR4 mRNA及蛋白表达水平明显降低(P <0.05);siRNA转染24 h后,SKOV3细胞活力下降,细胞凋亡率升高(P <0.05)。结论 TLR4参与了卵巢癌细胞增殖与凋亡的调控,干扰TLR4能抑制SKOV3细胞增殖,诱导细胞凋亡。

BRCC3/NLRP3促进子宫内膜异位症炎癌转化中的机制

目的:探讨NOD样受体蛋白3(NLRP3)炎症小体的活化在子宫内膜异位症(EMT)进展为EMT相关性卵巢癌(EAOC)过程中的作用及其机制。方法:选取2018年4月至2019年6月上海市长宁区幼保健院收治的EAOC、EMT、正常子宫内膜(CON组)组织标本各15例及患者的临床资料,利用免疫组织化学染色法、WB法检测EAOC、EMT和CON组织中NLRP3、caspase-1和IL-1β及含BRCA1/BRCA2的复杂亚基3(BRCC3)的表达水平。构建过表达BRCC3质粒和si-NLRP3质粒并转染EMT细胞CRL-7566,通过WB法检测转染后细胞中BRCC3蛋白的表达水平,利用MTT法、流式细胞术及Transwell实验分别检测转染后细胞增殖、凋亡、迁移与侵袭能力的变化。对过表达BRCC3组细胞进行干扰NLRP3实验,通过WB法检测干扰后BRCC3和NLRP3蛋白的表达水平,检测干扰后细胞增殖、凋亡、迁移与侵袭能力的变化。结果:EAOC和EMT组织中NLRP3、caspase-1、IL-1β和BRCC3的表达水平较CON组均呈明显升高(均P<0.01),且EAOC组织中NLRP3与BRCC3的表达呈正相关(r=0.65,P<0.01)。在CRL-7566细胞中过表达BRCC3显著促进细胞的增殖、迁移和侵袭并抑制细胞凋亡(均P<0.01),敲减NLRP3则抑制CRL-7566细胞的上述表型(均P<0.01),过表达BRCC3增强NLRP3的表达水平(P<0.01),而干扰BRCC3则抑制NLRP3表达(P<0.01);干扰NLRP3可以部分逆转BRCC3对细胞凋亡的抑制作用(P<0.01)、对细胞迁移(P<0.05)和侵袭(P<0.01)的促进作用。结论:EAOC和EMT组织中NLRP3和BRCC3均呈高表达,过表达BRCC3可促进CRL-7566细胞的增殖、迁移和侵袭并抑制细胞凋亡,与EMT向EAOC转化有关,BRCC3/NLRP3是潜在的EAOC炎癌转化预测标志物及治疗靶点。

车前子及其提取物治疗卵巢早衰的机制研究进展

近年来,卵巢早衰发病率逐年增长且患病群体愈显年轻化,对患者的身心健康造成极大的不利影响,但是目前仍未找到从根本上改善卵巢功能的治疗方法。笔者通过查阅相关文献发现车前子及其提取物在治疗卵巢早衰方面有独特的作用机制。本文将从以下5个方面分别论述车前子及其提取物在卵巢早衰中的作用:(1)减缓卵母细胞氧化应激,激活抗氧化酶活性,清除过量活性氧自由基,保护卵巢功能;(2)发挥类雌激素作用,调控下丘脑—垂体—卵巢轴,改善卵巢早衰及其相应症状;(3)通过激活丝裂原活化蛋白激酶通路与核转录因子转导通路,提高巨噬细胞吞噬能力从而达到调节机体免疫的作用,以恢复卵巢内部环境;(4)通过调节内质网应激以及生殖腺细胞凋亡关键基因表达水平,减少生殖细胞凋亡;(5)修复因化疗引起的卵巢结构及功能的损伤。本文对近几年国内外的相关研究文献进行综述,旨在对车前子治疗卵巢早衰的治疗机制进行更深入的研究,以期为临床工作提供借鉴与参考。